Metabolismo del Eritrocito

Fundatal 2006
Eritroblasto
Pérdida del núcleo

Reticulocito

Pérdida de ARN
y mitocondrias

Eritrocito
 Eritrocito
Metabolismo reducido

Ausencia de núcleo Ausencia de

y ribosomas mitocondrias

Ausencia de síntesis Ausencia de

de proteínas Ciclo de Krebs

No se produce renovación Glicólisis

del stock de enzimas anaerobia

Agotamiento progresivo de enzimas

que limitan la sobrevida del GR
 VIA EMBDEN-MEYERHOF
Glucosa Síntesis GSH
ATP
Mg HK
ADP
Glucosa 6P Vía Pentosas
GPI
Fructosa 6P
ATP
Mg PFK
ADP
Fructosa 1-6P
ALD
TPI
DHAP G3P
NAD Pi
Reducción G3PDH
NADH
Meta Hb
1,3DPG
 VIA EMBDEN MEYERHOF
1,3DPG DPGM pH (-)
ADP
Mg PGK Shunt Rapoport
ATP 2,3DPG
Luebering

3PG DPGP
pH (+)
Degradación PGM
Nucleótidos y
Vías de rescate 2PG
ENOL
PEP
ADP
Mg
ATP PK
LDH
PIRUVATO LACTATO
NADH NAD
 Funciones del ciclo de EMP
Producción de intermediarios de la glicólisis anaerobia
1. Inicia y mantiene la glicólisis
2. Síntesis de GSH
3. Activación de ribosa -5P (PRPP)
ATP 4. Mantenimiento de integridad y plasticidad de la
membrana
5. Mantenimiento de bomba cationes ATPasa dep

2,3 DPG Modulación de la curva de disociación de oxiHb

1. Interviene en la reducción de piruvato a lactato

NADH
2. Reducción de MetaHb
 CICLO DE LAS PENTOSAS
Glucosa
NADP NADPH

Glucosa 6P 6P-gluconato
G6PDH
NADP
6PGDH
NADPH
Ribulosa 5P + CO2

Xilulosa 5P Ribosa 5P

Fructosa 6P
F6P +
Gliceraldehído 3P G3P

(…)
SÍNTESIS y REGENERACIÓN DE GLUTATIÓN
Ácido glutámico Cisteína
ATP
GCS
ADP

Glicina  glutamilcisteína Stress

ATP oxidativo
Glutatión
Sintetasa
ADP
G6PD
G6P NADP GSH H2 O2 O2
SOD

6PG NADPH GSSG H2O

Glutatión Glutatión
Reductasa Peroxidasa
 CAPACIDAD REDUCTORA
Vía principal

NAD MetaHb R Cit b5 Hb

NADHdep 67%
NADH Cit b5 red Meta Hb
Vías accesorias
NADP MetaHb R AM oxid Hb 5%
NADPHdep
NADPH AM red Meta Hb

NADP GSH dehidroasc Hb

GSH R 16%
NADPH GS-SG ascórbico MetaHb
NADP GSH R GSH Hb
NADPH GS-SG MetaHb 12%
Glucosa Glu H 2O + ½ O 2 MetaHb
HK
Cys - prevención
 GC Catalasa - reducción
G6P Gly Fe++
NADP+ 2 GSH H2O2 Hb Cb5+++ NADH
G6PD

NADPH Cb5++ NAD+

GS=SG-R GSH-P
F6P

6PG (FAD) (Se)

NADP+ AzMet NADPH
6PGD

ox
Fe+++
NADPH GS=SG 2 H20 Hb AzMet NADP+
F1-6DP

R5P red
Hemicromos reversibles

PRPP Hemicromos irreversibles

G3P Cuerpos de Heinz
 VÍA DE RESCATE DE PURINAS
ATP
ATP-asa

ADP AK
Adenosina Quinasa AMP APRT
Adenina
ADP
PPi
ATP
ADENOSINA UMP PRPP
P5’N CM PPi
H2O Pi P IMP
ADA NH3 Uridina AMP RPPK
Citidina ATP
Hipoxantina
Shunt
Inosina R-5-P HMP
Pi
R-1,5-P2

PNP R-1-P PRM

 ARN ribosomal

ribonucleasa

nucleótidos
purínicos pirimidínicos
AMP GMP UMP CMP
P5´N

Pi
Uridina Citidina
Anemias Hemolíticas

Pruebas de laboratorio
ANEMIA HEMOLÍTICA – Pruebas de Laboratorio

 Objetivos:

1. Destrucción acelerada de G. R.
2. Eritropoyesis acelerada
3. Diagnóstico diferencial
ANEMIA HEMOLÍTICA – Pruebas de Laboratorio

Destrucción acelerada de Glóbulos Rojos

– Vida ½ eritrocitaria con 51Cr 
% Actividad de 51Cr
100

50

0
10 27 Días

  Bilirrubina indirecta
  LDH
– Signos de hemólisis intravascular
ANEMIA HEMOLÍTICA – Pruebas de Laboratorio
Signos de hemólisis intravascular
  Haptoglobina y hemopexina
Hb
  Hemoglobina libre en plasma + Hapto
– Metahemalbuminemia
– Hemoglobinuria Hb Hb-hapto
– Hemosideruria libre

  Estercobilinógeno Dimerosαβ
y urobilinógeno
MetaHb

Hem Globina

+ Hemopexina
Hemopexina-Hem
+ Albúmina
MetahemaAlb + Hemopexina
ANEMIA HEMOLÍTICA – Pruebas de Laboratorio

Eritropoyesis acelerada
– SANGRE:
Reticulocitosis
Policromatofilia
Macrocitosis
Punteado basófilo
Eritroblastos circulantes
– M.O.:
Hiperplasia eritroide
– FERROCINÉTICA:
 Turn over de Fe
ANEMIA HEMOLÍTICA – Pruebas de Laboratorio

Diagnóstico diferencial
– Hemograma completo
– Examen del frotis de sangre periférica
– Recuento de reticulocitos
– Prueba de Coombs
– Electroforesis de Hb
– Resistencia osmótica globular
– Autohemólisis
– Test de Ham
– Test de isopropanol
Déficit de Piruvato Kinasa
 Déficit de Piruvato Kinasa
Test de Screening
– Autohemólisis:
Fundamento: Hemólisis por anomalía intrínseca
del GR al someterlo a incubación a 37ºC / 48 hs.
con y sin agregado de glucosa y ATP
Resultado:
– V.N: < 2.0% en ausencia de glucosa
– < 0.9% en presencia de glucosa
Desventaja:
– Tiempo (laboratorista)
– No diagnóstico diferencial
 Déficit de Piruvato Kinasa
Test de Screening
– Técnica de Fluorescencia:
PK
PEP + ADP PIRUVATO + ATP

LDH
PIRUVATO + NADH + H+ LACTATO + NAD+

Fluoresce NO Fluoresce
 Déficit de Piruvato Kinasa
Test Diagnósticos:
– Dosaje cuantitativo de la actividad enzimática
de PK
PK
PEP + ADP PIRUVATO + ATP

LDH
PIRUVATO + NADH + H+ LACTATO + NAD+

Desventajas:
– Existencia de variantes cinéticas con  afinidad por el
sustrato (System Low)
– Reticulocitosis
– Biología Molecular
 Déficit de
Glucosa-6-Fosfato-dehidrogenasa
 Déficit de G6PDH
Tests de Screening
– Test Brewer:
Pasos:
1. Hb (roja) + NO2Na  Hbi (marrón)
2. Hbi + Azul Metileno + NADPH  Hb + NADP + leucobase

Desventaja:
– No sirve para detección de heterocigotas
Glucosa Glu H 2O + ½ O 2 MetaHb
HK
Cys - prevención
 GC Catalasa - reducción
G6P Gly Fe++
NADP+ 2 GSH H2O2 Hb Cb5+++ NADH
G6PD

NADPH Cb5++ NAD+

GS=SG-R GSH-P
F6P

6PG (FAD) (Se)

NADP+ AzMet NADPH
6PGD

ox
Fe+++
NADPH GS=SG 2 H20 Hb AzMet NADP+
F1-6DP

R5P red
Hemicromos reversibles

PRPP Hemicromos irreversibles

G3P Cuerpos de Heinz
 Déficit de G6PDH
Tests de Screening
– Test Citoquímico
NO2Na HCN
Hb Hbi CNHbi (sol. con H2O2)

MTT G6PDH

Formazan insol.
 Déficit de G6PDH
Tests de Screening
– Electroforesis de isoenzimas de G6PDH
 B: normal
 A: normal africana
 A-: población afroamericana
 Mediterránea: población blanca
 Déficit de G6PDH
Tests diagnósticos:
– Dosaje cuantitativo de la actividad enzimática
de G6PDH
G-6-PDH
G6P + NADP+ 6PG + NADPH + H+
6-PGDH
6PG + NADP+ Ribulosa-5-P + NADPH + H+ + CO2

– Biología Molecular
Hora de despertarse…

¡Muchas Gracias!