SEMINARIO 1

ENZIMAS DE USO CLÍNICO Y

DIAGNÓSTICO
• Varón de 37 años de edad, soltero, vigilante, con
tiempo de enfermedad de 4 días
aproximadamente con astenia y decaimiento.
Hoy ingresa al hospital por presentar malestar
general, coloración amarillenta de piel y mucosas
y días antes alza térmica no justificada ni
cuantificada. Abdomen distendido y dolor a nivel
de reborde costal derecho. Presenta náuseas y
vómitos por lo que no tolera alimentos por vía
oral. No presenta ánimo
• El laboratorio mostró: AST 1 200 UI/l (VN 7 a
20) ALT: 1800 UI/l. (VN 9 a 30 U/l) Fosfatasa
alcalina: 125 U/l (VN 130U/l)
Gammaglutamiltranspeptidasa: 160 U/l,
Bilirrubina total: 4 mg/dL Bilirrubina directa: 3
mg/dL. Inmunoserología: Antígeno de
superficie de la hepatitis B: reactivo.
 HBsAg
• Es uno de los marcadores serológicos más
tempranos y más importante de infección por
VHB.
• Su detección es crucial para el diagnóstico
precoz y el tratamiento de la infección por
VHB.
 HBV
• HBV es un problema de salud mundial.
• Dos mil millones de personas en todo el
mundo han contraído el VHB, 350 millones de
ellos han desarrollado la hepatitis B crónica
(HBC).
• 15% de los pacientes con HBC mueren de
hepatitis asociadas a enfermedades como la
cirrosis y el carcinoma hepático.

doi: 10.1309/LM4ZM4Q8CQRLZZYG (2012) LabMedicine, 43, 15-17.

• The national academy of clinical biochemistry y la American
association for the study of liver disease, recomiendan un panel
específico de exámenes para ser usado en la evaluación inicial de
un paciente con una enfermedad hepática conocida o sospechada,
designado como “ panel de función hepática”

• Proteínas totales
• Albúmina
• Aspartato aminotransferasa (AST o TGO)
• Alanino aminotransferasa (ALT o TGP)
• Fosfatasa alcalina
• Bilirrubina total
• Bilirrubina directa
 Pruebas indicadoras de necrosis
Transaminasas
• La ALT y AST, son los indicadores de necrosis mas
comúnmente utilizados.
• Se encuentran en altas concentraciones en las células
hepáticas, donde catalizan la transferencia de grupos
aminos para producir ácido pirúvico y oxaloacético,
utilizando vitamina B6 como cofactor.
• Las transaminasas son sensibles pero poco específicas
del daño de hepatocitos, siendo la ALT más específica
que la AST(también se encuentra en el músculo
esquelético y cardiaco, en el riñón y eritrocitos.
 Pruebas indicadoras de necrosis
Deshidrogenasa láctica
• Se encuentra en el citoplasma de los hepatocitos.
• Cataliza la oxidación reversible de ácido láctico a
ácido pirúvico.
• Existen cinco isoenzimas, LD1 a LD5, distribuidas
en hígado, músculo cardiaco, riñón y eritrocitos,
lo cual le resta especificidad como indicadora de
daño hepático.
 Pruebas indicadoras de colestasis
Fosfatasa alcalina
• Se encuentra presente en varios tejidos: Hígado,
Hueso, riñón , intestino y la placenta.
• En el hígado se encuentra en la superficie canalicular y
por tanto es un marcador de disfunción biliar,
incrementándose sus valores en obstrucciones de las
vías biliares, procesos infecciosos o en presencia de
masas.
• También se encuentra aumentada durante el tercer
trimestre del embarazo, en una gran variedad de
enfermedades intestinales y en la cirrosis.
 Pruebas indicadoras de colestasis
Gamma-glutamil transferasa (GGT)
• Regula el transporte de aminoácidos a través
de las membranas celulares.
• Proviene casi exclusivamente del hígado.
 Pruebas metabólicas
Bilirrubina
• Es el principal metabolito del grupo hemo de
la hemoglobina, mioglobina y los citocromos.
• El aumento de la Bilirrubina total junto con el
aumento de la Bilirrubina directa se presenta
cuando hay necrosis o colestasis.
 Pruebas que evalúan la síntesis
proteica
Albúmina.
• Es la principal proteína producida por el
hígado.
Tiempo de protrombina.
• Es dependiente de la actividad de los factores
de coagulación I, II, V, VI y X, todos ellos
sintetizados en el hígado.
Coenzimas y Cofactores Enzimáticos
Coenzimas y Cofactores Enzimáticos
 Enzimas
Macromoléculas biocatalizadoras que aceleran
reacciones químicas en seres vivos.

Ecuación general de las reacciones enzimáticas

E  S  Cof1  ES  E  P  Cof2
modelos que explican la especificidad
de las enzimas
1. Modelo Cerradura - Llave
modelos que explican la especificidad
de las enzimas
2. Modelo del Encaje Inducido
 Coenzimas
• Molécula orgánica derivada generalmente de
vitaminas.

• Afinidad por la enzima similar a la del

sustrato.
Coenzimas de naturaleza vitamínica
 Factores que influyen sobre los índices de
reacciones catalizadas por enzimas

• Concentración de sustrato
• Concentración de enzima.
• Temperatura.
• pH.
Concentración de sustrato

1. Efecto de la concentración de sustrato sobre la velocidad inicial de una reacción catalizada por enzima.

2. Representación de una enzima en la presencia de una concentración de sustrato que está por debajo de
Km (A), a una concentración igual a Km (B), y a una concentración bastante por arriba de Km (C). Los puntos A,
B y C corresponden a esos puntos en la figura superior.
 Factores que influyen sobre los índices
de reacciones catalizadas por enzimas
Temperatura.
.
 Aumentar la temperatura
incrementa la energía cinética de
las moléculas.
 Existe una temperatura óptima
tras la cual los aumentos provocan
desnaturalización de la proteína
enzimática y pérdida de la
actividad.
 Las enzimas de seres humanos
por lo general muestran
estabilidad a temperaturas de
hasta 45 a 55°C.
 Factores que influyen sobre los índices
de reacciones catalizadas por enzimas
Efecto del pH sobre la
actividad de enzima
(Concentración de ion hidrogeno).

 Casi todas las enzimas intracelulares

muestran actividad óptima a
valores de pH entre 5 y 9.
 Factores que influyen sobre los índices
de reacciones catalizadas por enzimas
Efecto del pH sobre la
actividad de enzima
(Concentración de ion hidrogeno).

 Casi todas las enzimas intracelulares

muestran actividad óptima a
valores de pH entre 5 y 9.
 1. Oxidoreductasas
• Procesos de óxido-reducción
 2. Transferasas
• Transferencia de grupos funcionales
 3. Hidrolasas
• Catalizan la ruptura de enlaces químicos con la
participación de las moléculas de agua.
 4. Liasas
• Catalizan reacciones en las que se añaden o
eliminan grupos H2O, NH3, CO2 para formar o
eliminar doble enlace, respectivamente.
 5. Isomerasas
• Catalizan isomerizaciones de diversos tipos
óptica, geométrica, funcional, de posición,
etc.(cis-trans, ceto-enol, aldosa-cetosa )
 6. Ligasas
• Ligan o separan compuestos y para ello
utilizan energía o liberan energía.
Evaluación n° 1
1. Clasifique la enzima según la reacción
mostrada.
a) Oxidoreductasas
b) Liasas
c) Ligasa
d) Ninguna
2. Pruebas que directamente indican
necrosis hepática, excepto:
a) TGO
b) TGP
c) GGT
d) LDH
3. SEGÚN EL GRAFICO, MARCAR V o F
( ) Para una enzima típica, a medida que la concentración
de sustrato aumenta, vi se incrementa hasta que alcanza
un valor máximo Vmax
( ) Cuando los aumentos adicionales de la concentración de
sustrato no aumentan mas la vi, se dice que la enzima esta
“saturada” con sustrato.
A) VV B) FF C) VF D) FV
4. Marque lo incorrecto.
a) En una reacción enzimática, al aumentar la
temperatura disminuye la energía cinética de
las moléculas.
b) Las enzimas de seres humanos por lo general
muestran estabilidad a temperaturas de hasta
45 a 55°C.
c) Casi todas las enzimas intracelulares muestran
actividad óptima a valores de pH entre 5 y 9.
d) Las reacciones enzimáticas se inician cuando el
sustrato se une al sitio activo de la enzima
5. En relación a las enzimas marque lo correcto
a) Son altamente específicas tanto desde punto de
vista del sustrato como del tipo de reacción.
b) Existen dos modelos que explican la
especificidad de las enzimas: modelo cerradura-
llave y modelo del encaje Inducido.
c) Son macromoléculas biocatalizadoras que
aceleran reacciones químicas en seres vivos
d) todas
6. Marque lo correcto
a) Las coenzimas son moléculas orgánicas que
derivan generalmente de vitaminas.
b) El cofactor puede ser: átomo, ion o molécula
orgánica que participa en el proceso
catalítico sin ser enzima ni substrato.
c) El complejo E-S es la piedra angular de la
cinética enzimática.
d) a +b + c
7. Marque lo correcto.
a) Las enzimas ayudan a establecer un diagnóstico
como es el caso de la amilasa en la pancreatitis
aguda.
b) Las Isoenzimas, son enzimas que realizan la
misma función pero difieren en su estructura
química y propiedades cinéticas.
c) Las formas isoenzimáticas pueden pertenecer a
distintos tejidos revelando sus modificaciones el
tejido que le dio origen.
d) Todas son correctas
8.- Marque lo incorrecto
a) Las enzimas ejercen su función
predominantemente en el exterior celular.
b) Cada enzima tiene un pH óptimo de trabajo.
c) Las enzimas suelen nombrarse en base a la
reacción que catalizan.
d) La gamma-glutamil transferasa (GGT) regula el
transporte de aminoácidos a través de las
membranas celulares.
Evaluación n° 2
1. Clasifique la enzima según la reacción
mostrada.
a) Oxidoreductasas
b) Liasas
c) Hidrolasas
d) Ligasas
2. Pruebas que directamente indican necrosis
hepática, excepto:
a) TGO
b) LDH
c) Albumina
d) TGP
3. SEGÚN EL GRAFICO, MARCAR V o F
( ) Para una enzima típica, a medida que la concentración
de sustrato aumenta, vi se incrementa hasta que alcanza
un valor máximo Vmax
( ) Cuando los aumentos adicionales de la concentración de
sustrato no aumentan mas la vi, se dice que la enzima esta
“saturada” con sustrato.
A) VV B) FF C) VF D) FV
4. Marque lo incorrecto.
a) En una reacción enzimática, al aumentar la
temperatura disminuye la energía cinética de
las moléculas.
b) Las enzimas de seres humanos por lo general
muestran estabilidad a temperaturas de hasta
45 a 55°C.
c) Casi todas las enzimas intracelulares muestran
actividad óptima a valores de pH entre 5 y 9.
d) Las reacciones enzimáticas se inician cuando el
sustrato se une al sitio activo de la enzima
5. En relación a las enzimas marque lo correcto
a) Son altamente específicas tanto desde punto de
vista del sustrato como del tipo de reacción.
b) Existen dos modelos que explican la
especificidad de las enzimas: modelo cerradura-
llave y modelo del encaje Inducido.
c) Son macromoléculas biocatalizadoras que
aceleran reacciones químicas en seres vivos
d) todas
6. Marque lo correcto
a) Las coenzimas son moléculas orgánicas que
derivan generalmente de vitaminas.
b) El cofactor puede ser: átomo, ion o molécula
orgánica que participa en el proceso
catalítico sin ser enzima ni substrato.
c) El complejo E-S es la piedra angular de la
cinética enzimática.
d) a +b + c
7. Marque lo correcto.
a) Las enzimas ayudan a establecer un diagnóstico
como es el caso de la amilasa en la pancreatitis
aguda.
b) Las Isoenzimas, son enzimas que realizan la
misma función pero difieren en su estructura
química y propiedades cinéticas.
c) Las formas isoenzimáticas pueden pertenecer a
distintos tejidos revelando sus modificaciones el
tejido que le dio origen.
d) Todas son correctas
8.- Marque lo incorrecto
a) Las enzimas ejercen su función
predominantemente en el exterior celular.
b) Cada enzima tiene un pH óptimo de trabajo.
c) Las enzimas suelen nombrarse en base a la
reacción que catalizan.
d) La gamma-glutamil transferasa (GGT) regula el
transporte de aminoácidos a través de las
membranas celulares.