PERHIT. KDR 2
Teknik Kuantitasi
Teknik:
Standar Eksternal
Standar Internal
Standar Adisi
TNK STD 3
Standar Eksternal
TNK STD 4
Standar Eksternal
- Senyawa yg digunakan sama dengan senyawa
yg dianalisis dalam sampel
TNK STD 5
Standar Eksternal
Misal
Penetapan kadar Parasetamol dalam tablet,
secara Spektrofotometri UV digunakan
standar baku Parasetamol
Untuk keperluan
mengembangkan dan memvalidasi metode
penetapan kadarnya,
dapat ditempuh tiga strategi:
PERHIT. KDR 7
1. Single-Point Calibration
Digunakan satu macam konsentrasi standar
Absorban sampel
x Kadar baku = Kadar sampel
Absorban baku
Syarat:
Nilai Abs.baku dan Nilai Abs.sampel
berdekatan
Syarat:
Tidak diperbolehkan adanya Ekstrapolasi
KENAPA??
PERHIT. KDR 10
PERHIT. KDR 11
3. One Standard Calibration
for Each Strength
PERHIT. KDR 12
Bagaimana Menghitung Kadar
Dengan perbandingan nilai absorban sampel
terhadap nilai absorban baku [yang sudah
diketahui kadarnya]
PERHIT. KDR 13
Linearitas [ Menurut ICH, Q2(R1) ]
Chan dkk., 2004, p.14.
Linearitas
suatu metode analisis:
PERHIT. KDR 15
Kuatitasi Analit
Tergantung pada kepatuhan pemenuhan
hukum Beer
Tergantung linearitas pada rentang konsen-
trasi tertentu
Oleh karenanya:
- konsentrasi sampel kerja dan sampel yang
diuji untuk akurasi harus pada rentang yang
linear
.
PERHIT. KDR 16
Linearitas
Biasanya dipersiapkan langsung dengan
pengenceran larutan baku stock.
Syarat Linearitas:
Coeffcient of determination ( r2 ) ≥ 0.997
PERHIT. KDR 18
lanjutan…
Linearity = Linieritas Y = bX + a
- hasil pengukuran menggunakan suatu
metode analisis yang berupa: abs, luas area,
atau tinggi puncak menunjukkan proporsio-
nalitas dengan kadar zat yang dianalisis
Syarat:
Kazakevich and LoBrutto, 2007, p.471-481; Ahuja and Rasmussen, 2007, p.292;
Snyder dkk., 1997, p. 691 dan Chan dkk., 2004, p.16.
PERHIT. KDR 19
Rentang Linearitas [ ICH ]
PERHIT. KDR 20
Cara Menentukan Linearitas Kalibrasi
[ Replikasi 3 kali ] bolehkah repeatasi?
PERHIT. KDR 21
PERHIT. KDR 22
PERHIT. KDR 23
Kurva Baku [ 3 replikasi ]
Lakukan replikasi !
PERHIT. KDR 24
Apa perbedaan replikasi dan repeatasi??
TNK STD 25
Lakukan replikasi !
Haruskah Abs: 0,2 -
08? Kenapa?
PERHIT. KDR 26
TNK STD 27
Respon Sampel Kadar ?
Respon sampel hasil pengukuran dicatat
Kadar Sampel
TNK STD 28
Contoh
Seorang peneliti melakukan pengukuran kadar amoxicillin
dalam suatu sampel tablet secara HPLC dengan metode
Standar External multiple point calibration. Luas Area
kromatogram dari sampel adalah 11345. hitung kadar
amoxicillin tsb?
pengukuran Standar baku amoxicillin adalah sbagai berikut.
TNK STD 30
Standar Internal
TNK STD 31
lanjutan…
TAHAPAN PREPARASI
TNK STD 32
lanjutan…
TNK STD 33
lanjutan…
TNK STD 34
Syarat
Standar Internal
TNK STD 35
Syarat Standar Internal
TNK STD 36
lanjutan…
( kons. Sampel )
TNK STD 38
Calibration Methods
Internal Standards
Ax A
F S
TNK STD
X S 39
TNK STD 40
Respon Sampel Kadar ?
Respon sampel juga dibuat rasio dengan
respon standar internal [ IS ].
Kadar Sampel
TNK STD 41
Contoh
Penetapan kadar hidrokortison dalam sebuah krim
dengan menggunakan baku internal betametason
dengan konsentrasi standar 5 ppm. Jika respon
sampel menunjukkan luas puncak hidrokortison
23564 dan luas puncak betametason 5693. maka
tentukan konsentrasi hidrokortison dalam sampel!
TNK STD 42
TNK STD 43
Standar Adisi
TNK STD 44
Standar Adisi
- Senyawa standar yg di + kan sama dengan
senyawa analit dalam matriks
SYARAT
S / N > 10
TNK STD 46
Standard Addition
Methods
Calibration Methods
Standard Addition
(iii) Procedure:
TNK STD 48
Calibration Methods
Standard Addition
TNK STD 49
Method of Standard Addition
adds varying amount of standard to an unknown
which already contains some analyte
TNK STD 50
Calibration Methods
Standard Addition
(f) Plot signals as a function of the added known analyte concentration and
determine the best-fit line.
TNK STD 51
Calibration Methods
Standard Addition
TNK STD 53
Terima Kasih
TNK STD 54