Instituto Politécnico Nacional

Unidad Profesional Interdisciplinaria de

Ingeniería Campus Zacatecas

Biosíntesis de
bioplásticos
Equipo:
amigables con el ● Juan José Flores Hernández
planeta que ● Guadalupe del Consuelo
Salazar Valdez
utilizan fuentes ● Monserrat Sosa Rodríguez
de carbono
renovables 1
1.
IMPORTANCIA
2
 Los plásticos en la vida moderna
Muchas actividades de la vida moderna han sido influenciadas
por el uso de plásticos, esto debido a sus propiedades
materiales útiles y sus bajos costos de producción. Es
importante en algunos campos de la economía, entre los cuales
destaca:

El uso de combustibles fósiles para la

producción de productos plásticos disminuye
la existencia de estos combustibles, además de
ser una actividad que ha ido aumentado la
demanda de los mismos.

3
 El problema del plástico
Se utilizan en muchos sectores productivos, y
debido a su bajo costo, muchas ocasiones se
opta por no reutilizar estos materiales.

Además de que se disminuyen las reservas de

combustibles fósiles con su producción,
también se considera como un producto que no
es “respetuoso con el medio ambiente”, pues se
calcula que tarda entre 100 y 1,000 años en
degradarse.

4
 ¿Qué son los PHA?
Se acumulan en forma de gránulos
intracelulares.
Son bio poliésteres sintetizados
Se almacenan en respuesta a un
intracelularmente por algunos
estrés ambiental o limitación de
microorganismos como reserva de
nutrientes.
carbono y energía.
En condiciones de agotamiento de carbono,
los PHA son degradados por depolimerasas
y metabolizados como fuentes de energía y
carbono.

Éstos son conocidos como bioplásticos, y son

unos de los candidatos potenciales en la
sustitución de algunos plásticos a base de
petróleo. Sin embargo, la principal limitación
es el alto costo de producción.

Imagen 1.- Vista microscópica de bacterias

llenas de PHA 5
En general, muchas bacterias pueden producir PHA, en especial PHB. Sin embargo, muy
pocas de ellas pueden ser utilizadas para fines de producción industrial. Como cepa de
producción industrial de PHA, la bacteria debe de cumplir los siguientes requisitos:

❏ Crecimiento rápido en fuentes de carbono baratas

❏ Alta acumulación de PHA en las células
❏ Alta eficiencia de transformación de sustrato a producto
❏ Debe ser inofensivo para animales, el ser humano, y el medio ambiente
❏ Debe de ser fácil la extracción del PHA

Para éste fin, las bacterias más utilizadas industrialmente,

debido a que cumplen con los requerimientos anteriores, han
sido: Ralstonia Eutropha, y Alcaligenes Latus

6
“
2.
METODOLOGÍA
7
Microorganismo

“
Se utilizó la bacteria gramnegativa
Se inoculó en caldo nutritivo

Cupriavidus necator como cultivo de

producción

Se realizó tinción de
Gram y se verificó
su pureza en el
microscopio a
1000x.

8
Prueba rápida para la producción de PHB

“
Se transfirieron 10 µL de cultivo después de 48 horas a
un tubo Eppendorf con 30 µL de naranja de acridina y Se centrifugó a 4000 rpm
se incubó durante 30 minutos a 30ºC. durante 5 minutos.

Se resuspendió el sedimento en
agua destilada y se observó en
el microscopio de fluorescencia
de 260 nm.

9
 Fermentación microbiana

“
Se inoculó medio TSB con una sola colonia de
bacterias, para posteriormente incubar por 24
horas a 30ºC. Se verificó pureza con tinción de
Gram.
Se añadieron 25 mL de medio inoculado TSB a
250 mL de medio BSM, para posteriormente
agregar residuos agrícolas (AW), como fuente de
carbono, y glucosa a concentraciones diferentes
(10, 20 y 30 g/L).

Se llevó a cabo la fermentación en una incubadora

giratoria a 30ºC.

10
Recuperación de PHB

Se recuperó la biomasa seca a partir de un

método de digestión utilizando hipoclorito de
sodio.

“
Cuantificación de PHB

La absorbancia se midió a una longitud de onda de 235

nm, con un blanco de ácido sulfúrico.

Se generó una curva de calibración y con base en ella

se determinó la concentración de PHB.

11
Mezcla de polímeros y fabricación de películas

El PHB fabricado previamente se utilizó

para fabricar películas con el butirato

“
acetato de celulosa (CAB), por el
método de colada, a diferentes
proporciones con un control del 100%
de PHB.

Proporciones PHB:CAB
- 50:50
- 60:40
- 70:30
- 80:20
- 90:10

12
Prueba de resistencia a la tracción y biodegradación

El punto de ruptura del PHB puro y sus

mezclas, se realizó mediante el instrumento
INSTRON, el cual mide la resistencia a la

“
tracción.

Para la prueba de laboratorio, se tomaron y

pesaron películas moldeadas de PHB puro
(biodegradable) y mezclas de PHB:CAB
(sintético), para posteriormente depositar en un
recipiente con tierra de maceta, y evaluar
periódicamente el peso de dichos plásticos.

13
3.
TÉCNICAS
(FUNDAMENTO)
14
 Tinción de Gram

● Utilizada para conocer la pureza

del cultivo

Inoculación en el medio salino basal K2HPO4 1 g/L

KH2PO4 1 g/L
Medio utilizado para el lote de fermentación
KNO3 1 g/L

Utiliza tanto compuestos orgánicos como (NH4)2SO4 1 g/L

inorgánicos como fuente de energía
MgSO4.7H2O 0.1 g/L

NaCl 10 mL/L 15
Método de
espectrofotometría Crees test (toxic test)

● Cuantificación de PHB con una

absorbancia a 235 nm.
● Se utilizó como blanco ácido
sulfúrico

Plantas jóvenes de berro (Lepidium sativum)

16
 Examen de fuerza de Examen de
tensión con el instrumento biodegradación
INSTRON

Instrumento para el ensayo de compresión de

plásticos rígidos ASTM D695

17
4.
¿CÓMO
INTERACTÚA LA
BIOTECNOLOGÍA
CON LA
INGENIERÍA
AMBIENTAL?
18
 ¿Qué es la Biotecnología?

Es el conjunto de técnicas que

hace uso de organismos o
sustancias provenientes de
éstos para elaborar o modificar
un producto.

Uso de fermentación bacteriana

para producir bioplásticos, una Problemática del uso
alternativa biodegradable y producción de
derivado de fuentes renovables plásticos.
que no daña flora y fauna.

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 Referencias bibliográficas
Segura, Daniel . (14 de Noviembre de 2007). Contaminación ambiental y
bacterias productoras de plásticos biodegradables. 7 de Febrero de 2018, de
UNAM Sitio web:
http://www.ibt.unam.mx/computo/pdfs/libro_25_aniv/capitulo_31.pdf
Chiellini, Emo. (2002). Biodegradable polymers and plastics. Pisa, Italia:
Springer Science.

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