DITERPENOID

Ika Aulia Rahmi

 PENDAHULUAN
• Senyawa diterpenoid merupakan senyawa yang beraneka
ragam yang mempunyai kerangka karbon C20 yang berasal
dari 4 unit isopren. Ada 3 kelas diterpenoid : diterpena damar,
diterpena racun, dan giberelin. (Harborne, 1987).
• meliputi senyawa seperti asam abietat dan asam agatat yang terdapat dalam damar
tumbuhan mutakhir dan tumbuhan fosil.Di alam berfungsi sebagai pelindung ketika
Diterpen dikeluarkan sebagai eksudat dari kayu pepohonan atau sebagai getah tumbuhan herba.
damar

• grayanatoksin, contohnya grayanatoksin-1 yang terdapat dalam daun kebanyakan jenis

Diterpen Rhododendron dan Kalmia.
racun

• segolongan hormon yang merangsang pertumbuhan secara umum dan diketahui sangat
tersebar luas pada tumbuhan. Asam giberalat adalah giberelin paling dikenal, tetapi
Giberelin sebenarnya lebih dari 60 senyawa dalam deret ini sekarang telah dikenal.
• Seperti terpenoid lainnya, diterpenoid tersebar luas di
kerajaan tanaman, dan kebanyakan secara biosintesis berasal
dari geranylgeranyl diphosphate) sesuai dengan siklisasi yang
terjadi . Diterpenoid dibagi menjadi lebih dari 45 kelas, juga
ditemukan di organisme laut, yang memberikan kerangka yang
menarik.
asiklik Ex. phtanes

Ex : Labdanes,
Bisiklik halimanes,
clerodanes

Ex : Pimaran
Diterpenoid Trisiklik abietanes, cassanes,
rosanes etc

Devappa et al., Ex : trachylobanes,

Tetrasiklik
2011; Dias et al., kauranes atisanes
2012
Ex : taxanes, cembranes,
makrosiklik daphnanes, tiglianes,
ingenanes
Keterangan : Kerangka diterpenoid dari terestrial dan kelautan Phytane
(1) Labdane (2) Halimane (3) Clerodane (4) Pimarane (5) Isopimarane
(6) Podocarpane (7) Rosane (8) Cassane (9) Abietane
 Klasifikasi
Kingdom Animalia
Subkingdom Radiata
Phylum Porifera

Class Demospongiae
Order Dictyoceratida
Family Spongiidae
Genus Hippospongia

Species Hippospongia
lachne sheepswool sponge
• Kandungan dan aktivitas :
• Spons dari genus Hippospongia dilaporkan menjadi
sumber polyketides, sesquiterpenes, sesterterpenes dan
sulfat, furanoterpenes, asam triterpenoat, asam lemak, dan
sterol. Metabolit ini menunjukkan spektrum aktivitas
biologis yang luas, termasuk sitotoksik, antifungal, anti-
inflamasi, vasodilatasi koroner, dan aktivitas
penghambatan protease RCE11. Sebuah survei literatur
mengungkapkan bahwa tidak ada metabolit anti-alergi
yang telah diisolasi dari spons genus ini
 Sponge 1,2 kg potong kecil
Ekstraksi dan
perkolasi EtOH 95% Isolasi
Suspended (H2O), ekstraksi secara berurutan dg EtOAc Hasil: EtOAc- soluble
extract

Ekstrak EtOAc, larutkan dalam aqueos MeOH

90%, dan Ekstraksi dengan Petroleum eter Hasil : Ekstrak PE

Fase aqueos MeOH 90%, diencerkan hingga 60% dengan

Ekstrak CH2CL2
MeOh dan H2O, diekstraksi dengan CH2Cl2

Ekstrak CH2Cl2, Kromatografi Kolom Silika gel dg elusi gradien

MeOH dalam CH2Cl2
Fraksi C, KK, dibuat subfraksi (C1-C3)

6 fraksi (A-F)
• Subfraksi C2 dipisahkan oleh CC pada ODS untuk
menghasilkan sembilan subfraksi (C2 A-C2 I).

• Lalu, dimurnikan dengan HPLC semipreparatif terbalik

untuk mendapatkan 3 (3,0 mg, tR = 51,0 min).

• Fraksi C2D dimurnikan lebih lanjut dengan HPLC

semipreparatif terbalik untuk mendapatkan 1 (2,4 mg, tR
= 15,2 menit) dan 2 (2,8 mg, tR = 18,0 min).

Selanjutnya....
 Elusidasi Struktur

Keterangan :
(1) Hipposponlachnin A,
(2) (2) Hipposponlachnin B , dan
(3) dolabellane diterpene (1R*,2E,4R*,7E,10S*,11S*,12R*)-
10,18-diacetoxydolabella-2,7-dien-6-one,
• X-ray crystallographic structures of 1 and 2

Keterangan : (1) Hipposponlachnin A,

(2) Hipposponlachnin B
Uji Antialergi
Selanjutnya...
Pengukuran aktivitas β-heksosaminidase : media kultur
disentrifugasi (17.000 g, 10 menit) pada suhu 4 ° C.
Supernatan (50 μL) dicampur dengan 50 μL buffer natrium
sitrat 0,1 M (pH 4,5) yang mengandung 10 mM 4-nitrofenil
N-asetil-β-D-glukosaminida dalam 96-well plate, dan
kemudian diinkubasi selama 90 menit pada 37 ° C.
Absorbansi diukur pada 405 nm setelah menghentikan
reaksi dengan 0,2 M glisin (pH 10,0).

Pengukuran Interleukin-4 (IL-4) dan Leukotriene B4

(LTB4) : semua media budidaya disentrifugasi pada suhu 4
° C, dan hipposponlachnins A (1) dan B (2) disimpan pada
suhu -80 ° C sampai pengujian kadar logam. IL-4 dan
LTB4 dihitung menggunakan kit ELISA .
 Hasil
• Tidak ada sitotoksisitas yang signifikan yang diamati pada sel
RBL-2H3 setelah 24 jam perlakuan dengan senyawa 1 atau 2.

• Senyawa 1 dan 2 menunjukkan aktivitas yang lebih tinggi

(IC50 49,37 dan 23,91 μM, masing-masing) dalam pelepasan
penghambatan β-heksosaminidase dibandingkan dengan obat
anti-asma yang tersedia di pasaran, ketotifen fumarat (IC50 =
63,88 μM).

• Sebagai tambahan, 1 dan 2 menekan produksi IL-4 dan secara

signifikan menghambat pelepasan LTB4 pada sel RBL-2H3
yang diaktifkan dibandingkan dengan kontrol yang tidak
diobati.

• Hasilnya menunjukkan bahwa 1 dan 2 menjanjikan senyawa

anti-alergi baru yang menjanjikan.
• Ekstrak etanol 95% H. lachne menunjukkan aktivitas
penghambatan β-heksosaminasease yang menjanjikan dengan
nilai IC50 7,8 μg / mL. Fraksionasi terpandu bioaktif lebih
lanjut dari ekstrak ini menyebabkan isolasi senyawa 1-3.

• Dari ketiga metabolit tersebut, hipposponlachnins A (1) dan B

(2) memiliki kerangka tetradik karbon tetrasiklik (tetracyclo
tetradecane carbon skeleton) yang langka, mencontohkan
diterpene pertama yang diperoleh dari sumber laut, dan
menunjukkan aktivitas penghambatan pada pelepasan β-
heksosaminidase pada sel RBL-2H3 anti-murine DNP-IgE.

• Penelitian melaporkan solasi, penjelasan struktur dan

aktivitas anti-alergi dari dua diterpenoid yang belum pernah
terjadi sebelumnya.
Struktur hipposponlachnins A dan
B memiliki kemiripan struktur
dengan Vulgarisin A....
Senyawa Tumbuhan Asal Aktivitas Referensi
Eunicellane Diterpenoids Genus Cladiella or Antiinflamasi Gonzales.,
(krempfielins, hirsutalins, Klyxum (soft coral) 2015
klymollins, klysimplexin,
klysimplexin sulfoxide,
simplexin, and
cladieunicellin)

Briarane Diterpenoids Ordo Gorgonacea dan Antimikroba, Gonzales.,

genus Briareum, sitotoksik, dan dalam 2015
Dichotella, Junceella, beberapa kasus efek
Verrucella. antiinflamasi

Cembrane Diterpenoids Karang dari genus Antibakteri, antitumor, Gonzales.,

Sinularia, Lobophytum, antiinflamasi dan efek 2015
Eunicea, dan antivirus
Sarcophyton.

Asperolide E , Fungus Aspergilus Antibakteri Xiao Dong Li

asperolide A wentii et al., 2015
 DAFTAR PUSTAKA
1. Harborne, 1987, Metode Fitokimia Edisi ke dua, ITB, Bandung.
2. Devappa RK, Makkar HPS, Becker K. Jatropha diterpenes: a review. J Am Oil Chem Soc
2011;88:301_22.
3. Dias DA, Urban S, Roessner UA. A historical overview of natural products in drug discovery.
Metabolites 2012;2:303_36.

4. Li-Li Hong, Hao-Bing Yu, Jie Wang, Wei-Hua Jiao, Bao-Hui Cheng, Fan Yang, Yong-Jun Zhou,
Bin-Bin Gu, Shao-Jiang Song and Hou-Wen Lin, Unusual Anti-Allergic Diterpenoids from the
Marine Sponge Hippospongia lachne, Article number: 43138, 2017, doi:10.1038/srep43138.

5. Miguel A. González, Spongiane Diterpenoids, Current Bioactive Compounds 2007, 3, 1-36.

6. Xiao Dong Li, Xin Li1, Xiao-Ming Li, Gang-Ming Xu, Peng Zhang, Ling-Hong Meng, Bin-Gui
Wang, Tetranorlabdane Diterpenoids from the Deep Sea Sediment-Derived Fungus Aspergillus
wentii SD-310, Planta Med 2016; 82: 877–881.