Anggota Kelompok 5 :

1. Himawan Gus Wantoro (152210101014)

2. Zidni Hafizha (152210101019)
3. Diva Rochayati (152210101078)
4. Ghea Audina Dhistira (162210101107)
5. Amrina Rosyada Fajriyanti (162210101026)
 TEKNIK DAN TAHAP PRINSIP DAN TEKNIK
PENGUJIAN DASAR NOUTHERN BLOT

2 4

1 3 5

DEFINISI PERBEDAAN KEUNTUNGAN

DENGAN DAN KERUGIAN
SOUTHERN BLOT
DEFINISI
• Blotting adalah suatu teknik memindahkan atau mentransfer DNA,
RNA, atau protein ke lembaran tipis atau matriks membrane sehingga
DNA, RNA, atau protein tersebut dapat dipisahkan. Teknik ini berupa
lanjutan dari pengggunaan elektroforesis gel.
 Perbedaan Sourthern Blot dan Northern Blot:
Sourthern Blot Northern Blot
Sampel DNA RNA
Membrane Nitroselulosa Nilon
Elektroforesis gel
Gel agarosa Gel agarosa formaldehid

Perawatan gel

Pemurnian, denaturasi, dan netralisasi -

Metode blotting
Transfer melalui kapiler Transfer melalui kapiler

Probe
DNA (radioaktif dan nonradioaktif) cDNA, cRNA (radioaktif dan nonradioaktif)

System deteksi

Autoradiografi, chemiluminescent, colorimetric Autoradiografi, chemiluminescent, colorimetric

Prinsip Northern Blot:
• Memisahkan RNA berdasarkan ukuran dan terdeteksi pada
membrane menggunakan probe hibridisasi dengan urutan basa
komplementer untuk semua, atau sebagian dari urutan mRNA target.
• Northen blot memiliki beberapa komponen yang terdiri dari,
membrane dan probe.
Tahapan dalam Teknik Northen Blot
 Transfer ke
Isolasi RNA Eletroforesis Gel membran dan
immobilisasi

Blocking dan hibridisasi Deteksi

Keuntungan Teknik Nothern Blot:
a. Merupakan metode yang banyak digunakan dan dianggap metode
yang baik
b. Nothern blot merupakan teknik yang mudah
c. Merupakan teknik yang serbaguna menggunakan berbagai probe
baik radioaktif maupun non radioaktif
Kerugian Teknik Northern Blot:
a. Sering menggunakan Radioaktivitas
b. Proses dalam northern blot biasanya memakan waktu lama dari
persiapan sample sampai deteksi
c. Sample RNA dapat terdegradasi oleh RNAse sehingga kualitas data
dapat terpengaruh