UNIVERSIDADE FEDERAL DO PARANÁ

SETOR DE CIÊNCIAS DA SAÚDE

DEPARTAMENTO DE ANÁLISES CLÍNICAS
DISCIPLINA DE PARASITOLOGIA CLÍNICA MAC 022 (MP022)

Coleta e preservação de
amostras fecais

Profª Drª Karina Bettega Felipe

 Exame de fezes
 parasitológico de fezes - trofozoítos e cistos de
protozoários; ovos e larvas de helmintos
 Cultura de fezes ou coprocultura – bactérias
 Coprológico funcional
 Coleta de amostra – Generalidades
 Identificação de parasitas e análises de amostras – coleta
bem feita;
 Material inadequadamente colhido, velho ou mal preservado,
tem pequeno valor para o diagnóstico;
 Deve ser levado em consideração:
• tipo de recipiente;
• volume (20 - 30 g);
• idade da amostra;
• fármacos e compostos químicos que
podem interferir nas análises;
 Coleta de amostra – Generalidades

 Pacientes devem receber instruções verbais e impressas do

procedimento de coleta;
 Informações indispensáveis na amostra:
• nome do paciente;
• número de identificação;
• nome do médico;
• data e horário da coleta.

Deve vir acompanhada da requisição –

procedimento a ser seguido
 Coleta de amostra – Generalidades

 Características do recipiente:
• limpo;
• seco;
• boca larga;
•Capacidade de ~ 250 mL;
• vedação hermética;
• livre de anti-sépticos, germicidas, gotas
de óleo e de urina
 Coleta de amostra – Generalidades
 Fezes devem ser colhidas diretamente no frasco, urinol,
jornal, papel limpo;
 Não usar fezes excretadas no solo ou privadas;
 Amostras secas na superfície ou borda devem ser
descartadas;
 Espécimes fecais nunca devem ser
incubados (37ºC) ou congelados antes do
exame (exceção oocistos de Cyclospora
cayetanensis);
 Coleta de amostra – Generalidades
 Fármacos e compostos químicos interferentes:
• antidiarréicos;
• antibióticos;
•Antiácidos;
•Derivados de bismuto e bário;
• vaselina;
• óleo mineral
 Recipientes com amostras de pacientes soropositivos
devem ser protegidos por invólucro de plástico e
identificados com etiqueta vermelha ou HIV +
 Coleta de amostra – Generalidades
 Preferencialmente são utilizadas fezes emitidas
espontaneamente;
 Fezes emitidas com o uso de laxantes:
• estabeler e confirmar o diagnóstico de amebíase, giardíase e
estrongiloidíase;
• Requer solicitação médica;
• Série de exames negativos;
• Recomenda-se o uso de laxantes salinos:
fosfato de sódio e sulfato de sódio tamponado
• Coletar todas as fezes emitidas - (APV).
 Coleta de amostra – Generalidades
 Tipos de amostras:
• Amostra única;
• Amostras Múltiplas:
- Em uma única passagem são revelados de 1/3 a ½ das
espécies presentes na amostra fecal;
- intermitência da passagem de certos
parasitos a partir do hospedeiro; dos estágios do
protozoários; limitações técnicas.
-Não existe conduta uniforme quanto
ao número de amostras colhidas
- O número de amostras para identificação de parasitas
depende da qualidade dos espécimes submetidos ao estudo,
da exatidão das análises e da gravidade da infecção
Estabilidade e Preservação de amostra

 Tempo de coleta influencia na

identificação de parasitos:
• líquidas – 30´ após evacuação
• pastosas – 1h após evacuação
• sólidas - até 24 h –
• Preservação temporária e
permanente
 Estabilidade e Preservação de amostra
 Preservação temporária:
• Refrigeração (3 -5ºC);
• Frascos hermeticamente fechados;
• Ovos, larvas e cistos viáveis por alguns dias;

• Alterações morfológicas – larvas S. stercoralis e

ancilostomídeos.
 Preservação permanente :
• Conservador líquido;
• Trofozoítos, cistos, larvas e ovos
inviáveis
• Diluições de 1:3, 1:5 ou 1:10
(fezes/conservante)
 Estabilidade e Preservação de amostra
 Solução de formaldeído
• solução a 5%: preservação de cistos de protozoários
• solução a 10%: preservação de oocistos de coccídios, esporos
de microsporidios, ovos e larvas de helmintos
• VANTAGENS:
-Excelente preservador de amostras fecais (cistos, oocistos e esporos de
protozoários; larvas e ovos de helmintos) para as técnicas de
concentração
- de fácil preparação e longo período de validade;
- permite a coloração de esfregaços permanentes pelo método de Ziehl-
Neelsen e diagnóstico com monoclonais
- fixados em 2-4 h (exceção de A. lumbricóides)
 Estabilidade e Preservação de amostra

• DESVANTAGENS:
- Não preserva trofozoítos dos protozoários;
- Não preserva adequadamente a morfologia dos organismos para as
colorações permanentes
 Fixador de Schaudinn
• usado para preservação de fezes frescas ou amostra de
superfície da mucosa intestinal
• VANTAGENS:
- Excelente preservação de trofozoítos e cistos de protozoários;
- Excelente coloração pela hematoxicilina –férrica ou tricrômico
 Estabilidade e Preservação de amostra
• DESVANTAGENS:
- Não é recomendado para técnicas de concentração;
- Contém cloreto de mercúrio II;
- fraca adesão na lâmina – espécies líquidas ou mucóides
 Fixador de Schaudinn modificado
• substituição do cloreto de mercúrio II por sulfato de cobre
 Fixador álcool polivinílico (APV)
• resina solúvel em água que é incorporada ao fixador de
Schaudinn
• VANTAGENS
- Excelente preservador de trofozoítos e cistos de protozoários
 Estabilidade e Preservação de amostra
- para coloração de esfregaços permanentes;
- excelente coloração com hematoxicilina- férrica, tricrômico;
-Boa adesão das amostras à lâmina;
- longo período de validade;
- organismos fixados em 1-2h
• DESVANTAGENS
-Contém cloreto de mercúrio II
- de difícil preparação
- não é indicado para métodos de concentração e não pode ser utilizada
para coloração por Ziehl-Neelsen
- Branco ou gelatinoso quando começa a desidratar ou é refrigerado
- Não pode ser utilizado em testes imunológicos
 Estabilidade e Preservação de amostra

 APV modificado
• VANTAGENS
-Permite a realização de técnicas de concentração e colorações
permanentes;
- não contém cloreto de mercúrio II (sulfato de cobre)
• DESVANTAGENS
-Quando usado sulfato de cobre, morfologia dos protozoários é
aumentada, entretanto, apresenta-se melhor se for utilizado sulfato de
zinco;
- visualização dos organismos é dificultada
 Estabilidade e Preservação de amostra
 Fixador Mertiolato-Iodo-Formaldeído (MIF)
• VANTAGENS:
-Preservação de quase todos os estágios dos protozoários, ovos e larvas
de helmintos;
- no exame direto a fresco os reagentes preservam e coram
simultaneamente os organismos;
- de fácil preparação;
- não contém cloreto de mercúrio II;
- longo prazo de validade;
- organismos fixados em 1-2h
- indicado para estudos epidemiológicos de campo
 Estabilidade e Preservação de amostra
• DESVANTAGENS:
-Morfologia dos organismos é alterada em esfregaços permanentemente
corados
 Fixador acetato de sódio – ácido acético – formaldeído (SAF)
• VANTAGENS:
- Preservação de quase todas as formas parasitárias: cistos, oocistos,
trofozoítos dos protozoários, ovos de helmintos, através de esfregaços
permanentes e preparações concentradas;
- de fácil preparação;
- não contém cloreto de mercúrio II;
- longo prazo de validade;
- organismos fixados em 1-2h.
 Estabilidade e Preservação de amostra
• DESVANTAGENS:
- Apresentam resultados regulares na coloração pelo tricrômico;
- requer o uso de albumina fixadora de Mayer ou soro de cavalo inativado
para a adesão da amostra na lâmina
 Fixador fenol-álcool-formaldeído (PAF)
• VANTAGENS:
-Preservação de trofozoítos e cistos de protozoários e ovos e larvas de
helmintos
- exame direto tionina - ou azur A
• DESVANTAGENS:
- Não promovem boa preservação das estruturas parasitárias a ponto de
permitir a obtenção de bons resultados em colorações permanentes.
 Conservação de amostra
 Pesquisa de oocistos Cryptosporidium parvum
• fezes frescas;
• fezes preservadas temporariamente em bicromato de
potássio – armazenada sob refrigeração - mantém
viabilidade e infectividade por 3-12 meses
• fezes preservadas permanentemente
em formaldeído a 10% e SAF- período
de 18-24h para tornar oocisto inviável
• APV – não é recomendado –
imcompatível com técnicas de
concentração e coloração
 Conservação de amostra
 Pesquisa de oocistos Cyclospora cayetanensis
• fezes frescas;
• parte das fezes frescas deve ser congelada;
• fezes preservadas permanentemente em formaldeído 10%.
 Kits

Sem conservante + MIF

Formaldeído, SAF, greenfix

 Coleta e conservação de amostra –
coprológico funcional
1- Preparo do paciente:
Seguir dieta baseada na prova de Schmidt- Strasburger
 Coleta e conservação de amostra –
coprológico funcional
2- Coleta de amostra:
 No quarto dia de dieta, coletar todo material da primeira
evacuação em frasco limpo, seco e livre de contaminações
3- Cuidados e conservação:
Se refrigerado (2-8ºC), entregar até 2h após a coleta
4- Interferentes:
Fezes envelhecidas, mal conservadas
ou cujos resíduos não correspondem
ao do regime prescrito.
 Coleta e conservação de amostra –
coprológico funcional
 Contaminação com urina ou água;
 bebidas alcoólicas ou gasosas;
 Medicamentos orais (antiespasmódicos, antiácidos,
enzimas);
 Regime diferente do considerado;
 Ingestão de alimentos não especificados
5- Pré-requisitos:
 parasitológico, pesquisa de sangue
oculto e coprológico para bactérias
enteropatogênicas negativos
 Coleta e conservação de amostra – pesquisa de
sangue oculto
 Recomendações:
1-Colher uma amostra de fezes, preferencialmente a
primeira do dia;
2- Evitar a contaminação do material com água ou urina;
3- Colocar as fezes no frasco coletor sem conservante.
4- Vedar bem o frasco e conservar refrigerado até a entrega
ao laboratório.
 Coleta e conservação de amostra – pesquisa de
sangue oculto
• Não coletar fezes em período menstrual e na presença de
sangramentos causados por constipação intestinal e
hemorróidas ou sangramentos gengival e urinário. Neste
caso, o paciente deve aguardar no mínimo 48 horas após o
sangramento ter cessado.
• Não fazer uso de laxantes ou
supositórios
• Fezes devem ser enviadas de
preferência até 2 horas após a coleta.
 Coleta e conservação de amostra – pesquisa de
sangue oculto
• Sempre que houver muco, pus ou sangue, colher esta
porção para enviar ao laboratório.
• É recomendado não ingerir bebida alcoólica nos 3 dias que
antecedem ao teste.
• Medicamentos que podem causar sangramento
gastrointestinal e devem ter o seu uso suspenso 3 dias antes
da coleta ou conforme orientação
médica: AAS, AINES (ex.:diclofenaco),
anticoagulantes, colchicina, reserpina,
vitamina C, iodo, sulfato ferroso e contraste radiológico.
 Coleta e conservação de amostra –
parasitológico
 Amostras múltiplas;
 Deve-se coletar preferencialmente todo o bolo fecal – 20-
30 g já é suficiente
 Regiões pastosas ou mucosas devem ser encaminhadas
para preparação de esfregaços corados
 Regiões formadas são empregadas em técnicas de
concentração
 Referências
DE CARLI, G. A. Parasitologia Clínica: Seleção de Métodos e
Técnicas de Laboratório para o Diagnóstico das Parasitoses
Humanas. São Paulo: Atheneu, 2001.