Universidad Pedro Nacional

Pedro Ruiz gallo

Facultad Ciencias Biológicas
Docente:

Carrasco Solano Fransk

Alumno:
• Benites Monteza Jonnathan Carlos
Aislamiento y selección de
microorganismos de interés
industrial
Introduccion

 Los microorganismos presentan una gran variedad metabólica por lo que en

distintos aislados microbianos podemos encontrarnos una amplia variedad de
compuestos. Una de las tareas de la Microbiología Industrial es desarrollar
procedimientos que permitan el aislamiento y selección de microorganismos
de interés industrial. A fin de tener éxito, los métodos de deben constituir
una actividad interdisciplinaria que combine actividades de microbiología,
química, bioquímica, ingeniería y bibliografía. El éxito de un programa de
selección depende de la fuente utilizada para la obtención de los
microorganismos y del método elegido para detectar la actividad deseada.
Finalidad y Criterio de Selección

 Cepa debe ser genéticamente estable.

 La velocidad de crecimiento debe ser alta.
 La cepa debe estar libre de contaminantes, incluyendo fagos.
 Debe poder conservarse por largos períodos de tiempo, sin perder sus
características particulares.
 Los requisitos nutricionales deben ser satisfechos con medios de cultivos
baratos.
 El microorganismo debe realizar el proceso de fermentación en poco tiempo.
 Debe tener alto rendimiento del producto esperado.
 Si el producto se libera al medio debe ser fácil de extraer.
¿Qué es Aislamiento?

 Lo primero que tenemos que dejar patente es que aislamiento es un término

que tiene su origen en el latín. En concreto, podemos afirmar que es fruto de
la suma de tres componentes claramente delimitados:
• El prefijo “ad-“, que puede traducirse como “hacia”.
• El sustantivo “insula”, que es sinónimo de “isla”.
• El sufijo “-miento”, que es equivalente a “acción y efecto”.
Aislamiento es la acción y efecto de aislar.
Fuentes de Selección

 Pueden obtenerse de:

 A. Fermentaciones naturales: vino, pan, queso, materiales en
descomposición.
 B. Animales y plantas enfermos: vacunas.
 C. Suelo:
 -es el mayor almacén, pero también el más difícil de manejar ya que se
puede encontrar todo tipo de microorganismo y en una concentración de 100
millones por gramo de suelo (gran variedad y cantidad).
Fuentes de Selección

 D. Colecciones internacionales de cultivos tipo

 E. Para obtener nuevos productos metabólicos se aíslan cepas de
ambientes extremos como:
 -grandes altitudes
 -hábitats fríos
 -aguas marinas
 -profundidades en los océanos
 -desiertos
 -géiseres
 -campos de petróleo
Colección de Microorganismos

 Las industrias poseen su propia colección de organismos. La mayoría ha sido

mejorada a través de mutaciones o ingeniería genética. Estos organismos
tienen patentes y pueden ser utilizados en:
 ›reacciones específicas de biosíntesis
 ›reacciones de degradación
Selección de Microorganismos

 Primero se realiza una búsqueda (“Screening”). Como es la primera se le

llama búsqueda primaria. En esta búsqueda se detectan y aíslan
microorganismos potencialmente útiles para la industrial de entre una
población compleja de organismos utilizando procedimientos selectivos.
Selección de Microorganismos

 Búsqueda secundaria
 ›En esta etapa se estudian los microorganismos aislados en la búsqueda
primaria para separar los que tienen interés potencial de los que tienen
interés real.
 ›Además, en esta etapa se mejoran las cepas seleccionadas.
Búsqueda Primeria

 Generalmente se parte de una población mixta (suelo, fermentaciones

naturales) donde existe tanto una gran cantidad como variedad de
microorganismos potencialmente útiles que debemos seleccionar.
 ›En esta primera búsqueda se utiliza un medio selectivos donde crezca el tipo
de microorganismo que nos interesa aislar.
Búsqueda Primeria

 A este medio selectivo se le añaden inhibidores para eliminar los que no nos
interesan.
Ejemplos:
 -medios reductores para condiciones anaeróbicas,
 -medios con antibióticos para inhibir el crecimiento de un grupo particular
(cloramfenicolpara hongos)
 -Hay que tener en cuenta la fuente de carbono, la cantidad de nitrógeno, la
aireación, la temperatura, el pH e inhibidores.
Búsqueda Primeria

 Por último se obtiene un cultivo puro de aquellos microorganismos que hemos

aislado para su posterior estudio.
Selección de Microorganismos
Productores de Antibióticos
 Los microorganismos productores de antibióticos incluyen los géneros
bacteriales:
 ›Bacillus
 ›Pseudomonas
 ›Actinomicetos
Selección de Microorganismos
Productores de Antibióticos
 Del grupo de los hongos también se puede obtener antibióticos. Un género
muy importante dentro de éstos es Penicillum.
Parámetros para Seleccionar Microorganismos
Productores de Antibioticos

 Temperatura:
 ›Hongos 20-22°C; Actinomicetos 28°C
 pH:
 ›Hongos pH ácido; Bacterias pH neutro
 Oxígeno:
 ›Todos los productores son aerobios (necesitan O2)
 Carbono:
 ›Los actinomicetos usan glicerol, quitina o almidón.
 Nitrógeno:
 ›Los actinomicetos usan caseína, arginina(amino ácido) o asparagina(amino ácido).
Selección de Microorganismos Productores de
Vitaminas y otros Factores de Crecimiento

 La búsqueda se realiza de forma similar al de la producción de antibióticos,

aunque en este caso al medio de cultivo le falta el factor de crecimiento
buscado, de tal manera que el microorganismo a prueba sólo crecerá
alrededor de las colonias que produzcan este factor de crecimiento formando
un halo de crecimiento.
Aminoácidos y Proteínas

 A escala industrial se utilizan como microorganismos productores de amino

ácidos a las bacterias.
 Como microorganismos productores de vitaminas se utilizan levaduras y
hongos filamentosos (eucariotas).
Enzimas

 Para la búsqueda de estos microorganismos se debe utilizar en el medio el

sustrato de la enzima que queremos, por ejemplo si buscamos:
 ›Amilasas ----> debemos añadir almidón
 ›Celulasas ----> debemos añadir celulosa
Éxito para Aislar Microorganismos

 Si el organismo a usarse es aislado de fuentes naturales como agua, suelo,

plantas y desechos el éxito depende de:
 ›Aislamiento directo
 ›Enriquecimiento del cultivo
Aislamiento Directo

 El microorganismo se cultiva en presencia de un antibiótico u otro

microorganismo contra el cual se requiere la acción microbiana.
 Luego se observarán halos de inhibición, lo que indica que el microorganismo
inhibió al otro.
Aislamiento de Microorganismos

 El aislamiento de cepas se lleva a cabo siguiendo el siguiente esquema a

partir de una muestra de suelo:
 ›La muestra de suelo se resuspendeen agua estéril.
 ›El sobrenadante se diluye.
 ›Muestras de estas series de diluciones se siembran sobre varios medios de
cultivo (dependiendo del tipo de microorganismos que queramos aislar) y
luego se incuban.
 ›Se aíslan colonias separadas de distinta morfología y se purifican por
resiembra.
 ›Los cultivos puros se mantienen en tubos de ensayo como cultivos en medio
sólido listos para realizar las pruebas de selección.
Enriquecimiento de Cultivo

 Favorece el crecimiento de un tipo de microorganismo utilizando condiciones

óptimas, evitando así el crecimiento de microorganismos no deseados.
 Aquí el organismo dominante es el deseado, facilitando así su posterior
aislamiento.
Colecciones Depositarias de Cultivo

 Las siguientes son lugares donde encontramos cultivos de microorganismos,

en estos lugares podemos comprar los microorganismos deseados.
 ›“American Type Culture” (bacterias, levaduras, algas, actinomicetos,
mohos, protozoos, virus y líneas celulares (U.S.A)
 ›“Collection Nationales de cultures de Microoganismes” (Francia)
 ›“Northern Regional Research Laboratory” (U.S.A.)
 ›“National Collection Type Culture” (Londres)
Referencias

 Waites, M.J.; Morgan, N.L.; Rockey, J.S. & Higton G. (2001). Industrial
Microbiology, an Introduction. Blackwell Science. 288pp.
Preguntas

 1.¿que es aislamiento en microbiología industrial?

 2.¿cuales son las fuentes de selección principales?
 3.¿porque son importantes las colecciones de microorganismos?
 4.¿cuales son las etapas en la selección de microorganismos?
 5.¿que factores influyen en el éxito para un buen aislamiento?
 6.¿cuales son las colecciones internacionales mas importantes?