Farmakologi Molekuler dan Toksikologi Molekuler

KANAL ION SEBAGAI TARGET AKSI OBAT KELOMPOK 1

Suhaera (15/387458/PFA/01547)
Andi Tenri N L O (16/402536/PFA/01600)
Anjar Hermadi S (16/402538/PFA/01602)
Arman Rusman (16/402540/PFA/01604)
Chairany Siregar (16/402545/PFA/01609)
Devika Nurhasanah ( 16/402547/PFA/01611)
Dwi Larasati ( 16/402551/PFA/01610)
Dwiki Ramadhani K (16/402551/PFA/01615)
Dzulkharian Munandar (16/402552/PFA/01615)
MAGISTER FARMASI SAINS DAN TEKNOLOGI Fajar Aji Lumakso (16/402557/PFA/01621)
UNIVERSITAS GADJAH MADA
2017
PENDAHULUAN

Ghrelin adalah peptida dari 26-28 asam amino yang memiliki rantai n-oktanil yang
diesterifikasi ke serin pada posisi 3 dari rantai polipeptida, dengan homologi antar
spesies dalam urutan 8 yang pertama asam amino yang memediasi aktivitasnya.

Ghrelin adalah Ini bersifat ligan endogen hormon pertumbuhan secretagogue

receptor 1a (GHS-R1a) dan terutama diproduksi di perut . Kadar hormon ghrelin akan
menurun secara berkala setelah tubuh mulai menyerap nutrisi dari makanan.

Ayam ghrelin adalah awalnya diisolasi dari proventriculus, bagian kelenjar

dari perut unggas, yang mengindikasikan bahwa ini adalah yang utama lokasi produksi
ghrelin
PENDAHULUAN
Sejumlah penelitian menunjukkan bahwa hipotalamus-pituitaryadrenal (HPA)
memediasi aktivasi sumbu respon stres di mamalia dan burung.

HPA AXIS adalah bagian utama dari sistem Neuroendokrin (Saraf pada hormon)
yang mengontrol reaksi terhadap Stres dan pula memiliki fungsi penting dalam
mengatur berbagai proses tubuh seperti pencernaan, sistem kekebalan tubuh,
suasana hati, emosi, seksualitas,
Elemen-elemen kunci dari sumbu HPA adalah:
• Paraventrikular dari hipotalamus, yang berisi neuron neuroendokrin yang
mensintesis dan mengeluarkan vasopresin serta corticotropin-releasing
hormon (CRH).
• Secara khusus, CRH dan vasopresin merangsang sekresi
hormon adrenokortikotropik (ACTH). ACTH pada gilirannya bekerja pada
adrenal korteks yang menghasilkan hormon glukokortikoid (terutama
kortisol pada manusia) dengan stimulasi ACTH.
PENDAHULUAN

Telah ditunjukkan bahwa ghrelin dan growth hormon secretagogues

(GHS) memiliki peran penting dalam aktivasi Sumbu HPA pada
mamalia

pemberian akut ghrelin dan GHS meningkatkan kadar ACTH dan

glukokortikoid, tidak tergantung pada jenis kelamin, dengan
bertindak pada hipotalamus level melalui peningkatan pelepasan
CRH dan AVP.

Administrasi grelin intracerebroventricular (i.c.v.) ke amygdala,

hippocampus, hipotalamus atau raphe nucleus tikus.

Demikian pula, pada anak ayam, kami menunjukkan untuk pertama kalinya bahwa i.c.v. administrasi ghrelin juga
menginduksi perilaku seperti aksiogenik, yang mana juga diamati saat ghrelin disuntikkan ke intermediate medial
mesopallium (IMM) pada otak depan ayam

Meskipun, Efek ini diblokir oleh bicuculline (reseptor GABAAantagonis kompetitif), diazepam (agonis alosteron reseptor
GABAA) tidak menghalangi perilaku seperti aksiogenik, menunjukkan bahwa ghrelin memainkan peran penting dalam pola
respon stres akut melalui sistem GABAergic
 METODE Penyiapan
larutan uji
Day-old meat-
type
Jantan-betina, usia jam

Bebas 12 jam 30-32 0C;

patogen Dark cycle Saline; BIC
40%
0,036 mg/kg;
07.00 09.00 ghrelin 30
pmol;
BIC+ghrelin

Evaluasi efek ghrelin, ditangkap, ditaruh di kardus, dimasukkan

ke ruang terpisah kemudian dinjeksi salin atau berbagai dosis
BIC, ditahn 20 mnit dalam BB setelah mengalami OF selama 10
Tempat
menit
Injeksi dengan salin atau larutan garam 0,036 mg/kg BIC, 20 transit per
menit kemudian intra-IMM diinjeksikan dengan salin atau individu
ghrelin
4 kelompok salin ip+ saline intra IMM; BIC ip dan salin intra
Open-Field Test
60x60x30 cm
Alas 25
persegi
@12x12 cm

100 W

10 menit
Latency to ambulate; locomotor
activity, latency to defecate, number of
Dikorbankan, darah ditampung, defecations; attempts to escape
otak difiksasi dalam formaldehid
Vokalisasi direkam
4%
Uji Hormon Pengambilan
darah
Beberapa dari tiap perlakuan 09.00 a.m-
(saline, BIC, ghrelin, BIC+ 12.00 p.m
ghrelin) tidak diberi perlakuan
OF tes dan tetap dibiarkan di
BB, dikorbankan 10 menit
setelah injeksi Berisi EDTA

Penetapan
kadar ACTH dan
kortikosteron 40C

-20 0C 20 menit
Disimpan
1000xg
dalam
tube
kering
Uji statistik

Data dari tes OF, dianalisis dengan KW jika

(distribusi tidak normal) p<0,05, dilakukan post-
hoc dengan ted Dunn
Data ACTH dan kortikosteron dianalisis dengan
ANOVA satu arah atau 2-arah. Jika ada efek
signifikan, dilakukan post-hoc Newman Keuls,
Transformasi menjadi log basis 10 dapat
memperbaiki normalitas dan homoskedasitas
HASIL
HASIL

Efek dari i.p. Pemberian methiodida bicuculline pada perilaku kecemasan

Uji Kruskal-Wallis menunjukkan efek pengobatan yang signifikan terhadap latency ambulasi (H =
16,09, p = 0,0029), dengan uji Dunn'spost-hoc menunjukkan bahwa pada dosis 36 mg / kg bicuculline
menyebabkan peningkatan yang signifikan dalam latency ambulasi terhadap saline, 0,036 dan 0,36
mg / kg kelompok (p <0,05). Kruskal-Wallistest tidak menunjukkan adanya pengaruh pengobatan
yang signifikan terhadap jumlah ambulasi (H = 5.132, p = 0,2741), defekasilatensi (H = 4,080, p =
0,3953), jumlah defekasi (H = 3,714, p = 0,4461), mencoba untuk melarikan diri (H = 5,011, p =
0,2862). Namun, dapat diamati bahwa parameter perilaku ini bervariasi tergantung pada kontrol
salin (Tabel 1). Dosis terakhir dari bicuculline yang digunakan dalam penelitian yang diuraikan di
bawah ini menghasilkan tidak ada efek perilaku yang terjadi.
HASIL

Efek dari i.p. pemberian bicuculline pada perilaku kecemasan seperti yang
disebabkan oleh intra-IMM ghrelin

Uji Kruskal-Wallis menunjukkan efek yang signifikan dari treatment pada latency ambulasi (H = 28,91,
p <0,0001), jumlah ofambulations (H = 18,73, p = 0,0003), latensi buang air besar (H = 19,81, p =
0,0002), jumlah defekasi (H = 22,57, p <0,0001), usaha untuk melarikan diri (H = 8.132, p = 0,0434)
dan vokalisasi (H = 10,98, p = 0,0118). Uji post-hoc Dunn menunjukkan bahwa intra-IMMghrelin (30
pmol) menginduksi peningkatan signifikan pada latency ambulasi (p <0,05) dan defekasi (p <0,05)
terhadap kelompok saline, BIC dan BIC + Ghrelin. Namun, uji post-hoc menunjukkan bahwa ghrelin
intra-IMM menginduksi penurunan bermakna dalam jumlah ambulasi (p <0,05). Secara keseluruhan,
ini menunjukkan bahwa garis penyebab mampu menghalangi perilaku seperti aksioma yang
disebabkan oleh ghrelin.
HASIL
HASIL

• no significant effect of OF exposure on plasma ACTH

levels
(F2,24 = 1.85, p = 0.1797) (Fig. 2A)
• there’s a significant effect of OF exposure on plasma
corticosterone levels (F2,19 = 13.86; p = 0.0002)
• the Newman Keuls post-hoc test revealed a
significant increase
in the plasma corticosterone concentration in chicks
exposed
to OF compared to those not exposed to the
stressor (naive
and BB groups) (p < 0.05) (Fig. 2B)
• Conclusion : OF test acted as an acute stressor for
neonatal
chicks.
HASIL
Pengaruh open field test terhadap kadar ACTH dan kortikosteron plasma

Uji ANOVA satu arah menunjukkan tidak ada pengaruh yang signifikan terhadap kadar ACTH paparan
plasma (F2,24 = 1,85, p = 0,1797) (Gambar 2A). Namun, tes ini menunjukkan efek yang signifikan dari
paparan pada kadar kortikosteron plasma (F2,19 = 13,86; p = 0,0002). Selain itu, uji post-hoc
Newman Keuls menunjukkan peningkatan konsentrasi plasma kortikosteron yang signifikan pada
anak ayam yang terpapar pada OF dibandingkan yang tidak terpapar pada stressor (kelompok naif
dan BB) (p <0,05) (Gambar 2B). Hal ini menunjukkan bahwa penanganan dan prosedur injeksi
thestereotoksik terestrialik tidak menimbulkan faktor stres, namun uji ini merupakan stressor akut
pada anak ayam neonatal.
DISKUSI
DISKUSI

• Bicuculin adalah antagonis

GABAAR yang mengeblok aktivasi
HPA axis yang diinduksi oleh
ghrelin anxiogenik.
• Adanya stressor akut dapat
menyebabkan perubahan pola
perilaku yang diinduksi oleh intra-
IMM ghrelin  dari gambar
dibawah ditunjukkan adanya
penurunan tingkat vokalisasi
dengan adanya pemberian
Bicuculine
DISKUSI

• Karakteristik adanya stress adalah aktivasi axis HPA dan perubahan kons.
Kortikosteron dalam plasma

A. Kons. ACTH dalam plasma tidak B. Bayi ayam yang diuji Open field system
mengalami perubahan yang bermakna  mengalami peningkatan kortikosteron
setelah diuji dengan sistem OF dalam plasma
DISKUSI

• Kelompok yang diinduksi stres, corticosterone plasma mengalami

kenaikan yang signifikan dibandingkan dengan kelompok yang tidak
dalam kondisi stres, mengindikasikan terjadinya aktivasi HPA
(Gambar B). Namun, tingkat ACTH plasma tidak menunjukkan
perubahan yang signifikan antara kelompok (Gambar A),
kemungkin karena negative feedback pada hipotalamus dan
pituitary yang disebabkan oleh pelepasan yang lebih tinggi dari
corticosterone dari korteks adrenal.
• Beberapa studi telah menunjukkan bahwa negative feedback yang
cepat dapat terjadi dalam hitungan detik sampai menit (<30 menit)
dan melibatkan penghambatan pelepasan ACTH oleh
glucocortikoid, efek non-genomik tanpa pengaturan transkripsi
atau sintesis protein
DISKUSI

• Adanya peningkatan kons.

ACTH dann kons .
Kortikosteron dlm plasma
yang diinduksi oleh
ghrelin dengan Breding
box dan Open field

Aktivasi GABAARdalam limbic dan Peningkatan kons. ACTH dan kortikosteron

setelah pemejanan ghrelin intra-IMM
saraf neuron menyebabkan menunjukkan adanya penurunan efek
penghambatan saraf CRH dan axis penghambatan GABAergik pada hipotalamus 
CRH yang dimediasi oleh GABA adanya peningktan parameter setelah uji OF
DISKUSI

• Peningkatan yang signifikan pada ACTH plasma dan

corticosterone disebabkan oleh ghrelin (30 pmol) pada anak
ayam yang dibuat dalam kondisi stres dan tanpa stres, ghrelin
kemungkinan memediasi aktivasi HPA axis.
DISKUSI

• Ghrelin dan GABAAR memiliki interaksi yang kompleks, kemungkin

karena terlibatnya jalur serotonergik
• Pada penelitian sebelumnya, Interaksi antara ghrelin dan GABAAR
melibatkan jalur Serotonergik (5-HT)  peningkatan 5-HT berhubungan
penigktan stress
• Ghrelin dapat menyebabkan peningktan kons. Serotonergik dan jumlah
ekspresi reseptor serotonin  sehingga ghrelin ini secara langsung
beraksi pada GHS-R pada saraf 5-HT untuk menstimulasi sintesis dan
sekresi 5-HT  stress meningkat (A)
• Namun, pada penelitian kali ini menunjukkan dengan adanya aktivasi
GABAAR menyebabkan meningkatnya kons. Cl- intraselullar dan
depolarisasi membran brain yang dapat menyebabkan stres akut (B)
DISKUSI
KESIMPULAN

• Hasil ini menunjukkan bahwa acyl-ghrelin dapat mengatur aktivasi HPA, yang
juga terkait dengan respon anxiogenik pada anak ayam inneonatal yang terpapar
pada stressor akut.
• Sebagai tambahan, bicu-culline, reseptor antagonis GABAA, menghalangi aktivasi
sumbu HPA yang disebabkan oleh ghrelin, di bawah tekanan akut. Dengan
demikian, neurotransmisi ghrelin dan GABA-A-ergic memiliki interaksi fungsional
yang kompleks untuk mengatur respon aksiogenogenik.
• Lebih jauh lagi, temuan kami menunjukkan bahwa mesopinoium burung dengan
neuron yang mengekspresikan GHS-R mungkin merupakan pusat pemrosesan
dan integrasi informasi, mengkonstruksikan sirkuit neuroendokrin dengan
struktur bawah, seperti thehypothalamus dan / atau kelenjar pituitari.
THANKYOU