MICROBIOLOGÍA GENERAL

Microbiología Generalidades

MSc. Carlos Tito Vargas

ctitov@unjbg.edu.pe
 MICROBIOLOGÍA
Concepto: Es la biología de los organismos que no
pueden observarse sin la ayuda de dispositivos oculares.
• Estudia los organismos microscópicos:
 Virus (0,01 - 0,2 µm).
 Bacterias (0,1 – 15 μm).
 Hongos (2 – 20 cm).
 Algas (1 μm – 1 m).
 Protozoos (2 – 200 μm).
POSICIÓN TAXONÓMICA DE LOS MICROORGANISMOS
• Los biólogos usan el Sistema de Clasificación de 5 reinos,
Propuesto por Robert H. Whittaker (1969):
 Existen diferencias evolutivas a lo largo de tres
modos principales de nutrición.
 POSICIÓN TAXONÓMICA DE LOS
MICROORGANISMOS

• Los cinco reinos son: (Whittaker, R.):

 Plantas
 Animales Eucariontes pluricelulares
 Hongos

 Protistas (eucariontes unicelulares)

 Monera (procariontes)

• Organismos estrechamente relacionados tienen

composición genética similar,

 Basando su clasificación en análisis genético

molecular.
POSICIÓN TAXONÓMICA DE LOS
MICROORGANISMOS
 POSICIÓN TAXONÓMICA DE LOS
MICROORGANISMOS

• Carlos Woese (1980)

propuso un sistema
de clasificación de
tres Reinos:

 Archaea

 Eubacteria

 Eucaryotes
 POSICIÓN TAXONÓMICA DE LOS
MICROORGANISMOS

• Las arqueobacterias y las eubacterias están

genealógicamente tan distantes entre sí como lo
están de las eucariotas.
• Según Woese las arqueobacterias, eubacterias y
un eucarionte,
 Evolucionaron de un antecesor común, el
PROGENOTE.
 POSICIÓN TAXONÓMICA DE LOS
MICROORGANISMOS

• A las arqueobacterias también se les llama

bacterias extremófilas:
Metanógenos
Archaeobacteria Halófilos Obligados
Termoacidófilos

Bacterias verdes fotosintéticas

Bacterias fotosintéticas púrpuras
Eubacterias Espiroquetas
Bacterias Gram positivas
Bacterias Gram positivas
Cianobacterias
 EL MUNDO MICROBIANO

• Con el M. E. se observó que las bacterias, por su

estructura celular, difieren de los otros tres grupos.

• Los otros grupos (algas, protozoos, hongos)

comparten con las células de plantas y animales
la estructura eucariota.
BASES HISTÓRICAS DE LA MICROBIOLOGÍA

• La Microbiología como ciencia no existió antes de

la última parte del siglo XIX.
• Los egipcios producían cervezas y vinos antes de c
• Se usó sal para preservar alimentos antes de
conocer el papel de los M'os en la descomposición
de éstos.
• Francis Bacon, a principio del siglo XVII, propuso
la teoría de que:
 El enfriamiento retardaba la descomposición de
los pollos.
• onocer el papel de los M'os en la fermentación.
 BASES HISTÓRICAS DE LA MICROBIOLOGÍA

• A mediados del siglo XIV, en Europa medieval murieron

por la “peste negra” 25 millones de personas.
• Se utilizó, como método para afrontarla, las
cuarentenas (para individuos sospechosos de portar
la enfermedad),
 La “peste” hoy se combate con antibióticos.

• Girolamo Fracastoro de Verona, publicó su trabajo

“De Contagione” sobre enfermedades contagiosas y su
tratamiento:
 Expuso la hipótesis de que algunas enfermedades
eran causadas por el paso de gérmenes de una
cosa a otra.
BASES HISTÓRICAS DE LA MICROBIOLOGÍA

• Girolamo Fracastoro describió tres procesos para

la transmisión del contagio:
 Contacto directo.
 Transmisión vía fomites .
 Transmisión a distancia.
• Reconoció la similitud entre contagio (proceso de
enfermedad) y putrefacción, un siglo antes del
descubrimiento de Pasteur y de Koch.
• Reconoció que los gérmenes que causan
enfermedad exhiben especificidad.
 EL MICROSCOPIO
• Fue probablemente inventado por:
 Hans Janssen, constructor de lentes holandés.

 Galileo, astrónomo italiano.

• Robert Hooke publicó micrografías y descripciones

fisiológicas de cuerpos diminutos realizadas con
vidrios de aumento.
• Anthony Van Leeuwenhoek construyó un microscopio
y realizó las primeras observaciones de bacterias,
levaduras y protozoos.
• Se realizaron avances importantes en microscopía a
finales del siglo XIX, periodo de gran progreso en la
Microbiología.
 EL MICROSCOPIO

• Ernst Abbe (1880):

Fabricó lentes para microscopio con corrección
para aberraciones esféricas y cromáticas.
 Inventó los lentes de inmersión en aceite.
• Paul Ehrlich (1881) introdujo la coloración vital
de bacterias con azul de metileno.
• Hans Christian Gram (1884) introdujo el método
de coloración diferencial
PASTEUR Y LA MICROBIOLOGÍA DE ALIMENTOS
E INDUSTRIAL

• En el siglo XVIII y comienzos del XIX se pone en

duda la teoría de la generación espontánea.
• Para poder desaprobarla se requería un
conocimiento verdadero de la microbiología.
• Lázaro Spallanzani (s. XVIII)
 Demostró que la putrefacción era causada por
M’os: No surgen por generación espontánea.
 Demostró que el calentamiento destruía a los
microorganismos.
PASTEUR Y LA MICROBIOLOGÍA DE ALIMENTOS E
INDUSTRIAL

• Químicos como Justus Von Liebig, Jons Jacob

Benzelius sostuvieron que:
 Cambios en materiales químicos orgánicos
Ocurren sin la intervención de organismos vivos:
 Putrefacción,
 Transformación de azúcares en alcohol:
• En 1830 Charles Cagniaro de Latour (Francia),
Theodor Schwann y Friedrich Kutzing (Alemania)
demostraron que:
 Los productos de fermentación, etanol y CO2,
eran producidos por formas microscópicas de
vida.
PASTEUR Y LA MICROBIOLOGÍA DE ALIMENTOS E
INDUSTRIAL

• Pasteur (1822 – 1895)

 Acabó con la teoría de generación espontánea.
 En 1857 demostró que el agriado de la leche era
causado por microorganismos.
• Estudió el avinagramiento del alcohol producido a
partir de la remolacha.
 Observó, en cubas productivas, células de
levaduras en gemación (producción de alcohol).
 Observó, en cubas no productivas, organismos en
forma de bastón (producción de ácido láctico).
• Demostró que diferentes M’os son responsables de
variaciones en la fermentación.
• En 1860 demostró que el calentamiento se podía usar
para matar a los M’os del vino y la cerveza.
 PASTEUR Y LA MICROBIOLOGÍA DE ALIMENTOS
E INDUSTRIAL

• Nicolás Appert:
 Propuso el proceso de enlatado como método de
preservación.
 Patentó el proceso de enlatado.
• John Tyndall:
Físico inglés, creó la tindalización.
 Confirmó los experimentos de Pasteur.
 Los resultados variables eran debidos a que las
bacterias existían en 2 formas:
 Una termolábil y una termorresistente.
• Charles Chamberland:
 Diseñó la primera autoclave de laboratorio.
 KOCH Y EL COMIENZO DE LA MICROBIOLOGÍA
MÉDICA

• Sus estudios produjeron un gran avance en la

microbiología médica.

• Demostró por primera vez que los gérmenes fuera

del cuerpo causaban enfermedad.

 M’os específicos causaban enfermedades

específicas.

• Descubrió la causa (etiología) de la tuberculosis.

 KOCH Y EL COMIENZO DE LA MICROBIOLOGÍA
MÉDICA

• Estableció los 4 principios básicos de relación causa

efecto entre un M’o dado y una enfermedad específica:
1) El organismo debe estar presente en todos los
animales que sufran la enfermedad y ausente en los
animales sanos.
2) El organismo debe ser desarrollado en cultivo puro
fuera del huésped.
3) Cuando este cultivo se inocule en un huésped
susceptible sano, el animal debe desarrollar los
síntomas de la enfermedad.
4) El organismo debe volverse a aislar del animal
infectado y demostrar que es idéntico al aislado
originalmente.
 KOCH Y EL COMIENZO DE LA MICROBIOLOGÍA
MÉDICA

• Entre 1881 – 1883:

 Establece métodos para el aislamiento y
mantenimiento de cultivos puros de M’o en medios
sólidos definidos químicamente.
• Como agente gelificante utilizó gelatina y posteriormente
agar.

• En 1887 Richard J. Petri describió un nuevo tipo de

placa de cultivo para medios semisólidos.
• Desde 1873 a 1886 condujo experimentos para
demostrar que:
 Esporas de B. anthracis aisladas de cultivos puros
podían infectar animales.
 QUIMIOTERAPIA

• Pasteur demostró que existen M’os en el aire.

• En 1840 Ignaz Semmelweis, médico húngaro

demostró que los médicos,
 Que no se lavaban las manos eran responsables
de la transmisión de la “fiebre del parto”.
• En 1850 se descubrió la anestesia: Hizo la
cirugía más fácil,
Pero no redujo la morbilidad posquirúrgica que
llegaba al 90%.
 QUIMIOTERAPIA
• En 1867 Joseph Lister introdujo los principios
antisépticos:
 Utilizó ácido fénico o fenol como antiséptico durante
la cirugía.

• Paul Ehrlich entre 1880 – 1890 establece la base inicial

de la quimioterapia moderna.
 Estableció la fórmula correcta del “atoxilo” (arseniato
de sodio):
“Contra la enfermedad del sueño”
 Utilizó el compuesto 606, el Salvarsan (arsfenamina)
para el tratamiento de la sífilis.
 QUIMIOTERAPIA
• Sahachiro Hata:
 Creó el compuesto 914, el Neosalvarsan
(Neoarsfenamina):
 Para el tratamiento de la sífilis y la fiebre
recurrente (Borrelia spp.).
• Alexander Fleming, bacteriólogo escocés (1929).
 Descubrió que P. notatum mataba a S. aureus.
Llamó al ingrediente activo Penicilina
• Selman Waksman, microbiólogo:
 Descubrió que los actinomicetos producían
agentes antibacterianos:
 Streptomyces griseus estreptomicina
 S. aureofaciens tetraciclina
 S. venezuelae cloromicetina
 INMUNOLOGÍA
• Edward Jenner (1798):
 Confirmó que la inoculación de costras de
vaccinia protegía al hombre de la viruela.
• Pasteur acuñó la palabra vacuna (Jenner).
 Reportó que M’os atenuados podían ser
empleados como vacunas:
 “cólera aviario”: El responsable fue Charles
Chamberland.
 Demostró la efectividad de su vacuna contra el
ántrax.
 INMUNOLOGÍA
• Pasteur (1885), encontró la vacuna para la “rabia”:
 Atenuó el virus en médula espinal de conejos
infectados.
 Joseph Meister: Se le inyectó 13 fragmentos de
médula espinal, por 2 semanas.
• Robert Koch (1880):
 Descubrió el bacilo de la tuberculosis.
 Desarrolló las técnicas de cultivo puro en medio
sólido
MICROORGANISMOS BENÉFICOS

Bacillus thuringiensis

Bacilo Gram positivo

Durante la esporulación
produce cristales proteínicos

Se utiliza para el control de

plagas en la agricultura.
 Bacillus thuringiensis

El cristal proteínico está constituido

por proteínas denominadas
endotoxinas.
 Bacillus thuringiensis

B. thuringiensis (Bt) es el
insecticida biológico más utilizado:
Actúa contra lepidópteros
No tiene efectos perjudiciales
(mariposas), coleópteros
sobre el hombre y otras
(escarabajos), dípteros (mosquitos),
especies.
himenópteros (hormigas), ácaros.
 Bacillus thuringiensis
Cuando el cristal es
ingerido por un insecto MECANISMO DE ACCIÓN
susceptible, en fase
larvaria, llega a su
intestino medio:

Aquí la endotoxina
sufre una proteólisis
enzimática y da origen
a la toxina activa,

Lo que provoca
su muerte por una
deshidratación
severa.
Bacillus thuringiensis
 Pseudomonas denitrificans

Es capaz de
Anaerobia producir
facultativa Vitamina B 12
Bacteria
Gram
negativa

P. denitrificans se
P. denitrificans produce
usa para producción
esta vitamina en
industrial de vitamina
condiciones aeróbicas
B12
Clostridium acetobutylicum

Capacidad de
producir acetona,
Su hábitat es el etanol y butanol
suelo
Bacilo Gram
positivo
 Clostridium acetobutylicum
La conversión de acetona a
isopropanol por ingeniería metabólica.

Desde isopropanol puede ser utilizado

como un aditivo de combustible,
limpieza de lentes

La mezcla de isopropanol, butanol, y

etanol (IBE), producida por
ingeniería, puede utilizar directamente
como biocombustible
 Streptomyces

Es el género más extenso de Actinobacterias

La mayoría produce conidios.

Habitan en la tierra

Se distinguen por el olor a “tierra húmeda” que

desprenden.
 Streptomyces productores de antibióticos

Antibiótico Organismo productor Organismo blanco Sitio o modo de

acción

Anfotericina B Streptomyces nodosus

Hongos Membrana celular
Eritromicina Streptomyces erythreus Bacterias Gram
positivas Síntesis proteica
Neomicina Streptomyces fradiae Bacterias Gram
positivas y negativas Síntesis proteica
Estreptomicina Streptomyces griseus Bacterias Gram
negativas Síntesis proteica
Tetraciclina Streptomyces rimosus Bacterias Gram
positivas y negativas Síntesis proteica
Vancomicina Streptomyces orientalis Bacterias Gram
positivas Síntesis proteica

Rifampicina S. mediterranei M. tuberculosis Síntesis proteica

 OTROS ORGANISMOS PRODUCTORES DE
ANTIBIÓTICOS

Antibiótico Organismo Organismo Sitio o modo

productor blanco de acción

Penicilina Penicillium Bacterias Gram

chrysogenum positivas Síntesis de la
pared celular
Cefalosporina Cephalosporium Bacterias Gram
acremonium positivas y Síntesis de la
negativas pared celular
Bacitracina Bacillus subtilis Bacterias Gram
positivas Síntesis de la
pared celular
Polimixina B Bacillus polymyxa Bacterias Gram
positivas Membrana celular
 Streptomyces
El género Streptomyces produce el mayor número
de antibióticos, tanto bactericidas como fungicidas.

Estreptomicina Cloramfenicol Neomicina

 Escherichia coli

Gram
negativa

Se
manipula
por Ing. No forma
Genética esporas

Miden 0,5
µm ancho
y 3 µm de
largo
 Escherichia coli
• La diabetes es un gran problema a nivel
mundial, debido a la deficiencia de la insulina.

 Antes de los años 70 la producción de insulina se

obtuvo de animales: perros, cerdos, vacas, peces.
 Escherichia coli

En 1978 se obtiene la Es decir, por

secuencia de insulina Ingeniería La insulina se
humana. Este gen se Genética se purifica y se
introduce en el interior trasforma E. coli vende.
de E. coli y éste produce para que sintetize
la insulina. insulina.
PRODUCCIÓN DE INSULINA

Se trata de la inserción del gen

humano que controla la síntesis
de insulina y, se introduce en el
genoma de E. coli.

Una vez insertado el gen la

bacteria comenzara a producir la
insulina esto se debe a la rápida
multiplicación (cada 20 minutos).

La insulina es una hormona

constituida por 51 aas, formado
por 2 cadenas una de 30 y otra
de 21 unidas por un puente
disulfuro.
 Escherichia coli
Para la producción de
E. coli, es de gran ayuda
insulina, se logra mayor
en las investigaciones por
cantidad que la obtenida de
su fácil manipulación
otros animales.

Importancia

Igualmente ocurre con la

La insulina obtenida en E.
hormona de crecimiento
coli se utiliza en el
(Somatotropina) que se
tratamiento de la diabetes
administra a pacientes que
mellitus
padecen enanismo.
 Lactobacillus casei

Considerada benéfica
Se utiliza comúnmente
L. casei es una para el proceso
en la fabricación de
especie bacteriana. digestivo por un
productos lácteos.
número de razones.

Por ejemplo, en
Se encuentra en la Tiene un amplio rango quesos como el
boca y en el intestino de temperatura y de Cheddar y en la
de los seres humanos pH, fermentación
de aceitunas sicilianas.
 Lactobacillus casei

Propiedades Está asociada a la buena digestión del organismo,

Reducen la intolerancia a la lactosa.

Previenen y combaten las enfermedades

gastrointestinales

Contribuyen a una mejor digestión de los alimentos

Importancia Beneficios del L. casei: En la salud, cuando éstos

forman parte de yogur, genera un considerable
aumento de las enzimas α-galactosidasa así
como β-glucosidasa
Presenta forma elíptica u ovoide.
Alta capacidad fermentativa.
Formadora de esporas (ascosporas con 4
esporas)

Crecimiento en presencia de etanol.

Fermenta y asimila glucosa, galactosa,
maltosa, sacarosa y rafinosa.
No fermenta ni asimila lactosa.

IMPORTANCIA Las utilidades industriales más

importantes de esta levadura son la producción de
cerveza, pan y vino, gracias a su capacidad de
generar CO2 y etanol durante el proceso
de fermentación.
Es un moho saprófito, cosmopolita y,
patógenos de cítricos y de frutas
(mohos azules y verdes)

Produce ácidos orgánicos: el ácido

cítrico, el ácido fumárico, el ácido
oxálico, el ácido glucónico y el ácido
gálico.

Su temperatura óptima de crecimiento

es a 35-40°C.

Se desarrolla mejor y más rápido a pH

cercano a 4,0; tolera grandes
variaciones de pH (3,5-10,0).
 Penicillium roqueforti
Se emplea en los quesos con mohos en su interior:
Responsable del aroma del queso
Por su acción lipoíitica y proteolítica
Roquefort.

La función:
Provoca desadificacion de la pasta del
Por el uso del ácido láctico
queso

Para ser usados, los mohos requieren:

Ser capaz de crecer y no producir
No ser patógenos ni toxigénicos
sustancias que inhiban a otros.
Penicillium roqueforti

Importancia

Produce un antibiótico, usado

para combatir bacterias dañinas.
Está preparada con leche de
cabra:

La leche de cabra tiene

menos grasa saturada y
colesterol, y tiene un
contenido mayor de vitaminas
A y B, calcio, hierro y fósforo.
 Cuadro 01: Productos a base de
microorganismos
PRODUCTO ORGANISMO PRODUCCION
(Ton/año)
Solventes
Etanol Saccharomyces cerevisiae 20 millones
Acetona/butanol Clostridium acetobutylicum 2000

Biomasa
Starters para alimentos Levaduras y bacterias lácticas 500,000
Proteína unicelular Candida utilis 50,000

Ácidos orgánicos
Acido cítrico Aspergillus niger 250,000
Acido glucónico Aspergillus niger 50,000
Acido láctico Lactobacillus delbrueckii 50,000

Aminoácidos

Acido glutámico Corynebacterium glutamicum 300,000

Lisina Brevibacterium flavum 30,000
Fenilalanina Corynebacterium glutamicum 2000
Arginina Brevibacterium flavum 1000
 PRODUCTO ORGANISMO PRODUCCION
(Ton/año)
Enzimas
Proteasas Bacillus spp 600
Alfa-Amilasas Bacillus amyloliquefasciens 500
Glucosa-amilasa Aspergillus niger 500
Glucosa isomerasa Bacillus coagulans 500
Pectinasa Aspergillus niger 100
Renina Mucor o levaduras recombinantes 50
otras 50
Vitaminas
B12 Propionibacterium shermanii 10
Riboflavina Eremothecium ashbyii

Vacunas
Difteria Corynebacterium diphtheriae < 0.1
Tétano Clostridium tetani
Pertusis Bordetella pertussis
Polio Virus atenuado crecido en riñón de
mono o células diploides humanas
Rubéola Idem anterior
Hepatitis B Antígenos de superficie expresados
en levadura

Alcaloides del ergot Claviceps paspali 5

 PRODUCTO ORGANISMO PRODUCCION
(Ton/año)
Pigmentos
Shikoninas Lithospermum (plantas) < 0,1
Beta-carotenos Levaduras

Proteínas de uso terapéutico

Insulina E. coli recombinante
Hormona de crecimiento E. coli recombinante o celulas de
Eritropoyetina mamífero recombinante
Factor VIII-C celulas de mamífero recombinante < 0,1
Activador del plasminógeno celulas de mamífero recombinante
Interferón alfa 2 E. coli recombinante

Antibióticos
Penicilinas Penicillum chrysogenum 80,000
Cefalosporinas Cephalosporium acremonium 15,000
Tetraciclinas Streptomyces aureofaciens 15,000
Macrólidos (Eritromicina) Streptomyces erythreus 10,000
Polipeptidicos (Gramicidina) Bacillus brevis 2,000
Aminoglicosidos (Estreptomicina) Streptomyces griseus 1,000
Aromáticos (griseofulvina) Penicillum griseofulvum

Insecticidas
Esporas bacterianas Bacillus thuringiensis < 0,1
Anticuerpos monoclonales Células de hibridoma < 0,01
Cuadro 02: Bacterias utilizadas en alimentos
Staphylococcus aureus produce el “orzuelo”
Streptococcus pyogenes: Streptococcus mutans:
Faringitis, fascitis “caries dental”

Se le llama fascitis a una inflamación de la fascia, el tejido

fibroso que recubre los músculos y huesos.
Neisseria gonorrhoeae:
“gonococo” o “gonorrea”
Mycobacterium tuberculosis

Coloración de Ziehl Neelsen

Bacillus anthracis
 Clostridium botulinum:
“parálisis flácida”
Parálisis flácida en animales

Clostridium tetani: “Parálisis espástica”

 Treponema pallidum: “sífilis”

Treponema pallidum: Sífilis primaria

Treponema pallidum:
Sífilis secundaria

Sífilis terciaria
GRACIAS