Anda di halaman 1dari 21

PUNICA GRANATUM MENINGKATKAN

FUNGSI GINJAL PADA INDUKSI


GENTAMICIN NEFROPATI PADA TIKUS
MELALUI ATENUASI STRES OKSIDATIF
Pendahuluan
Gentamisin Aminoglikosida

Untuk mengobati infeksi bakteri gram


negatif
Nefrotoksisitas pada dosis tertentu

Punica granatum (delima)


diklaim mengobati berbagai
penyakit ginjal
Bahan dan Metode

Daun P. Granatum dikumpulkan pada bulan


Januari 2014 dari Nashik, Maharashtra,
India.
Dikonfirmasi oleh Dr. Ganesh Iyer, Dep.
Botani, Ruia College, Mumbai, Maharashtra.
Disimpan di Dept. Farmakologi, Ins.
Teknologi Kimia, Mumbai, Mahrashtra.
Ekstraksi

Diekstrak dengan
Daun Dikeringkan Diblender petroleum eter
dan metanol

Di rotavapor
Disimpan Di soxlet
(hasil; 50,70%)
Analisis spektroskopi kromatografi massa-
resolusi tinggi
(HR-LCMS)
■ Volume yang digunakan injeksi
5,00 ml.
■ Sampel dilakukan pada laju alir
0,200 ml/menit dan dijalankan
dalam mode ionisasi positif dan
negatif dari 50 m/z hingga 1000
m/z.
■ Total waktu operasi LC adalah 30
menit.
Hewan uji
Jantan

Telah
disetujui
150-200 g
Etichal
clearance

Disimpan
Kelembaban padaa suhu
50%
22°C ± 1°C
Protokol eksperimental
Kelompok I • Air p.o

Kelompok II • Gentamisin 80 mg/kg/hari

Kelompok III • Metformin 100 mg/kg p.o dan Gentamisin 80 mmg/kg/hari i.m

Kelompok IV • Ekstrak metanol daun delima 100 mg/kg po dan gentamisin 80


mg/kg/hari i.m

Kelompok V • Ekstrak metanol daun delima 200 mg/kg po dan gentamisin 80


mg/kg/hari i.m

Kelompok VI • Ekstrak metanol daun delima 400 mg/kg po dan gentamisin 80


mg/kg/hari i.m

Kelompok VII • Gentamisin 80 mg/kg/hari i.m


Tikus Urin Darah

Perlakuan 8 hari Timbang BB Sentrifugasi

Periksa reversibilitas
efek nefrotoksik
Penyimpanan sampel
Disimpan 7 hari pasca penghentian
serum
pemberian
gentaamisin
Homogenisasi ginjal

Dibagi rata
Sentrifugasi
menjadi 2
Hewan Ditimbang
bagian tulang
10.000g 15
menit
supernatan
dada

Ginjal Homogenat
Dianastesi Histopatologi
diangkat ginjal
Parameter Fungsi Parameter Pengukuran TNF-a Pemeriksaan
Ginjal Antioksidan Ginjal level histopatologi
•Serum •Reagen 5-5- •BD OptEIA TNF •Jaringan ginjal
•Kit Biokimia dithiobis ELISA kit •Pewarna
(ACCUREX, •Penurunan •Plat 96-well hematoxyllin dan
Biomedical Pvt. tingkat •Jaringan basah eosin dan asam
Ltd.) glutathione Schiff periodik
•Albumin, •mikroskop
kreatinin, dan
nitrogen
Hasil

Hasil dari analisis HR-LCMS menunjukkan adanya senyawa berikut seperti dulcitol,
loganin, bergenin, quercitrin, cosmosiin, asam folat dan khayanthone di MPGL
Berat Badan

Penurunan berat badan kelompok kontrol negatif tidak signifikan dibandingkan dengan
kelompok kontrol normal
Berat Ginjal dan Indeks hipertrofi

Berat ginjal dan indeks hipertrofi ginjal ditemukan meningkat secara signifikan pada
kelompok kontrol negatif dibandingkan dengan tikus kontrol normal.
Parameter Fungsi Ginjal

MPGL dengan dosis 400 mg / kg secara signifikan meningkatkan konsentrasi albumin


dalam serum dan menurunkan konsentrasi albumin dan BUN dalam urin dan serum
masing-masing
Parameter antioksidan ginjal

Pemberian gentamisin menyebabkan penurunan yang signifikan dalam tingkat GSH,


katalase dan SOD aktivitas tikus kontrol negatif dan satelit.
Tingkat TNF dalam homogenasi jaringan
ginjal
Tikus kontrol negatif menunjukkan peningkatan yang signifikan pada tingkat TNF ginjal
jika dibandingkan dengan tikus kontrol normal
Pemeriksaan histopatologi
Sampel H and E dan PAS bernoda dari tikus kontrol normal tidak menunjukkan
perubahan struktural pada jaringan ginjal.
Ginjal diwarnai dengan pewarna PAS menunjukkan intensitas pewarnaan PAS yang
parah pada glomeruli, peningkatan penebalan membran basalis dan peningkatan
ukuran glomerulus pada kelompok kontrol negatif. MPGL pada dosis 100 mg / kg
mengurangi PAS positif tetapi tidak dapat mengontrol peningkatan ukuran glomerulus
dan penebalan membran basal.
Kesimpulan

Efek perlindungan MPGL dikaitkan dengan


kemampuannya untuk memperbaiki parameter
fungsi ginjal; mencegah peningkatan peroksidasi
lipid dan penurunan aktivitas enzim anti-oksidan
yang diamati pada ginjal tikus dengan nefropati
yang diinduksi oleh gentamicin.

Mengidentifikasi MPGL sebagai agen


renoprotektif yang menjanjikan terhadap cedera
ginjal.