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 SistemasAutomatizados en Microbiología

que permiten determinar la Identificación


de bacterias y levaduras así como la
Susceptibilidad antimicrobiana .
 VITEX System

 MicroScan WalkAway

 Phoenix

 Sensitre ARIS

 Mini API
Método de Equipo Fabricante
detección
Colorimetría Vitek ® bioMerieux

MicrosCan ® Dade
Unisept® API
Turdibimetria Pasco ® DIFCO
Sceptor ® Becton Dickinson
Phoenix® Becton Dickinson

Fluorometria Vitek 2 ® bioMerieux


 El sistema VITEK es un sistema automatizado de
identificación bacteriana y estudio de sensibilidad
antimicrobiana.
 La identificación de las bacterias se basa en la
inoculación de una suspensión de microorganismos
en tarjetas con determinados paneles de reacciones
bioquímicas.
 La sensibilidad antimicrobiana se lleva a cabo en
forma similar a través de tarjetas que contienen
diluciones estandarizadas de distintos antibióticos
correspondientes a los puntos de corte de
sensibilidad establecidos
por NCCLS
 El sistema Vitek es un sistema automatizado, fabricado por bioMerieux,
Está basado en el principio básico de fotometría.
 Las bacterias utilizan un substrato que produce un cambio de color y
densidad óptica. Estos cambios son detectados por diodos emisores de luz y
detectores fototransistores.
 Este sistema está compuesto por un módulo de filtro-sello, una incubadora
con lector, un módulo de computadora, una terminal de datos y una
impresora. Este sistema es capaz de identificar bacterias gram positivas y
gram negativas, anaerobios y levaduras. También realiza pruebas de
susceptibilidad antimicrobiana.
 Es capaz de realizar “Tamizajes” de orina con enumeración e identifi -
cación.
 El sistema identificará Enterobacteriaceae en 4-6 horas y bacilos que no
fermentan en 6 a 18 horas.
 Presenta base de datos con información
que incluye : Lista de 470 especies
(Bacterias y levaduras) lista para controles
de calidad con cepas ATCC y lista amplia de
antibióticos.

 Utilizaun panel, que es una placa de 96


pocillos que contiene en forma deshidratada
de 20 a 32 pruebas bioquímicas para la
Identificación (ID) y 17 a 33 antibióticos
para MIC o BP
 Estos instrumentos están basados en un principio
de fotometría- fluorometría. Están disponibles tres
sistemas:
 TouchSCAN-SR: Lector de panel semiautomatizado con
sistema de manejo de datos. El lector leerá el panel
manualmente y el sistema proveerá automáticamente una
interpretación.
 AutoSCAN-4: Lector de panel automatizado con sistema
de manejo de datos. El usuario carga el panel y el sistema
leerá e interpretará el panel automáticamente
 AutoSCAN- WA: Sistema completamente automatizado
con automatización
 libre de supervisión y sistema de manejo de datos.
Tipos de paneles:
- Cromogénicos Convencionales:(Gram
positivos y Gram negativos.( ID 18 a
24hr).
-Principio colorimétrico: Desarrolla colores
en la serie bioquímica y turbidez en el
antibiograma.
- Cromogénicos rápidos: Permite la
identificación en 04 horas, mide la actividad
enzimática formadas en el aislamiento
primario: Haemophilus y Neisseria,
levaduras, anaerobios.
Rápidos: fluorométricas de 6 a 8 horas.
AutoScan-4
 Equipo semiautomatizado para identificación
bacteriana y susceptibilidad antimicrobiana

 Utiliza metodología colorimétrica


 Espectrofotómetro modificado con 6
longitudes de onda y sistema de fibras
ópticas para la lectura de los paneles en
apenas 5 segundos
 Equipo automatizado para identificación
bacteriana y susceptibilidad antimicrobiana
 Presenta dos metodologías: colorimétrica
y fluorométrica
 Contiene incubadora, pipeta de reactivos
, lectora fotométrica e impresora.
 Además lectora de código de barras que
identifican al panel en cualquier posición.
 Capacidadde procesar simultáneamente 40
paneles (Walkaway40) o 96 paneles
(Walkaway 96).

 Lospaneles conteniendo pocillos múltiples


son inoculados manualmente con un
dispositivo especial y luego colocados en la
incubadora, el sistema dispensa reactivos y
realiza lecturas periódicas

 Los
equipos vienen acompañados de un
completo programa de Gerenciamiento de
datos denominado : LabPro
 Realiza búsquedas multíparamétricas.
 Informes epidemiológicos completos.
 Flexibilidad

 Supresión de antibióticos
 Finalización automática.
 Copia de seguridad en disco
 Normas CLSI
Para el Paciente:

 Resultados rápidos: Esencial para pacientes


de enfermedades criticas, terapias mas
precisas, reducir el tiempo de estadía

 Alternativas de antibióticos .

 Reducir combinación de terapias.

 Reducir la Infecciones Intrahospitalarias.


 Automatización.

 Una buena carga del trabajo (ID+


Susceptib) lo realiza un solo equipo
 Soporte científico y técnico.

 Utilizaun software “experto” que revisa


los datos generados , aplicandose reglas
para detectar fenotipos o patrones de
resistencia imposibles o inusuales y
permite reconocer errores técnicos de
los operadores.
Farmacia
 Relaciona resultados microbiológicos con
el record de farmacia del paciente.

 Favorece la reducción de gastos por


antibióticos.

Control de Infecciones Intrahospitalarias:


 Datos epidemiológicos con estadísticas.

 Monitoreode las IIH y de la resistencia


microbiana.
Hospital:
 Mejorar calidad en el cuidado del paciente.
 Reducir el gasto de antibióticos.
 Reducir el tiempo de estadía del paciente.
 Reducir las infecciones adquiridas en el
hospital.

Cuerpo Médico:
 Resultados precisos de Identificación y
Antibiograma.
Recomendaciones para tratamiento
empírico basados en antibiogramas
específicos del hospital.
Muestra

Sistema Automatizado

Softward “experto”

Datos

Beneficios múltiples
Médicos/Comité
de Infec IH

Paciente

Lab Microbiol
Farmacia
WA/96
 Se debe todavía aislar las bacterias
y preparar una suspensión bacteriana
para el inóculo.

 Puede ser más caro el uso de


insumos descartables.

 Utiliza baterias de sensiblidad con


antimicrobianos fijos, debiendo
obligadamente adoptarse algunos de
los paneles.
 Incapacidad de testar todos los grupos
bacterianos clínicamente importantes.

 Sobre los resultados de las pruebas de


susceptibilidad se han reportado
diversos problemas, los fabricantes
deben incluir sus limitaciones para
algunas combinaciones droga -
microorganismo.

 El control de calidad es dependiente del


uso de cepas ATCC especificadas por el
fabricante, además NCCL no provee
estándares al respecto.
MANUALES LECTURA DE CO2 PRESION DE GASES

SIMPLES CONCENTRACION RADIOMETRICOS NO RADIOMETRICOS

MEDIO LIQUIDO LISIS CONCENTRACION INTERMITENTES CONTINUOS

MEDIO BIFASICOS LISIS CENTRIFUGACION

INDICADORES DE GAS
 Aparecieron en USA hace tres
décadas.
 BACTEC 460 (Becton Dickinson
 Biosciences),
el medio contenía CH con
C14, al desarrollar el mcog, los
substratos eran utilizados con el C14
y liberado como CO2, que se
detectaba.
- Bactec 460® (Becton Dickinson) radiométrico fue el primer
sistema comercial de Hemocultivos automático. Utiliza substratos
marcados con 14C que al ser metabolizado por los microrganismos
libera 14CO2al medio, que difunde a la atmósfera del frasco. En
esta atmósfera se mide periódicamente el nivel de 14CO2 y se
expresa como un índice de crecimiento cuando se compara con los
niveles de CO2 en frascos de control.
- La lectura está totalmente automatizada y se realiza por medio de
una cabeza móvil provista de dos agujas que perforan los tapones
de goma de los frascos. Su principal inconveniente es el manejo y
posterior eliminación de los residuos radiactivos. En la actualidad
ha sido superado por otros sistemas y sólo se utiliza para el cultivo
de micobacterias.
 DETECCION
DE C02 POR METODO
RADIOMETRICO Y NO
RADIOMETRICO.

 LECTURAS DIARIAS POR 7 DIAS


 SUBCULTIVOS EN NEGATIVOS
INNECESARIOS.

 DETECCION PRECOZ.
 MONITOREO “CONTINUO”.
 AGITACION
E INCUBACION
CONTINUAS.
 AUTOMATIZADO

 PROTOCOLOS DE 4-5 DIAS.


 MENOR MANO DE OBRA
 RECUPERACION MAS RAPIDA.
A partir de 1990 aparecen los Sistemas
de Monitoreo Continuo de Hemocultivos.

 El
sistema Bact/Alert (bio Mériux) con
capacidad para 240 frascos y detecta
CO2 de manera colorimétrica.

 El
sistema ESP (Trek Diagnostic
Systems), monitorea los cambios de
presión en el frasco para gases como:
O2, H2, N y CO2, producidos o
consumidos por los microorganismos.
 Presentatres formatos el : 9240 (240
fcos), 9120 (120 fcos) y 9050 (50fcos).
 En la base de cada frasco existe un
sensor de CO2 y mediante un mecanismo
de sensibilidad fluorescente detecta el
crecimiento del microorganismo al
generar CO2.
 Tiene varios medios :
- Aeróbico y Anaeróbico: caldo de
caseina soya con resinas removedoras de
antibióticos
- Medios pediátricos con resinas removedoras
de antibióticos.

-Medio Myco/ F- lytic diseñado para mejorar la


detección de hongos y mycobacterias pero
también soporta el desarrollo de bacterias
patógenas.
- El sistema realiza lecturas cada 10 min.
-Alarmas de positividad luminosa y sonora
Fundamento:
- Presenta 240 fcos.
Cuando los microorganismos están presentes,
metabolizan los nutrientes del medio de cultivo,
produciendo CO2. Un tinte en el sensor reacciona
con el CO2. Este mide la cantidad de luz que es
absorbida por un material fluorescente en el
sensor. El fotodetector del instrumento mide el
nivel de fluorescencia, lo cual corresponde a la
cantidad de CO2 producido . Esta medición es
interpretada por el sistema de acuerdo a los
parámetros positivos pre-programados.
+ -
a) Falso Positivo: Se refiere a las botellas que
el instrumento llama positivas, pero que no
muestran microorganismos en el frotis ni en el
subcultivo.
b) Falso Negativo: Ocurre cuando el
instrumento no detecta crecimiento, pero el
organismo crece en el subcultivo.
Fundamento: El sistema utiliza un sensor colorimétrico y
una luz reflejada para monitorear la presencia y producción
de CO2 disuelto en el medio de cultivo. Si existen
microorganismos en la muestra, se genera CO2 producto de
que los microorganismos metabolizan los substratos del
medio de cultivo. Debido a esto, el sensor gas-permeable
instalado en el fondo de cada frasco de cultivo cambia de
verde a amarillo, indicando que está positivo. Esta
positividad es captada por el sensor del instrumento, que
activa una alarma y se enciende una luz en la celda del
frasco respectivo.
 1. La act metabolica de los
organismos producen C02.
 2.El CO2 reacciona con el
tinte del sensor.
 3.LED , modula la act
fluorescente del sensor .
 El fotodetector mide el
nivel de flourescencia.
 La informacion es emitida
a la computadora ,en la
cual se aprecia cual se
desarrollo.
INDICADOR DEL MECANISMO DE MONITORIZA -
SISTEMA CRECIMIENTO DETECCION CION CONTINUA

BACTEC 460 Producción de CO2 Radiométrico NO

BACTEC 660 Producción de CO2 Infrarrojos NO

BACTEC 9240 Producción de CO2 Fluorescencia SI

Bact/Alert Producción de CO2 Colorímetro SI

Vital Producción de CO2 Fluorescencia SI


Cambio de pH,
potencial Redox.
ESP Producción y /o Manométrico SI
consumo de gas.
Sistema Nro de Max. Frecuencia Tipo de
Frascos : unidades de de lectura agitación/vel
frascos (minutos) ocidad

Bactec 9240 240 5(1200) 10 Balanceo/30a

Bactec 9050 50 10

Bac/Alert 120-240 6(1440) 10 Balanceo/34a

Vital 200-400 3(1200) 15 Sinusoidal/150


a

ESP 128-384 5(1920) 12(aerobios) Rotación/160ª


24(anaerobio
s)
CALDO VOLUM. Volum.de Ventil Concentra
DE DEL sangre DILUCION Atmós- a ción/
CULTIVO CALDO recome- fera -ción anticoagul
SISTEMA (ml) ndado (ml) reque anteb.
ri-da.

Bactec 9240
Aerobio/F SCD 40 5 1:8 CO2aire No 0.025%/SPS
CO2N2 0.025%/SPS
Anaerobio SCD 40 5 1.8 No
CO2aire 0.050%/SPS
Plus aerobio SCD 25 10 1:2-5 No
CO2N2
PLUS SCD 25 10 1:2-5 No 0.O50%/SPS
CO2+aire
anaerobio 0.020%/SPS
SCD 40 0.5-3 1:80-1:13,3 CO2+N2 No
Litic/ 0.035%/SPS
Anaerobio F SCD 40 10 1:4

Bact /alert
AEROBIO SCD 40 10 1:4 CO2aire Si
CO2N2 0.035%/SPS
ANAEROBIO SCD 40 10 1:4 No
PEDIC/BAC CO2N2
BHI 20 4 1:5 Si 0.020 %SPS
FAN/aerobio CO2+aire
BHI 40 10 1:4 CO2+N2 Si
FAN 0.050%/SPS
/ANAEROBIO BHI 40 10 1:4 No

Vital
AEROBIO SCP 40 10 1:4 CO2+mezcla O2 No 0.025%SPS
Anaerobio SCP 40 10 1:4 Co2+mezclaN2 No 0.O25%SPS
a: SCD: Caldo soja-caseína; BHIno: Caldo cerebro-corazón; SCP: Caldo peptona soja-caseína; PP:
Proteosa-peptona.
b: SPS: Polianetol sulfonato sódico; TSC: Citrato trisódico
POSITIVOS NEGATIVOS
 Se realiza el frotis por Gram y  El formulario de
transplante a Agar sangre y hemocultivo se reporta y
agar chocolate. envía a la sala como
 Si el frotis del frasco de “Negativo en 96” o “No
hemocultivo revela la presencia hubo crecimiento en 96h”,
de microorganismo se hace un si se cumple ésta
informe escrito en el que se condición.
indica la morfología y reacción
al Gram del microor-
ganismo, anotando que se
continuará con la identificion
etiológica y el antibiograma.
Mayor sensibilidad que los métodos
convencionales.

Rapidez en el diagnóstico
( 5 días)

Disminución de riesgo biológico


para el operador.

Disminución de la contaminación
Ahorro de trabajo (código de barras)
Costomayor que las botellas
convencionales.

Pueden suceder falsas alarmas,


como positivos.

Gérmenes especiales , a
determinadas temperaturas.