ALVAREZ ALVAREZ VERONICA

MONTIEL ZUÑIGA XAREMI

VALDES ORTIZ ALVARO ANTONIO
 Efectuar la hidrólisis total de una proteína

 Identificar algunos aminoácidos presentes en un

hidrolizado de proteína, por medio de sus
propiedades físico-químicas

 Identificar por cromatografía en placa fina algunos

de los aminoácidos presentes en un hidrolizado de
proteína.
Antecedentes teóricos
Fundamentos teóricos
 ¿Qué son las proteínas?

 Largas cadenas de aminoácidos unidos por enlaces

peptídicos.
 Constituyentes fundamentales de todas las células y
tejidos del cuerpo.
 Constituyentes esenciales de la dieta necesarios para
la síntesis de tejido corporal, enzimas, algunas
hormonas y componentes proteicos de la sangre.
 Se componen por carbono, hidrogeno, oxigeno,
nitrógeno y azufre.
 SEGÚN SU FUNCION

 A) Fibrosas o estructurales
 B)Globulares
 C) Conjugadas

SEGÚN SU NIVEL DE COMPLEJIDAD

 A) primarias
 B) secundarias
 C) terciarias
 D) cuaternaria
 AMINOACIDOS
 Moléculas simples formadas por la hidrólisis completa
de una proteína
 Unidad principal delas proteínas
 Son esencialmente un ácido orgánico que contiene
un grupo amínico en el átomo de carbono que se
encuentra adyacente al grupo carboxilo
 cα

Grupo de
cadena
lateral
 Un grupo amino, -NH2, que aparece como su forma
protonada -NH3+
 Un grupo carboxilo, -COOH, que aparece como su
forma disociada -COO-
 Un hidrógeno, -H
 Una cadena lateral, que es la que distingue unos
aminoácidos de otros.
 Tanto el grupo amino como el carboxilo aparecen
ionizados; amino como -NH3+ y carboxilo como -
COO-.
 Alifaticos
 Aromáticos
 Hidroxiaminocidos
 Tioaminoácidos
 Aminas secundarias
 Dicarboxilicos
 Dibasicos
 Hidrólisis de una proteína

 La hidrólisis de proteínas es la ruptura de la estructura

primaria, es decir la ruptura de la secuencia de una
proteína.

 La hidrólisis de las proteínas termina por fragmentar las

proteínas en aminoácidos.

 Debido a la hidrólisis, las propiedades moleculares de las

proteínas cambian, produciéndose la disminución del
peso molecular, el aumento de la carga y la liberación
de grupos hidrofóbicos, entre otros fenómenos.
 Tipos de hidrolisis
 Hidrólisis acida
 Hidrólisis básica

 Hidrólisis encimática
 Hidrólisis ácida

 Se basa en la ebullición prolongada de

la proteína con soluciones ácidas fuertes (HCl y
H2SO4).

 Este método destruye completamente el triptófano y

parte de la serina y la treonina.
 Hidrólisis Básica

 Respeta los aminoácidos que se destruyen por la

hidrólisis anterior, pero con gran facilidad, forma
racematos.

 Normalmente se utiliza (NaOH e BaOH).

 Hidrólisis enzimática

 Se utilizan enzimas proteolíticas cuya actividad es

lenta y a menudo incompleta, sin embargo no se
produce racemización y no se destruyen los
aminoácidos; por lo tanto es muy específica.
Acetato de plomo
Ácido clorhídrico Esenciales
Ácido nítrico Valina
Hidróxido de sodio Fenilalanina
Nitrito de sodio No esenciales
Sulfato de cobre Glicina
Alcohol terbutilico Alanina
Ninhidrina

Fenolftaleina
Rojo Congo
PROPIEDADES DE Acetato de Ácido clorhídrico Ácido nítrico Hidróxido de
LOS REACTIVOS. plomo conc. conc. sodio

PM 325,2 g/mol 36.46 g/mol 63.02 g/mol. 2100 kg/m3

Soluble en
SOLUBILIDAD agua y Soluble en agua soluble en agua soluble en agua
glicerina

PUNTO DE
100◦C 48 °C 86 °C 1390 °C
EBULLICIÓN

PUNTO DE FUSION 75°C -26 °C -42 °C 318 °C

1190 kg/m3 1413.4 kg/m3 1111 kg/m3

DENSIDAD indeterminad
(solución 37 %) (solución 70%) (solución al 10%)
a

0
CARACTERISTICAS 3 0
 Nitrito de
Sulfato de cobre Alcohol terbutilico Ninhidrina
sodio

68.9953 160.61 g/mol

PM 74.12 kg/m3 178.15 g/ mol.
g/mol

Soluble en agua y
Soluble en metanol y ligeramente
SOLUBILIDAD soluble en agua Soluble en agua
agua solubles en alcohol y
glicerina

PUNTO DE
320 °C 650 °C 83 °C Indeterminado
EBULLICIÓN

250-258
PUNTO DE FUSION 271 °C 110 °C 26 °C
(descomposición
271 kg/m3
3603 kg/m3 (solución
DENSIDAD (solución 80 775 kg/m3 680 kg/m³
20%)
%)

2 3 0
CARACTERISTICAS 3 1 0
1 0 1 2
1 0
 Indicadores

PM SOLUBILIDAD FORMULA MOLECULAR ph Vire

0-8 Incoloro
Soluble en
318,32
Fenolftal agua y 8.2 Rosa
g/mol
eina alcohol pastel

12-14 Fiusha

Menor Azul rey

soluble en de 3
Rojo 696.665 agua y
Congo g/mol soluciones 3.0-6.2 Purpura
orgánicas
7-13.5 Rojo
 Aminoácidos
PUNTO DE
Esenciales PM DENSIDAD SOLUBILIDAD Formula
FUSION

117.15 1316 Insoluble en

Valina 25 °C
g/mol kg/m3 agua

165,19 Indetermi Insoluble en

Fenilalanina 283 °C
g/mol nada agua

No
esenciales

Soluble en
75,07 1607
Glicina 236 °C agua
g/mol kg/m3

1401
89,09 Soluble en
Alanina kg/m3 297 °C
g/mol agua
a) PREPARACION DE SOLUCIONES
b) REACCIONES DE IDENTIFICACION
I. HIDRÓLISIS DE GRENETINA
II. SOLUCION NEUTRALIZADA DE HIDROLIZADO DE
GRENETINA
III. SOLUCION DE GRENETINA SIN HIDROLIZAR
IV. SOLUCION DE ALBUMINA
 REACCION DE HIDRÓLISIS DE UNA PROTEINA
DENOMINADAGRENETINA

PROTEINA α-AMINOACIDO
Cantidad Reactivo
1g Grenetina
Ácido clorhídrico
10 mL
concentrado
10 mL Agua destilada
0.5 g Carbón activado
matraz reflujo
• 1g grenetina • Calentar
+ suavemente
• 10mL HCl • 35 minutos

agregar
Filtrar • 0.5g carbón
En caliente activado
• Calentar 2 minutos
 cantidad Reactivo
5.0 mL SOLUCION A
La necesaria NaOH 10%
El necesario Papel PH
Cantidad Reactivo
0.5 g Grenetina
20 mL Agua destilada
Cantidad Reactivo
0.5 g Grenetina
20 mL Agua destilada
1. Reacción Xantoproteica
2. Reacción de precipitación
3. Reacción de Biuret
4. Reacción con Ninhidrina
5. Reacción con ácido nitroso
6. Acción reguladora de aminoácidos
7. Cromatografía en placa fina
Solución “A”
HNO3 Calentar en baño
(CONCENTRADO) maría

Solución “A”

Adicionar NaOH
10% (pH básico) Enfriar

Observar
Solución A

NaOH al10%
Pb(CH3COO)2 AL
Solución D 10% OBSERVAR
Calentar a ebullición
5 minutos

H2O
Testigo H2O,
NaOH al 10%

Solución C,
NaOH al 10%

Solución D

Solución A, Adicionar
NaOH al 10% Agitar OBSERVAR
CuSO4 al 2%

Solución D,
NaOHal 10%

Solución A
 H2O

Solución B

Adicionar Calentar 5
ninhidrina al min en OBSERVAR
Solución C
3% baño maría

Solución D

Solución al 1% de
Aa patrón D
NaOH al 10%
Testigo sin
proteína

Solución A

Enfriar
Adicionar HCl OBSERVAR
adicionar
Solución C concentrado
NaNO2 al 5%

Solución D
 Adicionar
Solución B solución de rojo
Congo
Adicionar
OBSERVAR
NaOH 0.1 N

H2O Adicionar solución

fenolftaleína al 1%
Aplicar dos gotas de Realizar
cada sustancia cromatografía en
(solución B, Dejar secar una mezcla 7:3
aminoácidos alcohol terbutilico-
patrón) agua

Revelar usando
Determinar valores
solución de Sacar y dejar secar
de R.f
ninhidrina y calor
Placa cromatografía
solución neutralizada
 Lehninger, PRINCIPIOS DE BIOQUIMICA, editorial
omega, quinta edición.
 Mathews, Van Holde, Ahern, BIOCHEMISTRY, editorial ,
tercera edición.
 Rendina G. TECNICAS DE BIOQUIMICA APLICADA,
edicion 1974, editorial interamericana.