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Clase 2 Crecimiento bacteriano.

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Crecimiento de la población
bacteriana
• el crecimiento está definido como el aumento del
número de células en una población
• se puede medir por el aumento de masa
• la velocidad de crecimiento es el cambio del
número de células en una unidad de tiempo
• el tiempo generacional es el tiempo necesario
para que una población duplique el número de
individuos
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“spread plate method” Se debe hacer diluciones y obtener
(No se usa mucho)
placas con 30 a 300 colonias para
considerarlas estadísticamente 6
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Errores...
• el número de colonias depende del medio de
cultivo...
• depende de las condiciones de cultivo...
• depende del tiempo de cultivo...

• Estos parámetros se deben determinar


previamente: medio de cultivo, temperatura y
tiempo de incubación.
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+ Errores...
• un acúmulo de bacterias podría crecer
como una colonia...
• realizar réplicas...
• se expresa como unidades formadoras de
colonias y no número de células viables...

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Determinación de la viabilidad utilizando fluoróforos

A.
A. B. B.
A.
A.

C.
C. D.D.

BacLight: Yoduro de propidio/Cito9


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• La determinación de la densidad óptica o
de las unidades de fotómetro (Klett) es
proporcional al número de células hasta
cierto límite...
• se debe preparar una curva estándar para
hacer la relación, directo por microscopía,
conteo de ufc o determinación de masa, o
indirecto midiendo la turbidez

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CURVA DE CRECIMIENTO

¿cómo se explica la fase lag cuando se cambia la bacteria desde un medio rico a uno pobre
o desde uno pobre a uno rico?
Pregunta: ¿de qué depende esta máxima velocidad? 18
¿Por qué algunas bacterias son más lentas que otras?
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Definiciones
• ¿Qué es esterilización?
Es la eliminación de todos los microorganismos

No hay grados de esterilidad


Antiséptico
• Agente químico que puede ser usado externamente para destruir
microorganismos o inhibir su crecimiento.
• Se usa para tejidos vivos.

Desinfectante
• Agente químico que se usa sobre objetos inanimados para destruir
microorganismos
• La mayoría no destruye las esporas
Control del crecimiento microbiano
mediante métodos físicos
Temperatura
Radiación
Filtración
Calor húmedo
• Tiene mejor poder de penetración que el calor seco
• Disminuye el número de m.o. más rápido a una
temperatura definida
• Autoclave:
• 1,1 kg/cm2 (15 lb/pulg2) 15-20 min 120°C
• la temperatura mata las bacterias, no la presión
• En la autoclave, a 120 °C, las endoesporas requieren de 4 –
5 min para disminuir su número a un décimo.
• Las bacterias vegetativas requieren de 0,1 – 0,5 min
• El tiempo puede ser mayor si el volumen del material es
mayor
Autoclave
Pasteurización
• Productos lácteos como leche, también
cerveza, alimentos sensibles a la
temperatura.
• Elimina Salmonella, Escherichia y
Mycobacterium
• Se calienta la leche a 71°C por 15 s en un
método flash o a 63 - 66 °C por 30 min en
un método de mantención
• No es sinónimo de esterilización
• El frío
• Radiadición electromagnética:
La unidad de la radiación es el Roentgen
Para aplicaciones biológicas se usa la dosis
de radiación absorbida, cuya unidad es el rad
(100 erg/g) o el gray (1Gy = 100 rad)
Los m.o. son mucho más resistentes que los
organismos multicelulares
Para disminuir la carga bacteriana 10 veces se
necesitan al menos 200 Gy, mientras que una
dosis letal en humanos es menos de 10 Gy.
Filtración

Filtro grueso Filtros a los que se les ha Microscopía electrónica de


bombardeado núcleos de átomos bacterias acuáticas y algas
de los cuales se conoce el capturadas en un filtro
diámetro. Nucleopore de 5 um de
diámetro.

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