Técnicas inmunológicas en el diagnostico clínico

Los inmunoanálisis son actualmente

herramientas de amplio uso en los laboratorios
para medir diferentes analitos biológicos, debido
a su facilidad de trabajo, como en la obtención de
resultados sensibles y específicos.
 Nefelometría
La nefelometría es una técnica que permite determinar niveles de
antígeno o de anticuerpo en soluciones a muy baja concentración.
Ensayo de inmunoabsorcion ligado a enzimas
(ELISA)
Anticuerpo
antinucleares
Anticuerpos antinucleares
Los ANA son inmunoglobulinas que reaccionan contra diferentes
componentes autólogos nucleares ( ADNcd, SSA/Ro, proteínas
del centrómero, etc.) y citoplásmicos ( aminoacil tRNA sintetasa o
Jo-1, mitocondrias, etc.). Estos últimos, no obstante, son
antígenos citoplásmicos y los anticuerpos que los reconocen son
referidos también como ANA
Anticuerpos antinucleares

.
prueba para detectar anticuerpos
antinucleares
FANA : Es un método de un análisis de sangre llamado Prueba
Fluorescente de Anticuerpos Antinucleares o FANA (por sus siglas
en inglés). Esta prueba consiste en ver anticuerpos con etiquetado
fluorescente en un portaobjetos de vidrio bajo un microscopio y
determinar el patrón y la intensidad de la fluorescencia.

Cómo se miden los niveles de FANA:

Los resultados de la prueba FANA se informan en valores y los
patrones que forman los anticuerpos, por ejemplo, homogéneos,
moteados, etc. Esta lectura de valores se determina mediante el
agregado de una solución salina (agua salada) a la parte líquida
de la sangre de una persona.
Por ejemplo, 1 parte de sangre se mezcla con 40 partes de
solución salina para crear una dilución de 1:40. La dilución pasa
por una serie de pasos adicionales y se crean tubos de diluciones
de 1:80, 1:160, 1:320 y 1:640, respectivamente.
Patrones de ANA detectados
mediante IFI

Patrones homogéneos: se caracteriza por una

tinción homogénea en el núcleo A) con metafase
compacta y tinción de los nucléolos negativa, B) con
metafase delineada y tinción de los nucléolos
negativa y C) con metafase difusa y tinción de los
nucléolos positiva.
El patrón periférico se caracteriza por tinción
regular alrededor del núcleo; el centro de
este patrón muestra con menos tinción . La
placa de la cromatina se tiñe de forma
delineada o compacta
patrón moteado grueso como aquel en el que
el núcleo se observa teñido con gránulos
gruesos y el patrón moteado fino lo definen
como núcleo teñido con gránulos finos
 patrones citoplásmico identificados
en células HEp-2,
El patrón mitocondrial se caracteriza
por una tinción granular en hileras
punteadas que rodean al núcleo y se
extienden hacia el citoplasma sin
cubrirlo por completo.
HOMOGENEOS: artritis reumatoide
Bibliografía

http://www.reumatologiaclinica.org/es/anticuerpos-
antinucleares/articulo/S1699258X09002435/

https://www.rheumatology.org/I-Am-A/Patient-Caregiver/E
nfermedades-y-Condiciones/Anticuerpos-Antinucleares-ANA
https://www.clinicalkey.es.ezproxy.unilibrebaq.edu.co/#!/content/bo
ok/3-s2.0-B9788490229965003355?scrollTo=%23hl0000823
 Pruebas de
Inmunofluorescencia
• Conjugar colorantes fluorescentes con anticuerpos que reconozcan la
molécula en estudio

• Se encuentran conjugados a un fluoruro, como:

• Isotiocianato de Fluoresceína (FITC)
• Es una de las técnicas más utilizadas en los estudios de
autoinmunidad.

• Requiere de trabajo y no se adapta con facilidad a procedimientos

automatizados

• Hay dos tipos de inmunofluorescencia

• Directa
• Indirecta
Inmunofluorescencia indirecta (IFI)

• Se basa en el reconocimiento de los anticuerpos que reconocen

estructuras antigénicas celulares.

• Los anticuerpos reconocedores (anticuerpos antiinmunoglobulina

humana) van dirigidos contra las fracciones constantes de las
inmunoglobulinas IgG, IgA e IgM y unidos al colorante fluorescente.
Inmunofluorescencia directa (IFD)

• Consiste en que un anticuerpo marcado con el fluorocromo, va a ser

el mismo en reaccionar con el antígeno en estudio.
Resultados

• Los resultados del reconocimiento de los antígenos por los

anticuerpos presentes en el suero, plasma o cualquier otro líquido o
tejido se evalúan en el microscopio de epifluorescencia.

• Fluorescencia: Positivo
• No fluorescencia: Negativo