METABOLISMO

OXIDATIVO-FERMENTATIVO
Medio de
Hugh-Leifson

Integrantes:
Arreguín Aceves Karol
Carlos Aguirre Ana Rubí
Vargas Mercado Eylin Melissa
3AM2 - eq.9
FUNDAMENTO

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 MEDIO HUGH-LEIFSON

• Es una prueba que indica del tipo de metabolismo energético:

respiratorio (O) o fermentador (F).

• Se suele utilizar glucosa como sustrato.

• Se detecta la acumulación de ácidos con un indicador ácido-base (azul de

bromotimol).

• La bacteria se inocula por picadura y se incuba en condiciones

de aerobiosis (sin parafina) y de anaerobiosis (con parafina, tubo
cerrado), simultáneamente.

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• Las bacterias que respiran aerobiamente crecen en la superficie
del medio del tubo abierto.
• Transforman la glucosa en CO2, la superficie del medio se verá
ligeramente amarilla (por la formación de ácido carbónico
originado al reaccionar el CO2 con el agua del medio).
• En el tubo cerrado el cultivo se mantiene azul-verdoso.
• Las bacterias fermentadoras producen ácidos a partir de la
glucosa.
• Viran el cultivo del tubo cerrado a amarillo; en el tubo abierto se
inicia el viraje en el fondo, pero transcurridas 24 horas los ácidos
pueden difundir por todo el medio virándolo a amarillo.

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COMPOSICIÓN DEL
MEDIO

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MEDIO BASE
COMPONENTE CANTIDAD
Peptona 2g
NaCl 5g
K2HPO4 0.3 g
Azul de bromotimol 0.03 g
Agar 3g
Glucosa 10 g
Agua destilada 1000 mL
Esterilización: 112 °C, 30'

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INOCULACIÓN E
INCUBACIÓN

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INOCULACIÓN : INCUBACIÓN :
Método:

• Eliminar el oxígeno del medio • Incubar a 37 oC

de dos tubos para cada
bacteria (calentar a 100 °C a durante 24 horas
baño maria durante 10 minutos
y enfriar rapidamente).
• Inocular por picadura (con hilo
de siembra) dos tubos por
cada bacteria.
• Añadir a uno de los cultivos
parafina estéril para aislarlo
del aire.

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DESPUÉS DE LA
INCUBACIÓN

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Después de la incubación se puede observar la existencia de dos
posibles vías metabólicas: Fermentativa y oxidativa.

• Bacterias fermentativas. Se produce un crecimiento

abundante en ambos tubos.

- Productos terminales: Formación de gran cantidad de ácidos.

- Ejemplos de bacterias fermentativas: Las bacterias

anaeróbicas-aeróbicas tolerantes y anaeróbicas estrictas, como
cocos gran positivos y gran negativos, bacilos gran positivos y
negativos.
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• Bacterias oxidativas. Se produce sólo crecimiento en la parte
superior del tubo abierto.

- Productos terminales: Poca cantidad de ácido, sobre todo

ácido carbónico y poco gas. En el medio cerrado no hay
crecimiento.

- Ejemplos de bacterias oxidativas: Las bacterias aeróbicas

estrictas como Bacilos, Mycobacterium tuberculosis, Nocardia,
Lactobacillus, Pseudomonas.

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LO QUE SE ESPERA OBSERVAR:

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LECTURA DE LA
INCUBACIÓN

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RESULTADOS:
Después de incubar los tubos de ensaye se pueden obtener estos valores :

• La producción de ácido se
evidencia por el cambio de color de
verde a amarillo.
• Los organismos fermentadores
producen un viraje a amarillo por
la producción de ácido, en ambos
tubos.
• Los oxidativos sólo producen esta
reacción en el tubo sin parafina.

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 BIBLIOGRAFÍA:

• Prueba O-F, Oxido fermentativa o de Hugh-Leifson.

Extraído de:
https://www.ugr.es/~pomif/pom-bac/pb-v/pb-v-3-of.htm
https://www.franrzmn.com/prueba-de-oxidacion-fermentacion-de-hugh-leifson/

GRACIAS
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