Anda di halaman 1dari 10

Isolasi, Identifikasi Senyawa Alkaloid dari Daun

Rivina humilis L. serta Uji Sitotoksik Menggunakan


Metode BSLT (Brine Shrimp Lethality Test)

Anggota :
1. Agnes Kristiana S 11. Monica Sekar R
2. Derry Eviana P 12. Mutiara G
3. Dinar Aditama N 13. Nabilla Safira
4. Eka Afrilia H 14. Novia Miko L
5. Endah Ayu W 15. Nunik
6. Hani Asmorowati 16. Nur Imaniatus S
7. Indriani Estikawati 17. Oktavia Nurul K D
8. Juveny Arshella 18. Pradepna Devi
9. Kusumaning Ratih R 19. Rida Anggraini
10. Mita Kristanti N 20. Tutik Widowati
Jurnal yang diacu :
Latar Belakang

 Tanaman getih-getihan (Rivina humilis L.) adalah salah satu


tanaman Phytolaccaceae yang merupakan tumbuhan asli
Amerika utara dan tengah, tapi dapat tumbuh juga di
Indonesia. Daun getih-getihan mengandung senyawa
diantaranya flavonoid, alkaloid dan terpenoid.
 Tanaman berfamily Phytolaccaceae yaitu condonocarpus
australis A. Cunn teridentifikasi mengandung senyawa
alkaloid yaitu candorcopine. Pada Phytolacca americana
teridentifikasi mengandung alkaloid betanin.
 Tanaman getih-getihan belum banyak diteliti beserta
aktivitasnya oleh karena itu penelitian ini dimaksudkan untuk
mendapatkan isolasi alkaloid yang akan diuji aktivitas
sitotoksiknya.
Prinsip Isolasi

 Menggunakan metode maserasi


 Berdasarkan perbedaan polaritas
1. Alkaloid → polar
2. Etanol → polar
3. n-heksana → non polar
4. Ditambah etil asetat & lapisan asam (garam
alkaloid)
5. Ditambah NH4OH pH 8-9 → ekstrakasi etil
asetat → alkaloid bebas → dipekatkan → diuji
dengan reagen mayer dan dragendroff.
Karakteristik Alkaloid

Karakteristik alkaloid meliputi sifat fisika dan sifat kimia, yaitu :

 Sifat Fisika
1. Garam alkaloid dan alkaloid bebas biasanya berupa senyawa padat, berbentuk kristal,
tdk berwarna
2. Pahit dan sangat beracun
3. Tidak larut air, larut dalam kloroform, eter dan pelarut organik lainnya yang bersifat
non polar
4. Bersifat basa karena adanya elektron bebas pada atom N.

 Sifat Kimia
1. Terdiri atas karbon, hidrogen, dan nitrogen sebagian besar mengandung oksigen.
2. Dapat membentuk endapan dgn bentuk iodide dan Hg, Au dan logam berat lainnya
3. Dengan pereaksi Dragendroff membentuk endapan coklat tua
4. Sangat mudah mengalami dekomposisi sehingga harus diubah dalam bentuk garam.
Preparasi Sampel dan Fitokimia
5 kg daun Rivina humilis L.
2 kg serbuk
Bahan Awal dicuci, dikering anginkan,
Rivina humilis L.
diblender

 Penapisan Fitokimia

10 gr serbuk simplisia 5 gr serbuk simplisia


Maserasi dg etanol Maserasi dg eter 10ml,
50ml, 3 jam, saring 3 jam, saring
Filtrat Filtrat

Uji Alkaloid :
Uji Steroid/Triterpenoid :
1. 5ml filtrat + 5ml HCl + Dragendorf --> end. merah
5ml filtrat + 2ml Liberman Buchard
bata
2. 5ml filtrat + 5ml HCl + Mayer --> end. putih (asam asetat anhidrat+asam sulfat) --
Uji Flavonoid : > coklat (steroid), biru/hijau
5ml filtrat + 3ml NaOH 2M --> merah, kuning/jingga (triterpenoid)
Uji Saponin :
5ml filtrat + 5ml aquadest, kocok --> timbul busa
Uji Fenolat :
5ml filtratflavonoid = 3 tts FeCl3 1% --> hijau/merah
Ekstraksi Alkaloid

2 kg serbuk daun getih-


getihan Alkaloid
Maserasi dengan etanol
0,7323 gram
Dipekatkan u/
Ekstrak etanol pekat (40,25 menghilangkan pelarut
gram) etil

Menghilangka Direndam dengan air 1:1 Lapisan Lapisan


n klorofil selama 24 jam etil Basa
Filtrat (ekstrak etanol-
air) Ekstraksi dg etil asetat

Menghilangka Partisi dengan N-heksana Alkaloid


n senyw non bebas
polar (Basa, coklat)
Lapisan N- Lapisan + NH4OH (pH 8-9)
Heksana etanol-air Mengubah garam
alkaloid mjd
Mengubah alkaloid + HCL 2M Melarutkan
Lapisan alkaloid bebas
bebas mjd garam (pH 3) senyawa
lain asam
Garam Alkaloid
Ekstraksi dg
Lapisan etil
etil asetat asetat
Pemisahan senyawa alkaloid
KLT

Eluen tunggal dan


campuran 4 noda (A1,
Fase diam silika gel A2, A3, A4)
KLT
Pemisahan terbaik (3 noda)
Pereaksi semprot
dengan eluen kloroform :
dragendorf
etanol (7:3)

3 noda (+)
alkaloid
A1,A2,A3

Plat KLT 20x20 3 noda (A1, A2, A3)

KLT preparatif
Eluen kloroform : etanol Dilarutkan dlm etil
(7:3) asetat
Uji kemurnian

Isolat alkaloid pita A1,A2,A3

KLT dgn berbagai eluen

Noda tunggal pita A1

Diuapkan

Padatan berwarna putih


0,0423 g
Karakteristik Struktur Kimia

Analisis Senyawa A1
dengan Spektrofotomet
er UV-Vis

Analisis Senyawa A1
dengan Spektrofotometer
FTIR

Analisis Senyawa A1
dengan
Spektrofotometer LC-
MS
Senyawa alkaloid indol dengan titik leleh 290-292°C,
mempunyai gugus N-H, O-H, =C-H aromatik, CH2,
C=N, C=O, C=C, C-N, C-O Eter, dan berat molekul
sebesar 267,27 g/mol. Harga LD50 sebesar 25,439 ppm.