Resistencia a insecticidas

en Mosquitos
Sebastián Pino
Estudiante de Maestría en Biología
GENMOL
 Introducción

http://www.cdc.gov/parasites/lymphaticfilariasis/

Image courtesy of Jose Luis Ramirez, Laboratory of Malaria and

Vector Research, NIAID, NIH
Introducción

OMS
 Malaria: 200 millones de casos (627,000 muertes)
 Dengue: 50-100 millones de casos/año
 Introducción

Global evidence consensus, risk and burden of dengue in 2010.

S Bhatt et al. Nature 000, 1-4 (2013) doi:10.1038/nature12060

 Introducción

Organofosforados Organoclorados
Carbamatos Piretroides
(OF) (OC)
Introducción

Mecanismos de resistencia a insecticidas

Por • El mosquito cambia sus hábitos, evitando contacto

comportamiento con el insecticida.

• Se basa en la modificación de la composición del

Mecanismos físicos exoesqueleto, evitando la penetración del
insecticida.

Sitio insensible o sitio • Se modifican el sitio de acción del químico, lo que

blanco alterado disminuye la sensibilidad al mismo.

Resistencia • Involucra enzimas no especificas que normalmente

metabólica detoxifican productos químicos extraños.
 Introducción
Sitio insensible o sitio blanco alterado

 Acetilcolinesterasa alterada  Receptores GABA (ácido amino  Alteraciones en los canales

butírico) de sodio (Na+)

http://www.proteopedia.org/wiki/index.php/Image:Synapse_Sc
hematic.jpg
 Introducción
Resistencia metabólica

 Esterasas inespecíficas  Glutation transferasa (GSTs)  Citocromo P-450 monooxigenasas

 Objetivo

 Investigar una serie de parámetros en los rasgos de vida de 6

poblaciones Brasileras de Aedes aegypti que exhiben
diferentes niveles de resistencia a insecticidas piretroides y
organofosforados.
Materiales y métodos

 Poblaciones de mosquitos
 Cepa Rockefeller (Rock)
 5 poblaciones silvestres con diferentes
estatus de susceptibilidad
 1 población controlada, seleccionada
en el laboratorio (Natal/RG)
 Colección de los huevos con
ovitrampas.
 Cría de los mosquitos

24 h 5-6 D

http://www.cdc.gov/dengue

3D

http://dora.missouri.edu/guinea-pig/ https://fibamdp.wordpress.com/biological-control/
Selección por piretroides
 Hembras adultas (3-5 días)
 Exposición por 1h a deltametrina/ 24h de
recuperación
 Se establecieron 3 linajes (R/S)
 200 hembras por cada generación (9
generaciones)
Bioensayos de resistencia a insecticida
 Poblaciones silvestres: 5ug deltametrina
 1,5 ug hasta F3/ 3,0 ug hasta F9
 Organofosforados: Temefos
Larvas L3 de poblaciones silvestres
Larvas L3 de F9
 RR95 calculado usando Probit Analysis
Fitnes: Desarrollo y longevidad Fitnes: Evaluación de aspectos
reproductivos
 Cinética de desarrollo larval
 a) La proporción de hembras en
 Proporción de sexos
postura
 Longevidad
 b) El número de huevos por
 Tamaño vs Ingestión de sangre hembra
 c) La tasa de eclosión de huevos.

Análisis estadístico
 ANOVA/Prueba de comparación múltiple de Tukey
 Linajes de laboratorio S(S1-3) y R (R1-3)
 Rockefeller , S y R
 Kruskal-Wallis : Numero de huevos
 Prueba de Fisher: Proporción de machos y hembras
Resultados
 Selección por piretroides y evaluación de resistencia.
Resultados
Eficacia biológica: Desarrollo y longevidad de las colonias de laboratorio

 Dinámica del desarrollo larval

 Resultados
Eficacia biológica: Desarrollo y longevidad de las colonias de laboratorio

 Proporción de sexos
Resultados
Eficacia biológica: Desarrollo y longevidad de las colonias de laboratorio

 Longevidad de los adultos

Resultados
Eficacia biológica: Desarrollo y longevidad de las colonias de laboratorio

 Alimentados con sangre

 Resultados
Eficacia biológica: Ovoposición y viabilidad de los huevos
Resultados

 Resistencia a organofosforados

Temefos Piretroides
RR95:
RR95:
26,0 R
15,6 S 18,6

Resistencia cruzada
Resultados
Eficacia biológica: Desarrollo y reproducción de las poblaciones silvestres
Discusión
 El proceso de selección por piretroides reveló un aumento de los efectos
nocivos tanto en el desarrollo, como en la reproducción Ae. aegypti, con
la consiguiente reducción de la eficacia biológica (fitness).

 A pesar de la ausencia de una clara ganancia en el estado de resistencia

a los piretroides en los linajes seleccionados por deltametrina , el aumento
de la resistencia a el organofosforado temefos fue evidente.

 Los datos encontrados, sugieren que la selección por piretroides indujo

resistencia cruzada a el organofosforado temefos, presumiblemente como
una función del incremento en la actividad de los mecanismos de
resistencia metabólica, basados en la desintoxicación de enzimas.
Discusión
 En algunos casos, se muestra que la resistencia puede disminuirse o incluso
desaparecer después de sólo unas pocas generaciones sin presión de selección.

 El aumento en los niveles de resistencia se puede deber ya sea a la acumulación

de efectos nocivos, a la presencia de alelos recesivos ligados a mutación kdr, o
incluso a genes de resistencia relacionados con el metabolismo.

 Las poblaciones del distrito de Fortaleza, mostraron una alta resistencia a

temephos.
Discusión
 Factores seleccionados para la resistencia puede presentar efectos pleiotrópicos
directos en uno o varios aspectos de los rasgos de vida. De hecho, las alteraciones
en diferentes rasgos pueden considerarse manifestaciones fisiológicas de los
insectos cuando se afrontan el reto que supone la exposición a insecticidas.

 Reducción de la longevidad, principalmente en las hembras, se observó en el

grupo expuesto a piretroide (R) a lo largo del procedimiento de selección. Por el
contrario, la longevidad parecía no estar generalmente asociada con la resistencia
a insecticidas en las poblaciones silvestres.

 Se observó una reducción significativa de la cantidad relativa de sangre ingerida

en los linajes seleccionado por piretroides R en la generación F9, en comparación
tanto con el grupo Rockefeller y S.
Discusión
 La reducción en el número de posturas por las hembras también se observó en el
grupo R, que sugiere o bien una tasa de fecundidad más baja o, en su defecto, la
disminución de la capacidad de postura.

 Se observó una reducción del número y viabilidad de los huevos puestos por
hembras resistentes (grupo R). En contraste, la evaluación de las poblaciones
naturales F1 reveló que sólo las hembras de Fortaleza, que eran las más resistentes
a temefos, mostraron reducción en el número, pero no en la viabilidad de los
huevos depositados.

 La acumulación de efectos negativos en los parámetros de rasgos de vida aquí

investigados (debido a los efectos pleiotrópicos de los genes de resistencia o
alelos deletéreos autostop) fue evidente en linajes seleccionados en laboratorio,
pero raro en las poblaciones naturales.
Gracias