FITOKIMIA

KUMARIN

Dosen : Munawarohthus Sholikha, M. Si.

 1. Mega Sari (16334065)

2. Godwin Pargaulas S. (16334085)

NAMA Ani Rahayu (16334086)

KELOMPOK 3.

4. Yasinta Dwianitami (16334091)

5. Adisty Deannisa (16334092)

2
  Nama kumarin berasal dari bahasa Karibia
“Coumarou” yang berarti pohon tonka (Coumarouna
adorata Abl), yaitu tumbuhan pertama yang diketahui
mengandung kumarin. Barulah pada tahun 1868,
Struktur Kimia Kumarin kumarin dikenal dengan rumus C9H6O2
 Senyawa yang mengandung kumarin (2H-1-benzopyran-
2-one) merupakan sebuah kelompok yang penting dari
heterosiklis dan banyak contoh yang ditemukan di alam.
 Kumarin yang terkandung dalam suatu tumbuhan dapat
dikenal dari baunya. Bila tumbuhan tersebut
dikeringkan, maka akan memberikan bau yang khas.
Untuk pembuktian secara kualitatif dilakukan uji
berdasarkan pada sifat fluoresensinya dengan sinar
ultraviolet.

3
 SIFAT FISIS & KIMIA
SENYAWA KUMARIN
 Kristal berbentuk jarum dan tidak
berwarna
 Titik leleh 670 – 690 C
 Titik didih 2970 – 2990 C
 Mulai menyublim pada suhu 1000
 Larut 0,25 g/100 ml pada suhu 250 C
 Larut 47,00 g/100 ml etanol 70%
pada suhu 400 C
 Kristal berbentuk orthorombik atau
rectangular
 Sifat kelarutan kumarin sangat bervariasi, ada yang larut
dalam pelarut polar, non polar, dan sedikit larut dalam
pelarut polar
 Peleburan kumarin dengan NaOH menghasilkan asam
asetat dan salisilat
 Nitrasi membentuk 6-nitrokumarin dan 8-nitrokumarin
 Sulfonasi di bawah penangas air memberikan kumarin
6-asam sulfonat dan pada suhu 1500 C memberikan
3,6-asam disulfonat
 Halogenasi dalam kloroform pada suhu ruang dengan
bromida menghasilkan kumarin 3,4-dibromida atau
3,6-dibromokumarin
 Reduksi dengan almalgam natrium menghasilkan asam
metilotat
 Kumarin sulit dioksidasi dan stabil dalam asam
kumarin
 Cahaya radiasi atau radiasi ultraviolet mengubah
kumarin menjadi suatu dimer (titk lelehnya 2630 C)
4
 TUJUAN PENELITIAN
Untuk mengetahui kandungan kimia dan aktivitas
farmakologi senyawa kumarin dan turunannya yang terdapat
pada herba Artemisia annua L yang berasal dari BPTO
Tawangmangu.
Sistematika Tanaman Artemisia Annua L.

Menurut Sugiarso (1996)

• Divisi : Spermatophyta
• Sub divisi : Angiospermae
• Kelas : Dicotyledoneae
• Bangsa : Asterales
• Suku : Asteraceae (Compositae)
• Marga : Artemisia
• Jenis : Artemisia annua L.
 Artemisia annua L
Dikenal sebagai sweet annie atau annual wormwood. Tanaman herba asli Cina yang dikenal sebagai qinghao5
ini sudah dibudidayakan di banyak negara seperti Argentina, Bulgaria, Francis, Hongaria, Romania, Italia,
bekas Yugoslavia, Spanyol dan USA.6 Tanaman ini kini herba Artemisia annua L telah dibudidayakan di Balai
Penelitian Tanaman Obat (BPTO) Tawangmangu.
Dari data literatur herba Artemisia annua L berkhasiat sebagai antimalaria, antibakteri, antiinflamasi, antitumor
dan antipiretik, dan dinyatakan mengandung senyawa terpenoid, flavonoid, kumarin, artemisinic acid,
artennuin B, fenol, saponin dan lemak.
8
 ALAT dan BAHAN
Alat :
1) Alat soxhlet beserta pendingin
balik
2) Alat destilasi
3) Rotary evaporator
4) Serta peralatan gelas yang lazim
digunakan dalam laboratorium.
Untuk keperluan identifikasi
digunakan : GC-MS,
Spektrofotometer UV,FT-IR, 13C
NMR dan H NMR.
Bahan :
 Sample :
1) Simplisia herba Artemisia annua L. siap panen
 Pelarut untuk ekstraksi :
1. Metanol
2. n-heksan
3. Diklormetan
4. Aqua destilata
5. Asam sulfat pekat
6. Asam asetat anhidrat,
7. Ammonium hidroksida
8. Asam asetat 10%
9. Asam klorida 2 N
10.Alkohol
11.Besi (III) klorida
12.Asam klorida pekat
13. Kalium hidroksida
14. Logam magnesium
15. Kalium bromida
16. Etil asetat (didestilasi
ulang)
17. Kloroform (p.a)
18. Metaol (p.a)
19. Pereaksi mayer
20. Dragendorf
21. Plat silica gel 60 GF254 E
Merck
22. Silica gel
9
PROSEDUR KERJA

10

A. Biosintesis
1. Ekstraksi
 Pengambilan Sample
Sampel diambil dari perkebunan BPTO Tawangmangu
Solo, Bahan simplisia yang telah dibersihkan dari
kotoran, diiris, kemudian simplisia yang telah kering di
serbuk.
 Determinasi Tumbuhan
Dilakukan di BPTO Tawangmangu Solo Jawa Tengah.
2. Pemisahan
 Pemeriksaan Skrining Fitokimia
Pemeriksaan pendahuluan ini meliputi pemeriksaan
golongan alkaloid, fenol, flavonoid, minyak atsiri,
lemak/lipid, saponin, dan steroid/ triterpenoid dan
kumarin.
B. Metode Ekstraksi Dan Isolasi Senyawa
Simplisia Artemisia annua L. yang sudah dihaluskan diekstraksi
secara soxhletasi dengan metanol, tiap satu jam pelarut metanol
diganti agar senyawa yang didapat tidak rusak. Semua sari
terekstraksi keluar dapat dilihat pada warna ekstrak terakhir
metanol tidak lagi berwarna.. Ekstrak metanol yang didapatkan
selanjutnya dipekatkan dengan menggunakan rotary evaporator
sampai diperoleh ekstrak kental. Kemudian ekstrak metanol yang
didapat dihitung rendemennya.
a. Fraksinasi
Ekstrak kental metanol ditambahkan air panas kemudian
difraksinasi dengan n-heksan menggunakan corong pisah, kocok
lalu dipisahkan antara lapisan rc-heksan dari lapisan air. Lapisan
air kemudian difraksinasi dengan diklor metan menggunakan
corong pisah, dikocok lalu dipisahkan antara lapisan air dengan
diklor metan. Fraksinasi dilakukan berulang kali sampai tiap tiap
fraksi terakhir yang didapat jernih. Masing-masing fraksi
dipekatkan dengan menggunakan rotary evaporator. Kemudian
masing-masing fraksi dilakukan KLT dengan menggunakan eluen
n- Heksan: etil asetat dengan perbandingan (4:1), (2:1) dan (1:1).
11
 b. Kromatografi kolom
Pemisahan kromatografi kolom dilakukan dengan fase diam silika
gel dan fase geraknya yaitu «-heksan: etil asetat secara gradien pada
ekstrak kental diklor- metan.
Ekstrak kental kemudian ditimbang sebanyak 22,69 g digerus
bersama fase diam, dimasukkan ke dalam kolom. Setelah itu dielusi
dengan fase gerak n-heksan : etil asetat dengan perbandingan (4 : 1),
(2 : 1), dan (1 : 1). Tiap tiap fraksi yang keluar ditampung dengan
erlenmeyer 20 ml dan 50 ml. Lalu fraksi dalam erlenmeyer tersebut
dipekatkan menggunakan rotary evaporator sampai didapat fraksi
yang lebih pekat dari sebelumnya. Kemudian fraksi tersebut diujikan
pada plat KLT silica gel 60 GF254 E Merck dengan eluen yang sama
dengan sebelumnya. Fraksi yang sama Rf-nya kemudian digabung
menjadi satu fraksi.
3. Pemurnian
Kristal yang terbentuk direkristalisasi dengan menggunakan pelarut
metanol kloroform. Hal ini dilakukan berulang-ulang dengan pelarut
yang dapat melarutkan senyawa tersebut sehingga diperoleh senyawa
murni.
4. Identifikasi Senyawa Hasil Isolasi
a. Secara organoleptis
b. Metode kimia
c. Metode kromatografi
5. Elusidasi Struktur
a. GC-MS
Cuplikan diinjeksikan melalui lubang masuk cuplikaa pada suhu
tinggi,mka akan berubah menjadi gas; bersama gas pembawa pada
kenaikan suhu komponen yang mempunyai titik lebur yang sama,
secara otomatis data terekam di dalam komputer. Bandingkan
dengan data spektrum yang terdapat pada bank data NIST (National
Institute of Standard and Technology).
b. Spektrofotometri Ultra Violet (UV)
Pemeriksaan spektrofotometri UV menggunakan ± 1 mg sampel
yang dilarutkan dengan metanol (p.a) sampai larut, dan dideteksi
menggunakan spektrofotometri UV sehingga terlihat puncak panjang
gelombang yang merupakan karakteristik suatu senyawa, kemudian
grafik yang terbentuk direkam. Grafik yang terbentuk menampilkan
serapan dan panjang gelombang dari sampel tersebut.
c. Spektrofotometri infra merah (IM)
cuplikan/sampel dilarutkan dengan pelarut kloroform atau karbon
tetraklorida atau karbon disulfida, dan dicatat spektrum dari larutan
ini. Larutan biasanya (1 - 5%) ditempatkan dalam sel larutan yang
terdiri dari bahan transparan. Sel yang kedua berisi pelarut murni
ditempatkan pada berkas sinar.
d. Spektroskopi H NMR dan C NMR
Senyawa dilarutkan dalam deuterochloroform (CDCls), kemudian
dimasukkan ke dalam tabung dengan sejumlah pelarut dicukupkan
sampai setinggi ± 5 cm. Setelah itu, dideteksi dengan alat
spektrofotometri NMR (Varian Unity INOVA 500 MHz NMR).
12
 KESIMPULAN
Berdasarkan data yang diperoleh melalui hasil identifikasi secara
organoleptis, uji KLT, GC-MS, spektrofotometri UV, FT IR dan
spektrofotometri 'H dan 13C NMR serta dibandingkan dengan literatur 2H-l-
Benzopyran2-one,7-hydroxy-6-methoxy maka senyawa hasil isolasi yang
terkandung di dalam herba Artemisia annua L merupakan senyawa golongan
kumarin dengan nama 2H-l-Benzopyran-2-one,7-hydroxy6-methoxy atau
dengan nama lain skopoletin dengan bobot molekul 192 dengan struktur
molekul sebagai berikut
THANK YOU!
ANY QUESTIONS?