Infecciones por Helicobacter

Pylori.
Historia.
• En 1983, Warren y Marshall reportaron la identificación de bacilos
curvos en el estomago de pacientes con gastritis y ulcera péptica. Por
su semejanza con Campylobacter, originalmente se le denomino
Campylobacter pyloridis, hasta que en 1989 se clasifica como
Helicobacter pylori.
• El descubrimiento de Helicobacter pylori como un patógeno
gastroduodenal ha revolucionado el manejo de diversas
enfermedades gastroentericas, en especial de ulcera duodenal y de
ulcera gastrica.
Descripción
• H. pylori es una bacteria Gram (-)
curva o ligeramente espiral que
mide 0.6 X 3.5 micras.
• Tiene 4 a 6 flagelos unipolares
de aproximadamente 2.5 micras
de largo
• Crece en una atmosfera
microaerofilica y a temperaturas
de 30 a 37°C.
• En medios solidos forma colonias
pequeñas, lisas y translucidas.
• Es incapaz de crecer en presencia
de ácidos biliares.
• Produce ureasa, catalasa y oxidasa
positivas.
• H. pylori es capaz de regular la
transcripción de sus genes en
respuesta a estímulos ambientales
como disponibilidad de nutrientes,
densidad celular, pH, contacto con
tejido blanco, agentes que dañan el
ADN, temperatura y osmolaridad.
Diagnostico.
• Las pruebas diagnosticas se dividen en dos tipos; invasivas que
detectan la bacteria en biopsias obtenidas por endoscopia, y no
invasivas, que no requieren de endoscopia.
Pruebas invasivas.
• Es recomendable tomar biopsias de al menos dos sitios, de antro y de
cuerpo.
• Buscar áreas con apariencia endoscópica normal.
• Transportar la muestra en solución salina y procesarla en menos de
dos horas. Si esto no es posible, entonces debe transportarse en
caldo de cultivo y glicerol para congelarse hasta su uso.
Histología.
• La tinción mas usada es la de
hematoxilina-eosina, pero es
recomendable realizar una
segunda tinción como Giemsa o
Warthin-Starry.
• Ofrece información adicional
sobre el estado del tejido en
cuanto a inflamación, presencia de
atrofia, metaplasia o displasia.
• El resultado depende de la
habilidad del endoscopista y de la
experiencia del patólogo.
Cultivo.
• Se recomienda inocular la biopsia en menos de dos horas en medio de
cultivo.
• Se siembra en medios de gelosa sangre con o sin antibiótico y se incuba en
una atmosfera de microaerofilia (5-10% de CO2) con alta humedad y a
37°C.
• Las placas se observan por hasta 10 días antes de descartarse.
• La prueba es 100% especifica pero su sensibilidad varia mucho
dependiendo de la experiencia del laboratorio.
• Esta prueba es cara, difícil y toma mucho tiempo; solo es recomendable
para conocer la sensibilidad de las cepas a antibióticos en caso de falla al
tratamiento.
Prueba rápida de la ureasa.
• Se basa en la actividad de la enzima ureasa que esta presente en
todas las cepas de H. pylori.
• La biopsia se coloca en un medio con urea y un indicador de pH. Si la
bacteria esta presente, la urea se parte en amonio y CO2; el amonio
sube el pH y el indicador cambia de color.
• La sensibilidad y especificidad de la prueba varia entre 90 y 95% y
depende de la concentración de H. pylori en la biopsia.
• Se aplica en el cuarto de endoscopia, es muy fácil y su lectura es
rápida.
• Se recomienda que esta prueba sea la de elección inicial
Examen de impronta
• Se usa una muestra de biopsia
para hacer una preparación y
observarla directamente en
campo obscuro, o después de
una tinción de Gram.
• La sensibilidad puede ser mayor
al 75% si la cantidad de bacteria
es suficiente.
PCR.
• Detección de material genético de H. pylori por la prueba de la
reacción en cadena de la polimerasa.
• Este método requiere de personal especializado y de equipos
especiales por lo que no se usa en laboratorios clínicos.
• Puede dar resultados falsos positivos cuando H. pylori no esta viable.
• También pueden ocurrir falsos positivos por contaminación del
espécimen con otra muestra positiva.
PRUEBAS NO INVASIVAS.
Prueba del aliento de la urea.
• Se basa también en la actividad de la ureasa.
• El paciente ingiere urea marcada con C13 o con C14 y se colectan dos
muestras de aliento, una al tiempo 0 y otra 30 min después de ingerir la
urea marcada. La ureasa rompe la urea en amonio y CO2, y el CO2 marcado
se absorbe, pasa a circulación y es exhalado en el aliento.
• La prueba tiene valores de sensibilidad y especificidad mayores al 95%.
• Puede dar resultados falsos negativos si en la ultima semana el paciente
tomó inhibidores de la bomba de protones (como omeprazol o
pantoprazol), bismuto o antibióticos.
• La prueba con C14 es mas económica que con C13 pero es radioactiva
• La prueba con C13 no es radioactiva y no tiene limitaciones para
usarse en niños o mujeres embarazadas.
• Este método es el mas recomendado para verificar erradicación
después de tratamiento.
• Para la prueba con C13 se requiere de un espectrómetro de masas,
que es un equipo extremadamente costoso.
Serología.
• Se detectan anticuerpos IgG
contra antígenos de H. pylori.
• Sus valores de sensibilidad y
especificidad están entre 85 y
95%
• Funciona mejor en adultos ya
que en niños con infección
reciente la respuesta inmune
puede no ser suficiente para dar
un resultado positivo.
Detección de antígeno en heces.
• En ciertas condiciones es posible
aislar H. pylori de heces.
• La excreción de antígeno en
pacientes con infección activa,
es constante.
• El método detecta antígeno de
H. pylori en heces por un ensayo
inmuno-enzimatico.
• La sensibilidad y especificidad
del método es mayor al 90%.
Prueba del hilo.
• Método útil para recuperar cepas de H. pylori a partir de jugo
gástrico.
• Se utiliza una capsula entérica que tiene enrollado un hilo de nylon
cubierto de una superficie altamente absorbente. El paciente ingiere
la capsula, fijando el extremo del hilo en el cachete y tragando con
ayuda de agua. Después de permanecer en reposo, se recupera el hilo
y se exprime lo absorbido para inocularse en medio de crecimiento.
• Es útil para determinar resistencia en cepas o presencia de genes de
virulencia.