… QUE ES AUTOMATIZACION?

 Proviene de 2 palabras griegas:

Autos : uno mismo
maiomai: lanzarse

 Es implementar aparatos o maquinas automáticas

para aumentar la rapidez y la producción con el fin
de reducir la mano de obra.
Por el aumento del trabajo y exigencias para el
diagnostico: RAPIDEZ

Evitar el error que causan los métodos manuales:

REPRODUCIBILIDAD.

Evita la manipulación directa de las muestras:

BIOSEGURIDAD.

Uso de la INFORMÁTICA y proporciona un SISTEMA

DE CONTROL DE CALIDAD mas fácil de manejar
 En 1934, Moldavan, pasa células por un capilar
montado sobre un microscopio óptico.
 En los años ’50 los hermanos Coulter, método de
impedancia eléctrica.
 El principio “ Coulter ” es el método de referencia
para recuento de células.
 En los ’80 se agrega el diferencial de 3 parámetros.
 Más recientemente el diferencial de 5 parámetros.
 Walace y Joseph
Coulter

Coulter Counter Model S :

Primer contador
hematológico
En el mercado existen varios
modelos de contadores
hematológicos debido a que
hay mas de un método para
contar cells.

Los parámetros que miden

y los resultados de sus
mediciones sí son los
mismos.
 1ra. GENERACION: Hemograma manual

2da. GENERACION: Medición de cell por

impedancia, sin diferencial.

3ra. GENERACION: diferencial de 3 partes, constantes

corpusculares (18 parámetros)

4ta. GENERACION: Recuento de ret., sist. Homogenización,

dispersión (luz láser), diferencial de 5 partes.

5ta. GENERACION: líquidos biológicos, diferencial de 9

parámetros celulatres
 IMPEDANCIA
 RADIOFRECUENCIA
 DISPERSION DE LUZ
 CITOMETRIA DE FLUJO
 CITOQUIMICA PEROXIDASA
 La impedancia es la oposición
al paso de la corriente alterna.
 Se basa en la determinación
de los cambios de la corriente
eléctrica producidos por
partículas suspendidas en un
líquido conductor.
 El número y el tamaño de los
pulsos indica la cantidad de
partículas y el tamaño de
éstas respectivamente.
 Para determinar los GR se diluye
la muestra en un medio
isotónico.
 Para GB se diluye la sangre en un
medio que produzca lisis de los
eritrocitos, a su vez desprenderá
el citoplasma de los GB dejando
libres los núcleos, los cuales
serán medidos y contados.
 El recuento de PLT se hace
conjuntamente con los GR.
HISTOGRAMAS

La curva de GR es cónica,
modal y su tamaño es de
60 a 110 fl.

Los GB se agrupan formando

3 curvas :
 Curva de Linfocitos
50 a 100 fl.
 Curva de Mononucleares
100 a 150 fl.
 Curva de Granulocitos
150 a 380 fl.
HISTOGRAMAS

La curva normal de plaquetas

es cónica, modal y su tamaño
es 2 a 20 fl.
 HISTOGRAMA DE GLOBULOS
ROJOS
 Izquierda: células microcíticas,
células poiquilocíticas,
esquistocitos, leptocitos,
dacriocitos de registro menor de
60 fl.

 Derecha: células macrocíticas,

ovalocitos, eliptocitos

 Curva Bimodal: existe dos

poblaciones celulares, en
pacientes transfundidos, anemias
una vez iniciado el tratamiento.
 ¿QUÉ SIGNIFICA RDW?
“RDW – ANCHO DE LA DISTRIBUCIÓN DE LA CURVA
DE LOS ERITROCITOS ”

Dos fórmulas matemáticas usadas para

describir la variación de tamaño de los
eritrocitos (Anisocitosis)
 Policromatofilia, Eliptocitos, Esferocitos,
Acantocitos, Hematíes fragmentados, GR en
lágrima, Macroovalocitos, Punteado Basófilo,
Anillos de Cabot, Corpúsculos de Howell-Jolly,
Rouleaux, Parásitos hemáticos, etc.
 Determina la conductividad
interna de la célula
 Consiste en una frecuencia
alta generada por un
oscilador de cristal,
sobrepuesta a la corriente
directa, que incide sobre las
células para medir su
densidad.
Consiste en producir cambios en la dispersión de un rayo de luz
láser, al incidir sobre las células.

Las células dispersan la luz láser con ángulos diferentes que

sumistran información sobre el tamaño, estructura interna,
granularidad y morfología de la superficie de cada cell.
 La información sobre la
dispersión de luz se
presenta en gráficos de
DISPERSOGRAMAS.
 Es utilizado para la
representación gráfica de
los leucocitos, hematíes y
plaquetas.
 Puede definirse como “un proceso, en el cual las
células u otras partículas biológicas son
obligadas a pasar, de una en una, por una
corriente de líquidos a través de un sensor o
sensores que miden sus características. Visualizacion de
datos y capc. de
Colector y análisis
transportador de Sistema de flujo
muestras

Recogida de datos y capac. de

Detector de señal almacenamiento
 SISTEMA FLUÍDRICO - Inyección De La Muestra.
- Cámara De Flujo.
SISTEMA OPTICO - Fuente De Luz
- Detectores
SISTEMA ELECTRICO - Amplificador-convertidor.
- Sistema Informatico
 Cada cell analizada es
representada por un
punto en el grafico de
dispersión. Los puntos
del gráfico son
representados por a
intersección de los ejes X
e Y con la información
correspondiente de los
canales.
Los métodos pueden incluir también:
 Actividad de enzimas celulares como la
peroxidasa. (Citoquímica)
 Fluorescencia
 Análisis digital de la imagen
Son aquellas reacciones químicas que se dan en la
célula para evidenciar las estructuras que la
componen.
 Proporcionan la formula leucocitaria, de
acuerdo con el tamaño de los leucocitos y su
tinción con determinados colorantes.
 Ventaja: En cada espécimen se cuentan muchas
células (unas 10,000), lo que hace que aumente
su precisión.
 Para aumentar la fiabilidad del recuento
diferencial combinan Citometría de flujo con la
Citoquímica.
Miden con un colorante la actividad peroxidasa:
 Alta en eosinófilos,
 Menor positividad en neutrófilos
 Monocitos tienen muy poca actividad y
 Linfocitos no tienen actividad peroxidasa.
 Los eritrocitos se lisan los leucocitos se tiñen por actividad
de la peroxidasa la reacción siguiente es catalizada por la
peroxidasa celular, que convierte el sustrato a un presipitado
oscuro en las células que contienen peroxidasa (neutrófilos,
monocitos y eosinofilos).
 Tincion de Mieloperoxidasa

75°C !SOS!!

reactivos
PEROX

La diferencia
son los
gránulos!!

Por que estaré

tan pálido?
METODO BASO
 Reacción:
El reactivo contiene ácido
ftálico y un surfactante el
cual lisa las células rojas y
destruye las membranas de
las plaquetas y leucocitos,
excepto basófilos.
El reactivo contiene un detergente (surfactante) que hace
esféricos (isovolumétricamente) a los eritrocitos.
También contiene un colorante catiónico, Oxazina 750, que tiñe
las células de acuerdo a su contenido de RNA.
 Reducción de costos para el
laboratorio.
 Ahorro de tiempo.
 Mejora la habilidad del
laboratorio en utilización de
criterio profesional.
 Mejor grado de
reproducibilidad (menor del
1%), en comparación con
las técnicas manuales.
 Condiciones del paciente
 Toma de muestra y
procesamiento
 Interpretación clínica
incorrecta
 Mantenimiento y
calibración constante del
equipo.
 No detectan poiquilocitosis
 No detectan inclusiones eritrocitarias
 Lo que nos presentan los fabricantes son
distintos tipos de alarmas con diversa
sensibilidad, que tienen que ver con el
tamaño celular, línea celular, error
intramétodo y/o de proceso.
 Finalmente, no se debe por ningún
motivo, dejar de realizar el examen
microscópico de las células