PKU incidence

• USA  1 : 13.500 – 21.000

livebirth with PKU
• Europe  1 : 10.000 livebirth
with PKU
• Latin America  1 : 25.000 –
50.000 livebirth with PKU
• Asia  1 : 15.000 livebirth
with PKU
• Africa  very low prevalence
 Standard Diet
IQ

Identifikasi dan
Standard diet Hasil Kognitif menurun Neuropsikologi
treatment sejak minggu
pertama, terus menerus
Neurofisiologi

Diet rendah Protein

keterbelakangan mental
parah berkurang.
Amino acid

Elemen pencegah
kekurangan gizi lain.
Controlled Diet
sapropterin phenylalani
Controlled Diet Pegvaliase
dihydrochloride ne
ammonia
lyase (PAL)

Phenylalanine Dilaporkan adanya

hydroxylase reaksi merugikan
(PAH)

Tidak cocok untuk immune-mediated

Anaphylaxis
terapi tunggal adverse reactions
Gene Therapy dan Enkapsulasi

Gene Therapy Enkapsulasi

Replacing PAH
PAL

Vector

Biaya Tinggi Stabilisasi PAL Formulasi PAL

Immune related Transduksi Sel

Patient dependent
In past …
PAL-expressing E. Coli PKU potential
PKU rat model
therapy

In human???

 Baik untuk mengobati kondisi pencernaan

E.coli Nissle  tidak berkolonisasi di manusia
 tidak tersisa pada feses
In recent … Integration of Phe-
degrading genes into genetic stability
target chromosome

Constructuion and avoidance of antibiotic

characterization resistance genes

inclusion of an Control of gene

SYNB1618 inducible promoter expression
Biotherapeutic
Phe-degrading
Agent for PKU Maintance of
derivative E. coli Nissle
genetic integrity
during high-
density

biomarkers for
Probiotic activity
SYNB1618 activity,

Dose responsiveness
in patient
 Grafik produksi TCA dari EcN Grafik produksi PP dari EcN

Rekayasa berhasil membuat EcN mampu menguraikan phe secara in vitro

PAL
Jalur Degradasi Phe Diekspresikan oleh gen stla
pada EcN
LAAD
Diekspresikan oleh gen pma

Studi in vitro dari engineered EcN

 Rekayasa SYNB1618 Untuk Degradasi Phe

Tidak tepat
E. coli Pertumbuhannya
produksi skala
Nissle rendah
besar

Gen PAL
atau LAAD SYNB1618
Konstruksi dan Regulasi SYNB1618

 Degradasi Phe dilakukan secara anaerobic

 IPTG- and l-arabinose-inducible promoters
Aktivitas promoter Pfnrs-lacZ dalam kondisi aerobic dan anaerobic di
dalam E. coli Nissle.
Aktifitas PAL dan LAAD

Aktifitas LAAD bersifat anaerob

Inducer ara LAAD
Inducer IPTG  PAL
Gambar 3. Penentuan profil dan sirkulasi darah pada
tikus

Gambar 4. Aktivitas dan

kemanjuran in vivo dari
SYNB1618 pada tikus
Pahenu2 / enu2:
pengembangan biomarker
dan kemanjuran in vivo
untuk SYNB1618.
SYNB1618 activity in non-human primates

Aktivitas SYNB1618 pada Non-Human Primata

Respon NHPs terhadap pemberian dosis SYNB1618
Below the lower limit of quantitation (BLLOQ)
 KESIMPULAN
Gen pengkode PAL berhasil ditransformasikan
ke E.coli NissleSYNB1618

SYNB1618 terbukti mampu memetabolisme

Phe menjadi TCA dan HA pada mice

SYNB1618 terbukti mampu memetabolisme

Phe menjadi TCA dan HA pada NHPs