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Luis E.

Rodríguez Pérez
INTRODUCCIÓN
 La fisiología bacteriana comprende el estudio de
las funciones realizadas por estos microorganismos.
 Las bacterias son muy eficientes fisiológicamente,
sintetizan en forma muy rápida sus componentes
celulares, siendo la mayoría autosuficientes a pesar
de su simpleza estructural.
 En la bacteria se desencadenan una serie de
procesos químicos que en conjunto constituyen el
METABOLISMO MICROBIANO
NUTRICIÓN BACTERIANA
 Es el proceso por el que los seres vivos toman del
medio donde habitan las sustancias químicas que
necesitan para crecer (nutrientes) los que se
requieren para:
 Fines energéticos.
 Fines biosintéticos
Nutrientes Bacterianos
 Podemos clasificar los nutrientes en las siguientes
categorías:
1.-Macronutrientes: carbono, hidrógeno, oxígeno
y nitrógeno.
2.-Micronutrientes: fósforo, potasio, azufre,
magnesio.
3.-Vitaminas y hormonas
4.-Elementos traza: zinc, cobre, manganeso,
molibdeno, cobalto.
Requerimientos nutricionales
1. Todas las formas de vida requieren de una
fuente de energía, unos son fotótrofos y otros
quimiótrofos.
2. Todos los organismos vivos, requieren carbono
de alguna forma (ácidos carbónicos, azúcares y
otros carbohidratos).
3. Todos los organismos requieren de nitrógeno, en
forma de sales inorgánicas tales como nitratos,
nitritos.
4. Todos los organismos requieren azufre y fósforo,
el primero suministrado como compuestos
sulfurosos orgánicos y azufre elementario y el
segundo usualmente como fosfato.
5. Todos los organismos vivos requieren varios
elementos metálicos tales como sodio, potasio,
calcio, magnesio, manganeso, hierro, zinc, cobre y
cobalto para un normal crecimiento.
6. Todos los organismos vivos contienen vitaminas y
compuestos parecidos.
7. Todos los organismos vivos requieren agua para
su crecimiento.
PRINCIPALES TIPOS DE NUTRICION BACTERIANA

 FOTOTROFOS:
Fotolitotrofos: Son las que utilizan CO2 como fuente
principal de carbono. (Género Cromatium)
Fotoorganotrofos: Requieren compuestos orgánicos
como fuente de energía (alcoholes, ácidos grasos y
aminoácidos entre otros) (Rhodopseudomonas)
 QUIMIOTROFOS:
Quimiolitotrofas o chemolitotroficas: son aquellas
capaces de oxidar los nitritos a nitratos y fijar
CO2 para cubrir sus necesidades de carbono
(Nitrobacter), o como en el caso de Thiobacillus
thiopories que obtiene energía de la oxidación
de azufre elemental.
Quimioorganotrofas: requieren compuestos
orgánicos para para obtener su energía por
oxidación.
 Las bacterias fotolitotróficas y chemolitotróficas son
generalmente referidas como AUTOTROFICAS
mientras que las bacterias fotoorganotróficas y
quimioorganotróficas son denominadas como
HETEROTROFICAS
 Es toda sustancia o conjunto de sustancia que en
condiciones apropiadas y estéril permite el
transporte, desarrollo o propagación, el
aislamiento y preservación de un microorganismo
bacteriano
LOS MEDIOS DE CULTIVO TIENEN
DIFERENTES UTILIDADES:

- Aislamiento de bacterias presentes en una muestra


- Para investigación e identificación de bacterias
- Para análisis metabólicos y bioquímico de la bacterias
- Estudios culturales para evaluar características de las colonias y
poblaciones bacterianas, según el estado agregativo del medio
- Para realización de estudios de sensibilidad a los antibióticos
(antibiograma)
- Para preservación de bacterias (Cepario)
- Para producción de vacunas bacterianas
- Para producción de toxinas bacterianas
MEDIOS DE CULTIVO. REQUERIMIENTOS
ENERGÉTICOS:
- Fuentes de carbono
- Fuentes de nitrógeno
NO ENERGÉTICOS:
- Fuentes de azufre
- Fuentes de fósforo
- Agua
- Iones metálicos
- Factores de crecimiento
- Factores de arranque
- Factores inhibidores
- Factores solidificantes: agar, gelatina
Componentes del medio cultivo
 Un medio de cultivo debe contener en forma
asimilable un fuente nitrógenada (Proteínas –
peptonas), fuente de carbono (Hidratos de carbono –
lípidos), distintas sales minerales y agua

 En algunos casos debe contener factores de


crecimiento para microorganismos exigentes (Ej.
vitaminas, sangre, extractos de carne o levadura, etc)

 De acuerdo al estado agregativo se puede agregar


agentes solidificantes (agar o gelatina).

 Debe ser estéril, isotónico, poseer propiedades


buffer, un pH óptimo y un potencial óxido reductor
determinado.
MEDIOS DE CULTIVO: CONDICIONES
Las condiciones que ha de cumplir un medio de cultivo para que un
microorganismo crezca son:

* Composición de nutrientes adecuada a las necesidades del


microorganismo

* Condiciones físico-químicas apropiadas:


- Temperatura óptima
- Grado de humedad adecuado
- pH
- Presión osmótica
- Presencia o ausencia de oxígeno
MEDIOS DE CULTIVO: CLASIFICACIÓN
SEGÚN SU COMPOSICIÓN Y ORIGEN:
- Empíricos o naturales
- Sintéticos
- Semisintéticos
- Complejos

SEGÚN SU CARACTERÍSTICAS Y USO:


- Comunes o básicos
- Enriquecidos
- Diferenciales
- Selectivos
- De transporte
MEDIOS DE CULTIVO: CLASIFICACIÓN

SEGÚN SU ESTADO AGREGATIVO:


- Líquidos
- Semisólidos
- Sólidos

Los medios sólidos o semisólidos pueden contener los mismos


ingredientes que los medios líquidos, pero poseen además
agentes solidificantes como agar o gelatina.
MEDIOS DE CULTIVO: CLASIFICACIÓN

Medio sintético: Son los medios que contienen una


composición química definida cuali y cuantitativamente.
Medio mínimo: Son los medios que presentan la minima
cantidad de nutrientes capaz de permitir el desarrollo
de los microorganismos.

Medio complejo: Son medios con nutrientes de


composición química variable o no establecida. Son
mezclas complejas y poco definidas de sustancias. Se
preparan a partir de extractos animales, vegetales, etc.
.
MEDIOS DE CULTIVO: CLASIFICACIÓN

SEGÚN SU PRESENTACIÓN:
- Deshidratados o liofilizados
- Medios preparados
- Medios sólidos en placa de petri
- Medios sólidos en tubo
- Medios líquidos en tubo
- Medios semisólidos en tubo
- Medios de doble fase en frasco
MEDIOS DE CULTIVO: CLASIFICACIÓN

• Medio enriquecido: Medio que se enriquece con


nutrientes y se utiliza para microorganismos
exigentes. Agar sangre . Agar Suero.

• Medio selectivo: Medio que permite el crecimiento


de un grupo de microorganismos e inhibe el
desarrollo de otros. Agar sales-manitol o Chapman
(permite el crecimiento de ciertos Staphylococcus).
 Medio diferencial: Permite revelar
características metabólicas-fisiológicas de los
microorganismos. Agar Mac conkey (permite
visualizar la fermentación de lactosa por viraje
de un indicador de pH).

 Medios de transporte: Se utilizan para el


transporte de muestras biológicas, manteniendo
la viabilidad del microorganismo. Medio de
Stuart, Cary y Blair, Amies y Douglas, etc.
MEDIOS DE CULTIVO: CONDICIONES DE CULTIVO

Cuando se desean cultivar bacterias es


necesario tomar en cuenta los componentes
nutritivos, sales, humedad y las condiciones
físicas como son el pH, el oxígeno, la luz y
la temperatura.
MEDIOS DE CULTIVO: CONDICIONES DE CULTIVO

pH
Una bacteria puede alterar el pH del medio de cultivo como resultado de las
degradación de sustancias producidas por la propia bacteria; por ejemplo:

Utilización de carbohidratos ----> Producción de ácidos orgánicos ---->


Acidificación

Catabolismo de proteínas ----> Producción de materiales nitrogenados ---->


Alcalinización

Estos cambios pueden inhibir el crecimiento de la bacteria. Estos cambios se


pueden controlar mediante sistemas tampón. Uno de los más utilizados en
microbiología es la combinación de KH2PO4 y K2HPO4 tamponando el medio a
un pH de próximo a 6,8.
MEDIOS DE CULTIVO: CONDICIONES DE CULTIVO

O2
Las bacterias en su conjunto presentan una respuesta variable al
oxígeno libre clasificándose en cinco grupos:
Aerobias: Bacterias que crecen en presencia de oxígeno libre.
Anaerobias: Bacterias que crecen en ausencia de oxígeno libre.
Anaerobias facultativas: Bacterias que crecen en presencia
como en ausencia de oxígeno libre.
Aerotolerantes: Son bacterias que pueden tolerar o soportar el
oxígeno y crecer en su presencia aún cuando no lo utilizan.
Microaerófilas: Bacterias que crecen en presencia de pequeñas
cantidades de oxígeno libre.
MEDIOS DE CULTIVO
CONDICIONES DE CULTIVO

Suministro de luz

Los organismos fotosintéticos deberán ser


expuestos a una fuente de iluminación ya que la
luz es su fuente de energía.
CONDICIONES DE CULTIVO: TEMPERATURA

Cada bacteria tiene una temperatura óptima de


crecimiento clasificándose en los siguientes grupos:

Psicrófilas: Desarrollan a 0° C o menos. Su temperatura


óptima es alrededor de los 15° C.
Mesófilas: Crecen mejor entre 25 y 40° C.
Termófilas: Crecen mejor entre 50 y 75° C dentro de este
grupo las Hipertermófilas: Crecen próximas a 100 ° C.
MEDIOS DE CULTIVO SÓLIDOS EN
PLACA DE PETRI
AGAR SANGRE EN PLACA DE PETRI
MEDIOS DE CULTIVO

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