PENDAHULUAN ■ Transfusi darah adalah proses pemindahan darah dari seseorang yang sehat (donor) ke orang sakit ( Resipient ). ■ Darah yang dipindahkan dapat berupa darah yang lengkap dan komponen darah. ■ Guna transfusi darah antara Lain : ❤ Mengatasi keadaan gawat darurat ( Live saving ) ❤ Pengobatan penunjang ( supportive treatment ) ❤ Pengobatan pencegahan ( preventive treatment ) Persiapan Alat, Bahan, Reagensia Dan Sampel ■ Persiapan pendahuluan . ☑ Formulir Permintaan Darah ,yang wajib di tanda tangani oleh dokter yang merawat pasien, dan harus dilengkapi dengan informasi sebagai berikut : Tanggal permintaan, Nama lengkap Pasien , Tanggal Lahir atau usia , Jenis kelamin , nomor register dari RS, Ruang rawat atau bangsal , Alamat pasien , Diagnosis pasien , Golongan darah apabila sudah diketahui , Keberadaan setiap antibodi apabila sudah diketahui , Riwayat Transfusi sebelumnya , riwayat reaksi transfusi , Jumlah ◼ Contoh formulir permintaan darah ◼Contoh lembar kerja bank darah Penyimpanan sampel darah , Pendataan , dan Pemeriksaan Pre Transfusi ■ Sampel darah pasien dan donor harus ditutup dan disimpan dengan baik pada suhu 2 – 6 0C minimal 2 hari sesudah transfusi , bertujuan untuk pemeriksaan ulang apabila ada laporan terjadinya reaksi transfuse
■ Setiap permintaan darah dan pemeriksaan darah harus ada
pendataan yang lengkap ,agar dapat dilakukan penelusuran kembali jika diperlukan
■ Pemeriksaan pre transfusi pada sampel darah donor dan pasien
yang meliputi pemeriksaan golongan darah ABO & Rhesus ,Crossmatch, Coombs Test, skrining dan identifikasi antibodi • Persiapan Alat Untuk Pemeriksaan Immunohematologi / Pre Transfusi ■ Sentrifuge untuk pemisahan darah menggunakan tabung reaksi ( table top – sentrifuge ) ■ Sentrifuge untuk pemeriksaan golongan darah metode tabung ( serological centrifuge ) ■ Incubator 37 ̊c ( waterbath / dry incubation ) ■ Incubator 37 ̊c untuk pemeriksaan gel test ■ Lemari Es ( refrigerator ) ■ Tabung reaksi ukuran 12 x 7,5 mm ■ Rak tabung reaksi Persiapan Alat Untuk Pemeriksaan Immunohematologi / Pre Transfusi (lanjutan ) ■ Pipet pasteur plastik ■ Blood Grouping Plate (BGP) ■ Coombs Test Gel ■ Pipet adjustable ukuran 200- 1000 ul ■ Pipet adjustable ukuran 5-50 ul ■ Tissue ■ Objek Glass ■ Mikroskop ■ Tips Kuning Persiapan Alat Untuk Pemeriksaan Immunohematologi / Pre Transfusi (lanjutan ) ■ Tips Biru ■ Label ■ Spidol permanen ■ Kontaiber ( wadah penampung ) ■ Sarung Tangan ■ Masker ■ Jas Laboratorium ■ Gunting Stainless ■ Kantung Plastik Limbah Persiapan REAGENSIA Bahan Yang dibutuhkan untuk pemeriksaan Immunohematologi / pre transfusi adalah : ■ Sample darah pasien dan sampel darah donor ■ Anti – A, Anti – B, Anti – D IgM, Anti – D IgG ■ Bovine albumin 2,2 % dan 8 % ■ Anti Human Globulin / Serum coombs ■ Larutan saline ( 0.9 % ) ■ Aquabidest ■ Larutan alseiver ■ Low ionic Strenght Saline ( LISS ) ; Larutan garam faali 0,2 % dan larutan sukrosa 7 % ■ Desinfektan ( hipoklorit 0,5 % ) & Detergent PERSIAPAN SAMPEL Preparasi contoh darah harus dilakukan sebelum melakukan pemeriksaan lebih lanjut untuk men- Dapatkan hasil pemeriksaan yang optimal , beberapa hal yang harus diperhatikan dalam persiapan sampel adalah : ■Pemisahan serum / plasma dari sel darah ,Tujuannya untuk memisahkan serum atau plasma dari sel sel darah , ■Kegunaannya adalah sebagai persiapan pembuatan suspensi darah & persiapan penentuan antigen golongan darah PERSIAPAN SAMPEL 1. Siapkan contoh darah dengan antikoagulans EDTA dalam tabung 2. Sentrifuge darah dalam tabung dengan kecepatan 3000 rpm selama 2 menit 3. Siapkan 1 tabung yang bersih untuk menampung plasma 4. Pisahkan plasma sebanyak banyaknya dari sel darah pekat dan masukkan ke dalam tabung yang sudah disiapkan 5. Beri identitas pada masing – masing tabung sel darah merah pekat dan plasma PERSIAPAN SAMPEL ( lanjutan ) ■ Pencucian sel darah merah Prinsip : Dengan penambahan larutan saline ( NaCl 0.9 % ) dan pemutaran maka antibodi di sekitar sel darah merah akan hilang Tujuannya : ~ Untuk menghilangkan sisa protein pada sel darah merah ~ Menghilangkan sel sel darah yang rapuh ~ Menghilangkan auto cold antibodi ~ Menghilangkan formasi Rouleaux Kegunaannya adalah sebagai persiapan pembuatan suspensi darah & persiapan penentuan golongan darah PERSIAPAN SAMPEL ( lanjutan ) ■ Cara kerja pencucian sel darah merah adalah sebagai berikut : i. Lakukan pencucian sel darah merah pekat dengan mengambil 8 tetes dan masukkan ke dalam tabung reaksi 12 x 75 mm ii. Tambahkan NaCl 0,9 % ( saline ) sebanyak kurang lebih 4,5 ml atau sampai ¾ tabung ke dalam sel darah merah pekat tadi iii. Tutup tabung dengan parafilm,kocok dengan perlahan agar larutan menjadi homogen iv. Sentrifuge dengan kecepatan 3000 rpm selama 2 menit v. Buka penutup parafilm dan buang supernatant dengan menggunakan pipet ( pencucian ke 2) vi. Lakukan pencucian sebanyak 3 kali dengan mengulangi langkah tadi diatas vii. Sel darah merah yang sudah dicuci merupakan suspensi 100 % PEMBUATAN SUSPENSI SEL DARAH MERAH ◼Skema pemisahan komponen darah dari whole blood Berikut adalah gambar alat – alat dan reaagent yang digunakan dalam pemeriksaan immunohematologi / pre transfusi ◼refrigerator ◼Plasma thawing ◼ID centrifuge ◼ID. Incubator ◼tabung reaksi ◼Tube Sealer ◼ Kuvet croosmatch ◼plate paper ◼Agregator platelet ◼ Safety box