Enterobacteriaceae
1
Enterobacteriaceae
más de 15 diferentes géneros
Escherichia
Shigella
Edwardsiella
Salmonella
Citrobacter
Klebsiella
Enterobacter
Hafnia
Serratia
2
Enterobacteriaceae
Proteus
Providencia
Morganella
Yersinia
Erwinia
Pectinobacterium
3
Enterobacteriaceae
Morfología y características generales
Bacilos Gram-negativo
No esporo-formadores
Oxidasa-negativo
Fermentan glucosa y pueden o no producir
gas en el proceso (aerogénicos vs
anaerogénicos)
Reducen los nitratos a nitritos
4
Bacilos Gram (-)
5
Enterobacteriaceae
Anaerobios facultativos
Algunos móviles:
• Flagelos peritricos
Muchos son habitantes normales del tracto
intestinal del hombre (y de otros animales)
Patógenos
• Entéricos
• Urinarios
• Respiratorios
• Relacionados con enf. Reumática
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Enfermedades Oportunistas
– septicemia
– neumonía
– meningitis
– Infecciones del tracto
urinario •Citrobacter
•Enterobacter
•Escherichia
•Hafnia
•Morganella
•Providencia
•Serratia 7
Enterobacteriaceae
Enfermedades gastrointestinales
– Escherichia coli
– Salmonella
– Shigella
– Yersinia enterocolitica
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Enfermedades asociadas al
Síndrome de Reiter
– Enterobacteriaceae
*Salmonella
*Shigella – No-Enterobacteriaceae
*Yersinia *Campylobacter
*Chlamydia
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Enterobacteriaceae
•Adquiridas en la comunidad
•Personas sanas
– Klebsiella pneumoniae
* enfermedad respiratoria
* prominente cápsula
–Infección urinaria
– contaminación fecal
*E. coli
*Proteus
– ureasa (degrada la urea)
– orina alcalina
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Enterobacteriaceae: cultivo
Crecen bien en distintos medios de cultivo
selectivos y diferenciales.
La mayoría de medios selectivos tienen sales
biliares y colorantes que inhiben el crecimiento
de Gram positivos y pueden suprimir el
crecimiento de especies no patógenas de la
familia de Enterobacteriaceae.
Muchos son diferenciales en base a la
fermentación de lactosa y/o producción de H2S.
11
Enterobacteriaceae
En agar sangre todas producen colonias
similares, relativamente grandes y grisáceas.
Pueden ser o no hemolíticas.
Los tres medios más útiles para identificar
potenciales patógenos son: agar TSI, LIA, y
urea o agar fenilalanina.
La estructura antigénica es usada para
diferenciar a organismos dentro de un género
o especie. Tres son los más importantes.
12
Crecimiento en MacConkey
13
Reacciones en TSI
TSI =
TRIPLE
AZUCAR Y
HIERRO
Fermentación
de la glucosa,
sacarosa y
lactosa
14
Kligler: posibles resultados
15
Reacciones en LIA
Descarboxilación o desaminación de la lisina
16
Reacciones en LIA
17
Prueba de Indol (SIM)
18
Prueba de Ureasa
19
Prueba de Citrato
20
Prueba de movilidad, indol y
descarboxilación de la ornitina (MIO)
21
Enterobacteriaceae
Antígenos somáticos O
• Parte polisacárida termoestable del LPS.
• La variación de colonias lisas a rugosas se
acompaña de una pérdida progresiva del Ag O.
Antígenos flagelares H
• Son termolábiles
Antígenos de la envoltura o cápsula K
• Recubre al O y puede bloquear la aglutinación con
antisueros O específicos.
• Ebullición por 15 minutos destruye a K y
desenmascara los antígenos O.
• El Ag K es llamado Vi (virulencia) en Salmonella.
22
Estructura antigénica de las
Enterobacteriaceae
23
Aglutinación
24
Enterobacteriaceae
Escherichia coli
Habitante normal del tracto G.I.
Algunas cepas causan diversas formas
de gastroenteritis.
Es causa principal de infección urinaria
y meningitis neonatal y septicemia.
Puede presentar cápsula.
Bioquímica
• La mayoría es móvil.
25
Infección urinaria ascendente
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Escherichia coli
• Puede ser hemolítica en Agar Sangre
Especialmente en cepas patogénicas\
• Pruebas clave para la cepa normal:
TSI es A/A + gas
LIA K/K
Urea –
Indol +
Citrato –
Movilidad +
• Hay un biotipo que es anaerogénico,
lactosa (-) e inmóvil.
27
Escherichia coli
28
TSI
E. coli
A/A
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E. coli ETEC
Factores de Virulencia
Toxinas
• Enterotoxinas
• PRODUCIDAS POR CEPAS
ENTEROTOXIGENICAS DE E. coli (ETEC).
• Causa movimiento de agua y iones de los
tejidos al intestino resultando en diarrea acuosa.
• Tipos de enterotoxina:
LT – termo lábil
ST – termo estable
• Diarrea del viajero
• Parecida al cólera (más leve) 30
Toxinas de E. coli
LT – Toxina termolábil
• se une a gangliósidos Gm1 sobre las células
epitelialesdel intestino delgado donde se estimula la
adenilato ciclasa para aumentar la producción de
cAMP.
• El cAMP aumentado altera la actividad de los
transportadores de sodio y cloro, produciendo un
desbalance que resulta en transporte de fluido hacia
el intestino.
ST – Toxina termo estable
• se une a receptores que estimulan la producción de
cGMP con los mismos resultados que la LT.
Ambas enterotoxinas están compuestas por cinco
subunidades beta (para unirse) y una subunidad alfa
(que tiene la actividad enzimática tóxica).
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E. coli enterotoxigénica
LT
• Parecida a la colerigénica
Adenil ciclasa activada
AMP cíclico
secreción agua/iones
ST
Guanilato ciclasa activada
cGMP
Captación de agua/iones 32
Actividad de LT vs ST
33
E. coli enteroinvasiva (EIEC )
• Disentería
- Parecida a la shigelosis
Lumen intestinal
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Escherichia coli (EPEC)
• E. coli ENTEROPATOGENA
• Muy parecida a Shigella
– Genéticamente muy
similares
– Patogenia muy parecida
35
EPEC
Destrucción de los microvellos de la superficie
Lumen intestinal
• fiebre
• diarrea
• vómitos
• náusea
• heces sin sangre
36
EPEC
37
E. coli enterohemorrágica (EHEC)
• O157:H7
38
Transmisión
alimentos contaminados
(carne y vegetales)
Hemorrágica
Diarrea sanguinolenta y copiosa
Pocos leucocitos
Afebril
Fallo renal
39
E. coli Enterohemorrágica
• Toxina Vero
– “shiga-like”
• Hemolisinas
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E. Coli EAEC
Toxina parecida a la ST
Enteroagregativa toxina ST-like
• Unida a la célula
• Secretada
Lisan eritrocitos y leucocitos y ayudan a
manosa
galactosa
– glucolípidos
– glucoproteínas
43
Varios tipos de E. coli
44
BFP
EPEC
EPEC
EPEC
45
Resumen de las cepas de E.coli
que causan gastroenteritis.
46
Tratamiento de la enfermedad
gastrointestinal
Reemplazo de líquidos
Antibióticos
no usados usualmente a menos que
sea sistémica
• ej: Síndrome urémico hemolítico
47
Shigella
S.flexneri, S. boydii, S. sonnei,
S. dysenteriae
Causa de: disentería bacilar
shigelosis
• Heces sanguinolentas
• Dolor intestinal
• Pus (leucocitos en heces)
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Especies de Shigella
• S. dysenteriae (Grupo A)
• S. flexneri (B)
• S. boydii (C)
• S. sonnei (D)
Bioquímica
• TSI K/A sin gas
• LIA K/A
• Urea –
• Movilidad ( - )
• Todas fermentan manitol excepto S. dysenteriae
• S. sonnei puede fermentar tardíamente la lactosa.
49
Bioquímica de Shigella spp
50
Shigelosis
2-3 días
Daño a la célula epitelial
Lumen intestinal
51
Toxina Shiga
enterotóxica
citotóxica
Inhibe la síntesis de proteína
Lisando al rARN 28S
52
Shigelosis
Únicoreservorio: hombre
Mayormente en niños pequeños
53
Shigella spp
Estructura Antigénica
• Distinción en grupos (A, B, C y D) basada en el
antígeno O.
Factores de Virulencia
• Toxina Shiga–
Producida por S. dysenteriae
S. flexneri y S. sonnei la producen en pequeñas
cantidades
Inhibe la síntesis proteica inactivando la subunidad
ribosomal 60S
Esto juega un papel en la ulceración de la mucosa
intestinal.
54
Adhesión y penetración de
Shigella
55
Tratamiento
Manejode la deshidratación
Respuesta a antibióticos
Disminuye la duración de la
enfermedad
• Sulfonamidas
• Tetraciclina, Ampicilina y Cloranfenicol
• Cepas resistentes están en aumento
• Tests de susceptibilidad son requeridos
56
Salmonella spp
2000"tipos” antigénicos
Genéticamente: especie única
S. enteritica
Categoría por enfermedad
S. enteritidis
muchos serotipos
S. cholerae-suis
S. typhi
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Salmonelosis
S. enteritidis
Infección común por salmonela
Pollo y huevos.
Reservorio: no humano
Gastroenteritis
• nausea
• vomitos
• Heces sin sangre
• autolimitante (2 - 5 días)
58
Salmonelosis
lumen intestinal
59
S. cholerae-suis
Mucho menos común
Septicemia
Esencial Tx antibiótico
60
Salmonella
Una especie: S. enteritica
7 subespecies: 1, 2 ,3a ,3b ,4 ,5, and 6.
Subgrupo 1 causa la mayoría de
infecciones humanas
Serotipos (clasificación de Kauffman-
White)
Basada en antígenos O y H
Antisueros clasifican grupos A, B, C1, C2, D y
E
Salmonella typhi tiene antígeno Vi capsular
61
Salmonella
Bioquímica
TSI K/A + gas
H2S:
• S. typhi produce poca cantidad (sin gas)
• S. paratyphi A no produce H2S
S typhi da LIA K/K con H2S
S. paratyphi A da resultados K/A
Urea –
Movilidad +
Citrato +/-
Indol -
Factores de virulencia
Endotoxina
Cápsula
Adhesinas – tanto fimbrial como no fimbrial
62
63
Invasión por Salmonella
64
Fiebre tifoidea
Diagnóstico
Hemocultivos (1a y 2a semanas)
Coprocultivos y a veces urocultivos positivos después
de la segunda semana
Prueba de Widal: anticuerpos contra Salmonella
typhi.
10% de los infectados se convierten en portadores a
corto plazo y un porcentaje menor es portador a largo
plazo, por la persistencia de las bacterias en la
vescícula o en la vejiga urinaria.
65
Tratamiento
Terapia Antimicrobiana
Fiebre entérica
• Cloranfenicol
• Cepas resistentes requieren estudio de
susceptibilidad.
Gastroenteritis
• Usualmente no requiere antimicrobianos
• Reemplazo de líquidos y electrolitos
Comparación de la invasión por
Salmonella vs Shigella
67
Otras Enterobacteriaceae
Citrobacter
TSI K/A o A/A gas + y H2S +
LIA K/A H2S +
Citrato +
Urea usualmente +
Movilidad +
Patógeno oportunista
Causa infección urinaria, respiratoria, de
heridas, osteomielitis, endocarditis y
meningitis.
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Enterobacteriaceae
Edwardsiella tarda
TSI K/A gas + y H2S +
LIA K/K H2S +
Urea –
Citrato –
Indol +
Significado clínico
• Enf. GI en países tropicales y subtropicales
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Enterobacteriaceae
Klebsiella
FN del tracto gastrointestinal, pero patógeno
potencial en otras áreas
TSI A/A + gas
LIA K/K
Urea +
Citrato +
MR-, VP+
Movilidad -
Tiene antígenos O y K
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Klebsiella
Factores de virulencia
• Cápsula
• Adhesinas
• Quelinas
Significancia clínica
• Causa neumonía (inmunocomprometidos)
• Daño permanente al pulmón
• Causa importante de septicemia y
meningitis nosocomial
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Enterobacter sp
FN del tracto GI
TSI, LIA y urea variables
Citrato +
Significancia Clínica
• Infección nosocomial
• Bacteremia en pacientes quemados
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Serratia sp
Saprófito de vida libre
TSI A/A o K/A; gas +/- (no fermenta lactosa)
LIA usualmente K/K
Citrato +
Movilidad +
Urea +/-
Encontrada en infecciones del TR y GU
Resistente a muchos antimicrobianos
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Enterobacteriaceae
Proteus, Providencia, and Morganella
Todos parte de la FN del tracto GI (excepto
Providencia).
Movilidad +
Proteus: “swarming”
Desaminación de la Lisina + (LIA R/A)
Urea +
TSI variable
Indol + (solamente P. mirabilis es negativo)
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75
Proteus sp
76
Proteus, Providencia y
Morganella
Factores de virulencia
• Ureasa – el amoniaco producido daña
a la célula epitelial del tracto urinario
Significancia clínica
• Infecciones del TU, neumonía,
septicemia, e infección de heridas
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78