Anda di halaman 1dari 25

BIOASSAY

oleh
Lilik Zakiyaturrodliyah 120332400218
Mukhamad Syaifudin 120332400227
Nanda Ratih Nilamsari 120332421499
Paul Ehrlich

• Sejarah bioassay

Bermula pada akhir abad ke-19 Paul Ehrlich meneliti


standarisasai antitoksin difteria, sejak saat itu bioassay tidak
hanya digunakan dalam farmapologi, namun juga digunakan
pada cabang scince yang lain, seperti patologi tumbuhan.
• Bioassay adalah sebuah metode
yang dirancang untuk
menganalisis suatu senyawa oleh
Pengertian Bioassay dosis yang sesuai terhadap sistem
biologi seperti binatang, jaringan,
mikroba dll
• Membandingkan sampel yang
diuji dengan zat standar
internasional dengan perlakuan
yang sama.
Prinsip Bioassay • Menentukan jumlah sampel uji
yang diperlukan untuk mengukur
respon biologis yang setara
dengan substansi standar.
• Bioassay secara khusus melibatkan
stimulus/rangsangan (misalnya Vitamin
Struktur of a biological B, obat-obatan, atau pestisida) yang di
assay aplikasikan terhadap subjek/sampel
(misalnya, hewan, tumbuhan, atau
mikroba).
• Intensitas yang dipakai dalam
mengetahui efektifitas rangsangan
biasanya digunakan istilah “Dosis”
Sumber : Gutleb_et_al_2004_8th_OSG_Proc-1
• Bioassay kontak langsung
(residu)

• Bioassay kontak tidak langsung


Macam-macam
bioassay
(air bioassay) (residu)

• Bioassay untuk pengasapan


(fogging/ULV)
• Merupakan uji dosis standart dan uji
preparasi untuk menghasilkan respon
yang spesifik, dan dapat diukur secara
langsung. Perbandingan antara dosis
Bioassay langsung
estimasi dari uji preparasi relatif standar

• Misalnya :

• Serangan jantung Digitalis yang


diinduksi pada marmut , dosis diukur
ketika senyawa diinjeksikan,
menyebabkan jantung berhenti
(menyebabkan kematian)
• Merupakan hubungan antara
dosis dan respon pada persiapan
yang dipastikan. Dosis yang
Bioassay tidak
langsung diberikan disesuaikan terhadap
respon yang dihasilkan dari
hubungan terhadap masing-
masing preparasi secara terpisah
Prinsipnya adalah pengukuran efektivitas
dari pengasapan / fogging atau penyemprotan
Bioassay untuk ULV.
pengasapan
(fogging/ULV) Misalnya :

Nyamuk dalam kurungan dapat diletakkan dalam


ruangan lalu disemprot, atau digantung pada
jarak tertentu ( didalam atau diluar ruangan ) dari
tempat penyemprotan lalu disemprot. Waktu
pemaparan 1 jam, tiap 15 menit/selama
pemaparan dihitung nyamuk yang pingsan.
• 1. Graded Response Assay

Metode bioassay

• 2. End Point or Quantal Assay


• Dalam metode ini, jika dosis
ditingkatkan, maka Respon juga
Graded Response
Assay akan meningkat, dan akhirnya
mencapai tingkat yang stabil
yang disebut celling effect
• Memunculkan respon 'Semua
atau Tidak' pada hewan yang
berbeda
Misalnya.
End Point or Quantal Serangan jantung Digitalis diinduksi
Assay pada marmut
kejang hipoglikemik pada tikus.
Digitalis diinduksi penurunan kepala
pada kelinci
Perhitungan LD50 pada tikus atau
tikus
1. Teknik in vivo
Teknik bioassay 2. Teknik in vitro
3. Teknik ex vivo
• Teknik ini menggunakan hewan
hidup yang direkomendasikan untuk
tujuan uji. Teknik ini bertujuan
untuk mempelajari pengaruh
1. Teknik in vivo biologis atau respon dari senyawa di
bawah pemeriksaan dalam sistem
hidup secara langsung.
• misalnya: Dengan menggunakan
tikus, kelinci dll
• Teknik ini menggunakan kultur sel
sistem biologi yang dianjurkan untuk
mempelajari pengaruh senyawa pada
kondisi standar yang tidak mirip
2. Teknik in vitro dengan lingkungan hidup. Di sini kultur
sel bertahan dengan pemanfaatan
nutrisi di media.
• misalnya: penggunaan sel induk, kultur
sel, mikroba (bakteri) dll
• Teknik ini menggunakan jaringan
atau sel-sel dari sistem kehidupan
dianjurkan untuk mempelajari
pengaruh senyawa yang diuji dalam
3. Teknik ex vivo
kondisi yang sesuai dalam waktu
yang ditentukan terhadap
kelangsungan hidup organ luar
tubuh
Penggunaan Bioassay

Penggambaran dari transkripsi gen dapat diukur oleh adanya kontaminasi yang
menyertainya. Dalam hal ini aktivitas dari Ah-receptor tergantung pada aktivitas
gen. Sehingga dapat dilakukan analisis dengan mengukur cahaya yang diberikan
setelah penambahan luciferin. Biasanya untuk kebutuhan analisis digunakan
Microplate Fluoroscein Reader
Aplikasi
• 1. bioassay tidak hanya membantu
untuk menentukan konsentrasi, tetapi juga
dapat menentukan potensi sampel. (Potensi
Kelebihan adalah istilah yang menunjukkan aktivitas
senyawa per basis molekul. Yaitu jika
senyawa menunjukkan aktivitas yang lebih
baik pada konsentrasi menit, semakin besar
potensi, dan jika aktivitasnya rendah pada
konsentrasi yang lebih rendah, maka lebih
rendah pula populasinya).
• 2. bioassay digunakan untuk
standarisasi obat-obatan, vaksin,
kelebihan
toksin atau racun, desinfektan,
antiseptik dll.
3. Membantu menentukan kekhususan
suatu senyawa yang akan digunakan
misalnya: Penisilin, Penisilin efektif
kelebihan terhadap Gram ve tapi tidak pada
Gram-ve.Pengujian pasien yang
terinfeksi sputum membantu
menentukan anti-biotik yang diberikan
untuk pemulihan cepat.
• 4. senyawa kompleks tertentu seperti
vitamin B-12 yang tidak dapat dianalisis
kelebihan dengan teknik uji sederhana dapat efektif
jika diperkirakan oleh Bioassays.

• 5. Kadang-kadang komposisi kimia sampel


berbeda tetapi memiliki aktivitas biologis
yang sama.

Sumber : bioassay_2
• Video 1

• Video 2