Anda di halaman 1dari 17

Kelompok 2

Fitriani J 18 3145 353 047


Sebastiana Elsye Teniwut 18 3145 353 048
Muhammad Fatwa Syahputra 18 3145 353 049
Sipra Aprilla Sidabutar 18 3145 353 052
Ananda sakiyyah S 18 3145 353 050
Juli Saputri 18 3145 353 081
Jems resimanuk 18 3145 353 051
PENGERTIAN UJI KUALITATIF DAN
KUANTITATIF

Uji kualitatif yaitu pekerjaan yang


Uji bertujuan untuk menyelidiki dan
mengetahui kandungan senyawa-
Kualitatif senyawa yang terdapat dalam suatu
sampel uji.

Uji kuantitatif ialah pekerjaan yang


dilakukan untuk untuk mengetahui
Uji
kadar suatu senyawa dalam sampel,
Kuantitatif dapat berupa satuan mol, ataupun
persentase dalam gram.
PENGETIAN DNA DAN RNA

1. Pengertian DNA

DNA atau Asam Ribonukleat adalah materi yang membentuk


kromosom-kromosom yang menyimpan informasi genetik dalam
tubuh makhluk hidup DNA memiliki asam nukleat yang terdiri dari
polinukleotida dari unit-unit dioknuklotida yang unit-unit
pembangunnyadioksinukleot. Informasi genetik umumnya
merupakan kumpulan perintah yang mengatur sel untuk melakukan
sesuatu. DNA dalam bahasa inggris disebut deoxyribonucleic acid,
sedangkan dalam bahasa Indonesia disebut Asam Deoksiribosa
Nukleat. Susunan kimia dari DNA adalah polimer yang dari rantai
panjang nukleotida.
2. Pengetian RNA

RNA (Asam Ribonukleat) adalah polimer yang tersusun dari


sejumlah neuklotida dimana satu neuklotida terdiri dari satu
gugus fosfat, satu gugus gula ribosa, dan satu gugus basa
nitrogen (N). RNA memiliki asam nukleat yang terdiri dari
polinukleotida dari unit-unit mononukleotida. Polimer RNA
tersusun dari ikatan yang berselang-seling antara gugus
fosfatsatu nukleotida dengan gugus gula ribosa dan nukleotida
yang lain.
ISOLASI KUALITATUF DAN KUANTITATIF DARI RNA
DAN DNA SUBYEK DIABETIK DAN PREDIABETIK

Untuk melakukan uji kualititatif dan kuantitatif


sebelumnya kita harus melakukan isolasi terhadap sampel yang
akan kita gunankan. Seperti kasus yang terungkap dalam jurnal
yang kami bedah, RNA dan DNA diisolasi dari sampel darah
berbagai subjek Diabetes, prediabetes dan sehat individu.
Seluruh DNA / RNA yang telah diekstraksi ditemukan berbeda
dalam molekulnya berat dan dilihat sebagai pita terpisah bila
dilihat di bawah sinar UV. Konsentrasi RNA dan DNA
diperkirakan dengan menggunakan spektrofotometer Nanodrop
8000.
Konsentrasi subjek sehat RNA dan DNA ditemukan lebih
dari Diabetic dan prediabetic rasio absorbansi mereka pada 260
dan 280 nm, adalah 2,01 yang menunjukkan kemurnian dalam
sampel. Konsentrasi RNA dan DNA dalam mata pelajaran
Prediabetic dan rasio ditemukan 1,89 menunjukkan adanya
kontaminasi. RNA dan DNA yang diisolasi dari Diabetic
memiliki rasio 1,97 yang juga menunjukkan sedikit kontaminasi.
Seluruh DNA / RNA yang telah diekstraksi ditemukan berbeda
dalam molekulnya berat dan dilihat sebagai pita terpisah bila
dilihat di bawah sinar UV.
Perbandingan sistematis dari genomika
hewan yang berbeda memberikan
kesempatan untuk mengidentifikasi dasar
genetik untuk keanekaragaman. Ada bukti
yang mengakatan bahwa DNA menentukan
asam amino, tetapi apakah secara langsung
berpartisipasi sintesis protein?
Nah ternyata…

DNA tidak terlibat langsung dalam Sintesis Protein. Itu


ditunjukkan pada tahun 1940 oleh Brachet dan Caspersson bahwa
jumlah sintesis protein berkorelasi langsung dengan jumlah RNA
seluler, dan bahwa RNA dan DNA hadir dalam sitoplasma dan
nukleus. Itu Keterlibatan RNA dalam sintesis protein lebih
langsung ditunjukkan dengan merawat sel-sel dengan ribonuc
menurunkan hadir RNA dan DNA dalam sel.
Asam Ribonukleat adalah suatu makromolekul
hampir universal digunakan untuk mempelajarinya
faktor transkripsi. Metode biologi molekuler tergantung
pada pemahaman tentang sifat-sifat biologis
makromolekul sel hidup adalah yang luar biasa entitas
rumit menghasilkan ribuan berbeda makromolekul dan
menyimpan genom. Prinsip di balik pemisahan
makromolekul yang ada dalam sel adalah untuk
bebaskan dari komponen seluler lainnya.
Metode yang digunakan untuk mengisolasi makromolekul
(RNA) tergantung pada sumber, umur dan ukuran sampel.
Isolasi RNA dan DNA adalah diperlukan untuk analisis genetik,
yang digunakan untuk ilmiah, tujuan medis atau forensik.
Ilmuwan menggunakan RNA dan DNA aplikasi, seperti
pengenalan RNA dan DNA ke dalam pengkodean sintesis
protein dalam sel, hewan atau tumbuhan, atau untuk diagnostik
tujuan.
Saat ini kesepakatan belajar dengan pendekatan modern untuk
mengembangkan sederhana studi isolasi RNA dan DNA, kuantifikasi
dan kualitatif mereka estimasi RNA dan DNA diekstraksi dari
berbagai subyek untuk studi biologi molekuler subyek diabetes dan
pradiabetes dan untuk berkorelasi dengan aspek metabolisme pada
penyakit tersebut.
Metode yang digunakan untuk mengisolasi makromolekul
(RNA) tergantung pada sumber, umur dan ukuran sampel. Isolasi
RNA dan DNA adalah diperlukan untuk analisis genetik, yang
digunakan untuk ilmiah, tujuan medis atau forensik. Ilmuwan
menggunakan RNA dan DNA dalam angka aplikasi, seperti
pengenalan RNA ke dalam pengkodean sintesis protein dalam sel,
hewan atau tumbuhan, atau untuk diagnostik tujuan.
Reagen dan bahan kimia:
Phenol dalam buffer jenuh 380ml, Guanidine tiosianat 94,53 g,
Amonium tiosianat 76,12 Fenol dalam buffer jenuh 380ml, Guanidine
tiosianat 94,53 g, Amonium tiosianat 76,12 g, Sodium asetat, pH 5,0,
33,4 ml stok 3M, Gliserol 50 ml, DEPC untuk menyesuaikan volume
akhir menjadi 1L (disebutkan di atas g, Sodium asetat, pH 5,0, 33,4 ml
stok 3M, Gliserol 50 ml, DEPC untuk menyesuaikan volume akhir
menjadi 1L (bahan kimia yang disebutkan di atas digunakan dalam
Metode Trizol untuk isolasi RNA). 0,8 juta natrium sitrat / 1,2 M
NaCl, Isopropanol, Kloroform, 75% etanol disiapkan dengan DEPC –
Water, RNase Inhibitor. 1% Formaldehyde Denaturing Agarose Gel
(untuk Pemeriksaan Kualitas), Nanodrop 8000 Spectrophotometer
(untuk pemeriksaan Kuantitas).
Estimasi kualitatif RNA: formaldehyde 1% elektroforesis gel
agarosa didenaturasi digunakan untuk memisahkan Fragmen
RNA. Sampel dicampur dengan etidium bromida, pewarna
marker dan kemudian dimuat dengan baik dalam agarosa
yang kemudian disimpan dalam posisi di elektroforesis ruang
diisi dengan buffer dan arus diterapkan. (Gambar 1). Ketika
pewarna marker mendekati ujung gel, maka arus dihentikan
dan dilihat di bawah sinar ultra violet
Estimasi Kuantitatif dari kemurnian RNA: Larutkan Asam
ribonucliec dalam larutan 5 mM NaOH untuk mempersiapkan
standar larutan. Campurkan larutan RNA dengan volume yang
sama dengan 1 N asam perklorat dan panaskan selama 15
menit. di 70 0 C. Ukur absorbansi pada 260nm dan 280nm
menggunakan Nanodrop 8000 spektrofotometer dengan
konsentrasi RNA standar yang berbeda solusi petak grafik
atau kurva standar. Biasanya, si absorbansi diukur pada 260
nm di mana panjang gelombang absorbansi A 260 dari 1.0
sesuai dengan 50 μg ambil yang kecil volume ekstrak RNA
dalam tabung reaksi dan dimasukkan ke dalam 0,5 N asam
perklorat sehingga dapat diencerkan dan mengandung
0,020.25m mol DNA-fosfat / ml
selanjutnya diambil 2 ml sampel RNA dalam tabung
reaksi dan tambahkan 4 ml reagen DPA. Inkubasikan
campuran pada 25-30 0 C selama 15-17 jam.
Ukur absorbansi dari solusi pada 260 dan
280nm setelah kalibrasi spektrofotometer dengan
tabung kosong dan standar yang mengandung volume
yang sama dari asam perklorat. (Dubey et al 2008)
Konsentrasi RNA meningkatkan nilai OD juga
meningkat. OD berbanding lurus dengan konsentrasi
RNA
Terimah kasih…