Anda di halaman 1dari 21

ISOLASI DAN INOKULASI

L ABORATORIUM MIKROBIOLOGI FARMASI


FAKULTAS FARMASI, UNIVERSITAS HASANUDDIN
2019/2020
SASARAN BELAJAR
Setelah mengikuti praktikum ini maka mahasiswa diharapkan dapat:
1. Mendeskripsikan teknik aseptis dalam pengerjaan mikrobiologis, jenis-jenis teknik isolasi dan
teknik transfer mikroorganisme.
2. Membedakan teknik isolasi dan inokulasi mikroba berdasarkan cara kerja dan penggunaannya
3. Membedakan morfologi mikroorganisme pada media agar
4. Mendeskripsikan kultur murni dan teknik penyiapan dan pengawetan biakan murni
mikroorganisme
5. Menginterprentasi data dan menulis laporan ilmiah berdasarkan hasil kegiatan di laboratorium.
6. Mempraktekkan teknik aseptis dalam proses isolasi dan inokulasi mikroorganisme.
7. Mengisolasi dan menyiapkan kultur murni dari sampel/lingkungan.
8. Menginokulasi biakan mikroorganisme dari kultur stok.
9. Menulis laporan ilmiah berdasarkan hasil kegiatan di laboratorium
10. Mengkomunikasikan pendapatnya terkait hasil eksperimen dengan baik
METODE KERJA
PREPARASI SAMPEL CAIR

Sampel 1 ml 1 ml
1 ml

9 ml 9 ml 9 ml

10-1 10-2 10-3


PREPARASI SAMPEL TANAH

Sampel 1 ml 1 ml
10 g

95 ml 9 ml 9 ml

10-1 10-2 10-3


METODE AGAR SEBAR
DAN AGAR TUANG
METODE SEBAR (SPREAD-PLATE METHOD)
2
Tambahkan
0.1 ml Pengenceran
10-1/10-2/10-3

4
Inkubasi pada
suhu 37°C
1x24 jam

Masukkan medium Sebarkan


dan diamkan menggunkan
hingga padat spreader

1 3
METODE TUANG (POUR-PLATE METHOD)
1
Masukkan Pengenceran
1 ml 10-1/10-2/10-3

4
Inkubasi pada
suhu 37°C
1x24 jam
Tambahkan Campurkan
medium medium dan
sampel
2 3
METODE GORESAN
SINAMBUNG (ZIGZAG), T (TRIPLE), RADIAN DAN KUADRAN
SINAMBUNG/SEDERHANA/ZIG-ZAG

1. Siapkan Cawan Petri dan medium


2. Masukkan medium kedalam cawan
petri
3. Ambil biakan/kultur menggunakan
ose bulat
4. Goreskan pada agar pada cawan
petri membentuk gambar berikut
GORESAN “T” (TRIPLE)

1 1
1 2 2
3 2
3 3

Sterilkan Ose Sterilkan Ose


GORESAN RADIAN
1. Siapkan cawan petri berisi medium yang telah
padat
2. Ambil 1 ose biakan/kultur dan sebarkan pada
area kecil di pingir cawan petri (Area 1)
3. Sterilkan ose dan dinginkan selama 5 detik.
Gunakan area agar steril yang tidak digunakan
untuk memastikan ose telah dingin.
4. Dari pinggiran Area 1, Tarik 7 atau 8 goresan ke
bagian berlawanan dari cawan petri
5. Sterilkan ose dan gores memotong pada goresan
terakhir, dimulai dari dekat area 1
6. Sterilkan Ose dan simpan
GORESAN KUADRAN (4-WAY/QUADRAN)
ALTERNATIF GORESAN KUADRAN
HASIL GORESAN KUADRAN
KARAKTERISTIK KULTUR
INOKULASI – KARAKTERISTIK KULTUR
BIAKAN/KULTUR
Ambil Menggunakan Ose Lurus untuk
Tarik 1
agar tegak dan agar miring.
garis lurus
Untuk medium cair, gunakan ose bulat

Inokulasi 1 ose
kultur/biakan Tusuk
2/3

Inkubasi 1x24 jam Suhu 37°C


INOKULASI – KARAKTERISTIK KULTUR
BIAKAN/KULTUR
Gunakan METODE SEBAR dengan
mengambil 0,1 ml suspensi
biakan/kultur dan sebarkan dengan
spreader

Inkubasi 1x24 jam Suhu 37°C


HASIL PADA AGAR MIRING
HASIL PADA MEDIUM CAIR
HASIL PADA CAWAN PETRI