Isolasi dan Aktivitas Antibakteri Terpenoid dari Daun

Bougainvillea glabra

KELOMPOK 10
Ayu Rhossitayanti 16334718
Nita Maria Zevana Simanjuntak 15334760
Rifqi Badruzzaman 15334782
Utari Apriyanti 15334797
Yentri Sibarani 16334747

INSTITUT SAINS DAN TEKONOLOGI NASIONAL

FAKULTAS FARMASI
2017
 PENGANTAR
Bougainvillea glabra adalah pilihan tepat untuk tanaman di sekitar rumah
untuk keamanan agar orang tidak memanjat duri. Itu membuat warna yang indah
menyebar di dinding dan pagar. Nama umum Bougainvillea adalah taman kemuliaan,
berasal dari Amerika Selatan dan juga tanaman populer di bagian selatan California,
Florida. Bunga bugenvil terdiri dari kuning, merah muda, merah, oranye, ungu dan
terutama putih. Varietas bugenvil meliputi Bougainvillea spectabilis dan Bougainvillea
harrisi dan tanaman ini terutama ditanam pada tujuan dekoratif di daerah tropis.
Bougainvillea glabra telah digunakan oleh berbagai gangguan seperti diarrohea,
mengurangi asaman lambung, batuk dan sakit tenggorokan.
Tanaman terpenoid banyak digunakan untuk kualitas aromatiknya. Terpenoid
dapat memainkan peran penting dalam obat tradisional dan sedang dalam
penyelidikan untuk fungsi antineoplastik, antibakteri dan farmasi lainnya. Bougainvillea
glabra choicy mengandung sejumlah besar terpenoid, senyawa polifenol, tanin,
glikosida jantung dan anthrokuinon. Daun Bougainvillea glabra choicy digunakan dalam
aktivitas antimikroba, anti-diare, aktivitas anti hiperglikemik, aktivitas anti-inflamasi.
Tujuan penelitian ini untuk mengisolasi dan mengevaluasi aktivitas antibakteri asam
asetat Oleananoat dari fraksi etil asetat.
 BAHAN DAN METODE
• Ekstraksi
1. Sampel serbuk diekstraksi dengan etanol 95% dengan
menggunakan ekstraksi metode dingin dalam suhu kamar selama
satu minggu.

2. Ekstrak etanol 95% disaring, disuling dan dipekatkan untuk

mendapatkan residu kehijauan yang kental.

3. Ekstrak etanol 95% selanjutnya diencerkan secara berturut-turut

dengan petroleum eter, n-heksana, kloroform, etil asetat, etanol,
n-butanol dan metanol.

4. Pelarut tersebut dipulihkan dengan tekanan rendah.

• Isolasi
1. Bagian larutan etil asetat (5.8 gram) diberi silika gel (70-130 mesh) dan
kolom kromatografi (60 cm x 4.5 cm).

2. Bagian etil asetat terlarut dielusi gradien dengan kloroform, etil asetat,
metanol.

3. Fraksi metanol dikromatografi dengan etil asetat.

4. Etil asetat : Campuran metanol (4:1)

5. Eluen dikumpulkan dan proses pemisahan dicatat dengan kromatografi

lapis tipis mikro menggunakan sistem pelarut etil asetat : Metanol
(4,75:0,25) dan uap iodin sebagai agen pendeteksi.

6. Fraksi metanol dimurnikan dan direkristalisasi dengan metanol.

7. Serbuk padat putih diperoleh, yang ditandai dengan studi spektroskopi

(IR, NMR, EI-MS, ESI-MS (mode Negatif)
• Aktivitas Antibakteri
1. Aktivitas antibakteri asam asetat Oleananoat
dilakukan dengan menggunakan protokol
yang diterbitkan.

2. Konsentrasi senyawa adalah 25µg / mL.

 Tabel 1 Data Spektrum
Jenis Percobaan Unit Data
IR Perkin Elmer ∆ γ cm -1 3313 (ikatan OH), 1589 (C = O asam), 1684 (C = O dari
FTIR (450-4000 cm-1) ester), 2923 (peregangan C-H), 1499, 1299 (CH3, CH2
gp), 1021 (siklo alkana)
‘HNMR Bruker (400MHZ) Δppm 4.161 (H-3), 0.809 (H-5), 1.255 (H-9), 1.85 (H-11), 1.74
(H-18), 0.830 (H-24), 0.688 (H-26), 0,994 (H27), 0.905
(H-30), 2.134 (O-CH3)
3CNMR (100MHZ) δ ppm 28.35 (C-1), 22.38(C-2), 78.52(C-3), 31.33(C-4),
49.56(C-5), 18, 69(C-6), 29.79(C-7), 39.59(C-8),
45.16(C-9), 29.19(C-10), 19.48(C-11), 23.77(C-12),
36.16(C-13), 40.01(C-14), 28.5(C-15), 23.20(C16),
41.76(C-17), 30.47(C-18), 40.22(C-19), 29.02(C-20),
35.49(C-21), 29.02(C-22), 18.95(C-23), 18.69(C-24),
13.79(C-25) 11.61(C-26), 11.46(C-27), 180.3(C-28),
38.12(C-29), 38.31(C-30), 167(C11), 10.60(C-21)

EI-MS(Jeol) m/z 459(5), 485(5)

ESI-MS m/z 501(10), 457(7), 485(58)
(Thermo LCQ Deca XP
 Tabel 2 Aktivitas Antibakteri
NO. Nama Bakteri Kontrol Zona Hambat

1 Streptococcus 0 19mm
mitis

2 Lactobacillus sp 0 13mm
 Spektrum IR
• Spektrum IR menunjukkan frekuensi penyerapan pada
3384, ini mengindikasikan adanya kehadiran dari (OH)
untuk gugus hidroksil, yang terikat dengan (C = O) dari
asam diperoleh pada 1589.
• Keduanya mendukung asam karboksilat (COOH) ,
kelompok fungsional pada posisi C-28.
• Frekuensi pada 2923 adalah karena (C-H) untuk alkana
dan penyerapan yang ditunjukkan pada 1499, 1299
disebabkan oleh adanya kelompok (-CH3, CH2) dalam
molekul.
• Frekuensi penyerapan pada 1021 menandakan
sikloalkana.
 Spektrum NMR
• Spektrum IN 'H NMR, pergeseran kimia yang diperoleh pada 4.161
ditunjukkan (H-3) yang terikat dengan kelompok oksigen.
• Pada 0,809, 1,255 dan 1,74 adalah karena adanya kelompok 'CH'
dan memberi tandal pada 1,85 karena kelompok CH2.
• HNMR menunjukkan pergeseran pada 0,830, 0,688, 0,994, 0,905
atur kelompok -CH3 .
• Adanya kerangka Olean dikonfirmasi dalam spektrum 13C-NMR
dengan tanda di wilayah δ 11.46-38.31ppm pada 26 dan pada 23.77
dikaitkan dengan tujuh kelompok metil dan tidak adanya ikatan
rangkap pada posisi C-12, C-13 .
• 13C-NMR menunjukkan pergeseran pada 180,3 sesuai dengan (-
COOH) ikatan pada posisi C-28 dan 167, 10.60 sesuai dengan (C = O)
keterkaitan pada posisi C-11, C-21.
 Spektroskopi massa
• Interpretasi rumus molekul diprediksi terutama berdasarkan
spektrum massa (EI-MS, ESI-MS).
• Spektrum massa senyawa tersebut disesuaikan dengan spektrum
massa yang diperoleh dari metlin.
• Dalam EI-MS, ion molekuler tidak diamati tetapi ion molekuler (M++
H) senyawa diamati pada m/z-501 (10) di ESI-MS masing-masing
menunjukkan formula molekularnya C32H52O4 dan puncak
terfragmentasi untuk EI. -MS- 459 (5), 485 (5) dan untuk ESI-MS-
457 (7), 485 (58).
• Pita absorpsi IR adalah karena peregangan C-H untuk alkana. Ini
untuk tingkat kejenuhan molekul yang tinggi. Ini juga didukung oleh
13C NMR, tanda yang diperoleh pada 36,6 & 23.77.

• Berdasarkan karakterisasi di atas dan dengan membandingkannya

dengan senyawa sejenis lainnya, senyawa yang diisolasi adalah
asam asetat Oleananoat.
 Aktivitas antibakteri
• Hasil zona penghambatan asam asetat Oleananoat terhadap
mikroorganisme terpilih dilihat pada Tabel 2.
• Diameter zona inhibisi diukur dalam mm dan hasilnya dicatat zona
hambatan dengan diameter kurang dari 12mm dianggap tidak
memiliki aktivitas antibakteri.
• Diameter antara 12 dan 16mm dianggap cukup aktif dan ini dengan
≥ 16mm dianggap sangat aktif.
• Untuk menemukan senyawa antibakteri baru adalah upaya
penyaringan aktivitas antibakteri ekstrak tanaman secara terus-
menerus.
• Aktivitas antibakteri daun Bougainvillea dilaporkan oleh Rani.
Terbukti bahwa hasil penelitian ini mengkonfirmasi penghambatan
antibakteri terhadap dua organisme.
 KESIMPULAN
1. Karakterisasi senyawa menggunakan berbagai
teknik spektroskopi mengidentifikasi senyawa akhir
yang diisolasi sebagai asam oleananoat asetat dan
menunjukkan aktivitas anti bakteri yang sangat
baik.
2. Metode isolasi sederhana, hemat biaya dan efisien.
Ini adalah laporan pertama adanya terpenoid di
daun Bougainvillea glabra.