DNA/RNA Probe Tests - IAI PadoTest 4.
5 Hasil Pemeriksaan & Signifikansi Prognostik & Terapi
Gigi 17, distobukal; PD 8mm
Gigi 42, distobukal; PD 9mm
Parameter Quantitatif, Poket pada gigi
12 Distobuccal
Gigi 12, distofacial; PD 7mm (tabel hijau)
n - jumlah bakteri dalam jutaan,
e.g., Aa sekitar 180,000 entitas;
Bf sekitar 5,4juta
ML – “marker load” dalam %
Persentase komposisi bakteri marker
terhadap total bacteria load (TBL), e.g., ca.
82,000,000; dibandungkan: persentase Aa –
0,2%
Perbandingan statistic (“Bintang”)
TML – “total marker load” dalam
persentase dari seluruh jumlah semua
bakteri, 21%
TBL – “total bacteria load”
Gigi 26, distobukal; PD 7mm
(Jumlah “patogen + non-patogen”)
Skala berkisar dari 0 - 150 juta
Parameter Qualitatif
Mengkarakterisasi poket periodontal
menurut kolonisasi dan bermacam-macam
mikcroba dalam Tipe 1-5.
Karakterisasi ini memungkinkan
pemahaman tentang kompleksitas hasil
mikrobiologis dan memberikan petunjuk
tentang singifikansi klinis.
Tipe 5 – tipe poket
Tf, Pg, Td – “red complex,” p. 37
Skala utk Aa: 0-1 juta
421 Tipe poket – Kompleks
Mikrobiologis
421 Tipe poket – Kompleks
Menurut distribusi penanda bakteri ,
Mikrobiologis
5 tipe poket
Menurut telah
distribusi dibedakan:
penanda bakteri ,
5 tipe poket telah dibedakan:
Terapi
Tipe 1 Terapi
Sederhana
Tipe 1 Sederhana
Tipe2 2dan
Tipe dan
3 3 Sedang
Sedang
Tipe4 4dan
Tipe dan
5 5 Kompleks
Kompleks

Tipe
Tipe1-31-3bisa dirawat
bisa secarasecara
dirawat
mekanis. Tipe 4 (Aa!) dan 5 (“red
mekanis. Tipe 4 (Aa!) dan 5 (“red
complex”) membutuhkan terapi
complex”)
antibiotik membutuhkan terapi
tambahan.
antibiotik tambahan.
 Tes Imunologi - Reaksi Antigen-Antibodi

i) Reaksi Antigen-Antibodi
• Penentuan imunologis bakteri
→ antigen spesifik (Ag)
→ surface markers (pili, fimbria; biasanya karbohidrat/glikoprotein) yg
dilekatkan oleh antibody monoclonal spesifik (Ab)
• Untuk membuat ikatan Ag-Ab terlihat
→ antibody yg disiapkan khusus → reporter molecules (RM) telah ditandai.
Ini bisa dilakukan dengan menggunakan warna atau zat enzyme-like yg
berpendar.
ii) Imunofluoresensi Langsung &Tidak Langsung
• Imunofluoresensi → reaksi Ag-Ab dapat divisualisasikan dgn mikroskop
fluoresensi.
• Bakteri mengikat antibody spesifik yg ditambahkan melalui antigen
permukaan tipe-spesifik & antibodi tersebut akan terlihat dlm sinar UV
sebagai molekul berfluoresensi,
• Bakteri mati & hidup dapat dilihat
422 Imunofluoresensi
D-langsung (kiri):
Antibodi spesifik (warna
kuning) ditandai dengan enzim
fluoresen, berlabuh dengan
antigen triangular merah (Ag).
I-tidak lansung (kanan):
Pada langkah kedua, beberapa
anibodi yang telah ditandai
mengikat ke antibodi spesifik
(warna kuning) yang tidak
ditandai; ini memungkinkan
fluoresensi dapat
divisualisasikan dalam sinar-
UV.
EIA/ ELISA- Enzyme Linked Immunosorbent Assay

• Tes langsung chairside → mengidentifikasi marker bacteria pada

pasien periodontitis.
• Tes imunologis yg akan menimbulkan reaksi warna akan menjadi solusi
ideal utk menghindari studi laboratorium yg mahal, memakan waktu &
peralatan mahal
• Tes Evalusite disediakan (Kodak / uji warna semikuantitatif utk bakteri
penanda Aa, Pg, Pi) → dihapus dari pasar.
423 Test Imunologi, Reaksi
Warna – EIA dan ELISA
A “Antibody Capture”
B “Antigen Capture”
1 Antigen spesifk (mreah)
2 Antibodi primer (kuning):
reaksi Ag-Ab
3 Antibodi sekunder (hijau atau
kuning) membawa reported
molecules
4 Reported molecules (RM)
menimbulkan reaksi warna
• antibodi monoklonal spesifik
(kuning) "menangkap" antigen • berlangsung dgn cara yg serupa,
(merah) yg difiksasi dalam tetapi prosedurnya terbalik.
minicuvette
• di atasnya antibodi kedua
ditempelkan dgn reporter molecule
(RM).
• Mengikuti prosedur pembilasan,
hanya kompleks Ag- Ab yg
berpartisipasi dlm reaksi warna.
 Tes Bakteri Enzimatik – Tes BANA
• Bakteri periodontopatik tertentu ("red complex": Tf, Pg, Td)
→ menghasilkan enzim trypsin-like (peptidase) → memiliki kemampuan utk
mendegradasi
• BANA adalah N-α-benzoyl-DL-arginine-2 naphthylamide
→ suatu substrat sintetis yg dihidrolisis oleh peptidase bakteri.
→ produk pemecahannya adalah β-naphthylamide yg menjadi terlihat karena
reaksi warna & menbuktikan adanya bakteri patogen.
• Contohnya: Dentocheck & Butler
→ murah & dapat dilakukan oleh personel pembantu dlm praktik.
• Tes positif yg kuat → indikasi utk pengunaan antibiotik terhadap anaerob
obligat sebagai tambahan pada perawatan poket mekanik (pocket Type 5).
• Aa yg kuat & sulit dihilangkan tidak diidentifikasi oleh tes BANA.
• Kekurangan → flora poket yg kurang patogen → menujukkan hasil (+)
BANA.
424 DentoCheck
(Butler/ Heico Dent)
Kit ini berisi bahan untuk 30 tes/ situs
uji:
• Reagen 1, 2 dan 3
• 100 paper points
• 1 pipet
• skala warna
• petunjuk terperinci

Kiri: Menggunakan 3 paperpoints,

sampel plak dari poket terdalam telah
diperoleh dan kemudian diproses sesuai
dengan protokol laboratorium.

425 Kamar Ikubasi, Blok

Aluminium, Thermometer,
Stopwatch…
…harus tersedia. Kamar ikubasi dan
blok aluminium harus berada di 37°C
sebelum test dimulai.
Kiri: BANA-positif adalah adanya “red
complex” (Socransky et al. 1998).
Tergantung pada konsentrasi
mikroorganisme tersebut, tes
menujukkan hasil negative, positif
lemah dan sangat positif.
426 Evaluasi Tes BANA
Dibandingkan dengan skala warna,
keberadaan dan jumlah bakteri flora
BANA-positif dapat diperkirakan.
Kiri: Waktu reaksi (15 menit pada
37°C)harus dipatuhi dengan cermat.
Tes berikut tersedia secara komersial:
• Dentocheck
• Perioscan
• Periocheck