Kenapa Lahir HPLC ?

Perubahan telah terjadi dari kromatografi kolom

klasik menjadi teknik kromatografi modern.
Kendala-kendala yang ditemukan dalam
Kromatografi kolom klasik telah diperbaiki
Sekarang:
Kolom diisi dengan fasa diam yang sangat
halus, berdiameter 3 – 5 mikrometer untuk
mendapatkan resolusi tinggi.
Tetapi:
 Adanya HPLC

Zat cair tak akan mengalir sama sekali kalau

dilakukan seperti cara Kromatografi klasik karena
hanya menggunakan gaya gravitasi untuk
mengalirkan zat cair

Sehingga ….
 Adanya HPLC

Diperlukan pompa bertekanan tinggi,

sekitar 100 atm, yang mampu mengalirkan zat cair.
Diperlukannya partikel fasa diam yang sangat
halus dan pompa bertekanan tinggi yang mampu
mengalirkan zat cair dengan kecepatan tetap ...

Membuat
lahirnya …
 Prinsip Dasar HPLC
 Prinsip Dasar kromatografi Micellar
 Instrumentasi
 Aplikasi
Prinsip Dasar
Pemisahan komponen-komponen terjadi
karena perbedaan kekuatan interaksi
antara solut-solut terhadap fasa diam.
HPLC
Keuntungan HPLC dibandingkan
dengan kromatografi gas yaitu
terletak pada kemampuannya untuk
menganalisis cuplikan yang tidak
menguap dan labil pada suhu
tinggi.
Selain itu,
HPLC …
 HPLC tidak terbatas pada senyawa organik tetapi
mampu menganalisis senyawa Anorganik.
 Mampu menganalisis cuplikan yang mempunyai
berat molekul yang tinggi.
 Mampu menganalisis cuplikan yang mempunyai
titik didih yang sangat tinggi seperti polimer
HPLC
HPLC terdiri dari :
1. HPLC fasa normal
Pada HPLC fasa normal, yang
menjadi fasa diamnya lebih
polar dibandingkan fasa
geraknya.
2. HPLC fasa terbalik
Dalam HPLC fasa terbalik, fasa
diamnya itu nonpolar dan fasa
geraknya adalah polar.
HPLC
Jenis-Jenis HPLC :
Kromatografi Adsorbsi
Kromatografi Partisi
Kromatografi Fasa Terikat
Kromatografi Penukar Ion
Kromatografi Ekslusi Ukuran
Kromatografi Micellar