TEKNIK-TEKNIK

KULTUR JARINGAN

BY : KELOMPOK III

HULIL AFDOL (207172974)

SONYA ASOKAWATI (207173034)
VERINA SARASWATI (207173045)
YUSNIDAR (207173057)
TEKNIK KULTUR JARINGAN

Kultur aseptic sel,

Kultur jaringan jaringan, organ
tanaman juga dan kompenennya
disebut sebagai dalam kondisi
kultur sel, in vitro, fisik dan kimia
axenic, atau kultur yang
steril didefenisikan
secara in vitro.

Bahwa sel
Berdasarkan teori mempunyai
sel seperti yang kemampuan
dikemukakan oleh autonom, bahkan
Schleiden dan mempunyai
Schwann kemampuan
totipotensi.
 SYARAT-SYARAT KEBERHASILAN
KULTUR JARINGAN
Pemilihan Eksplant Sebagai Bahan
Dasar Untuk Pembentukan Kalus

Pemilihan Medium Yang Cocok

Keadaan yang aseptik dan pengaturan

udara yang baik

Memilih bagian tanaman yang masih muda

dan mudah tumbuh yaitu bagian meristem.
JENIS TEKNIK KULTUR
JARINGAN
KULTUR
JARINGAN
EMBRIO

KULTUR KULTUR
JARINGAN JARINGAN
ANTHER PROTOPLASMA

JENIS
TEKNIK
 KULTUR ANTHER
DEFENISI Menghasilkan Dari monoploid
tanaman haploid dapat dihasilkan
• Teknik pemuliaan tanaman
atau tanaman derivat yang
dengan menggunakan mempunyai satu dihaploid
eskplan dari pollen atau genom saja. (diploid).
benang sari untuk
mendapatkan jalur murni
melalui produksi tanaman
KEGUNAAN
haploid ganda.

Dapat
Membuat dikombinasikan
tanaman dengan
heterozigot pengunaan
mutagen kimiawi
PROSEDUR KULTUR ANTHER
anthera yang masih
terdapat di dalam Kuncup bunga di
Sterilisasi
kuncup bunga gojog 10 mnt di
dengan cara
dimasukkan ke dalam larutan
kimiawi ataupun
dalam erlen mayer dan membuka
cara fisik yang telah diisi 10% kuncup dengan
pemanasan clorox dan satu tetes
pisau steril
tween-20

Sterilisasi bahan Anthera dipotong

berdaging : dimasukkan ke
Kuncup bunga Eksplan di cuci dalam 5% clorox
dicelupkan dan di dengan air steril + 1 tetes tween-
bakar di spiritus 20 (gojog 1
(3x) menit)

Anthera diambil
dan di tanam di
atas medium
ALUR KULTUR ANTHER

Sumber : https://agroteknologi.web.id)
 FAKTOR YANG
MEMPENGARUHI
UMUR TANAMAN

TK.
KONDISI RUANG
PERKEMBANGAN
INKUBASI
POLEN

METODE
KULTUR MEDIUM
STERILISASI

METODE DISEKSI PRE-TREATMEN

 PERMASALAHAN YANG
MUNCUL

Masih perlu Belum berhasil

Tanaman hasil
mencari membudidayakan
budidaya masih
pencegahan kepala sari
banyak yang
efekktif terhadap tanaman
steril
tanaman bulai polongan
 KULTUR EMBRIO

DEFENISI :
FUNGSI :
Teknik kultur jaringan menggunakan
Sebagai pencegah keguguran (embrio
eksplan yang berasal dari embrio muda
rescue) dan juga untuk merangsang
(immature embrio) dan embrio dewasa
perkecambahan (embrio culture).
(mature embrio).

KULTUR EMBRIO

TUJUAN :
Secara umum untuk mendapatkan
tanaman yang viable.
CONTOH :
Persilangan buatan antara tanaman induk
(P) untuk menghasilkan hybrid baru.
Persilangan buatan lebih mudah berhasil
bila dilakukan antar tanaman dengan
hubungan kekerabatan yang dekat.
TUJUAN KULTUR EMBRIO

MEMPERPENDEK
SIKLUS BREEDING

MENGUJI
Memperoleh
KECEPATAN
VIABILITAS
Tujuan hibrid
langka
BIJI

Memperban
yak
tanaman
langka
 FAKTOR YANG
MEMPENGARUHI
Tingkat Komposisi
perkembangan
Genotif embiro pada
media
waktu dipisahkkan makanan

Kondisi
Oksigen TEMPRATUR perkembangan
tanaman induk

Cahaya
KULTUR EMBRIO

(Sumber : http;//slideplayer.info/slide/2920426)
TEKNIK KULTUR PROTOPLAS
Kultur yang berasal dari sel-sel muda yang dikultur dalam media cair
kemudian dihilangkan dinding selnya dengan menggunakan enzim.

Protoplas pada dasarnya adalah sel hidup dikurangi dinding selnya atau
sering disebut sebagai sel telanjang dan sebagai satu-satunya
pembatas adalah membrane plasma.

Eksplan yang dapat digunakan untuk kultur protoplas adalah semua

bagian tanaman yang masih muda seperti akar, daun, nodul akar,
koleoptil, kultur kalus dan daun secara in vitro

Kultur protoplas bertujuan untuk memodifikasi genetic sel

Proses pengambilan protoplas dan memisahkannya dari dinding

sel disebut isolasi protoplas
TEKNIK KULTUR PROTOPLAS

KULTUR
PROTOPLAS

ISOLASI FUSI
PROTOPLAS PROTOPLAS
PERBEDAAN KULTUR
PROTOPLAS
Dengan kultur biasa
adalah tidak adanya
dinding sel

JIka kultur meristem

berbentuk kalus
atau planlet baru

maka kultur
protoplas ini
berbentuk koloni
 ISOLASI PROTOPLAS

DEFENISI PERSIAPAN YANG DILAKUKAN

• Isolasi protoplas adalah BAHAN
usaha untuk meghasilkan
protoplas sebanyak- plasmolyxing agent
banyaknya dari suatu
jaringan MEDIUM ENZIM,
PENCUCI,
PURIFIKASI, CPM

DAN ZAT KIMIA

LAINNYA

LALU DISTERILISASI
DENGAN
MILIOPORE FILTER
 PROSEDUR ISOLASI
PROTOPLAS
(kalus) Didalam erlenmeyer kalus dihaluskan
dg pengaduk kaca steril dengan pelan-pelan.

(suatu jaringan, ex : anggrek) setelah diambil disterilisasi

dgn klorox, lalu epidermis atas dan bawah dihilangkan
dan iris tipis daun selebar 0,5-1,0 mm

(kalus/jaringan yg siap) diberi enzim medium dan

digojog di atas shaker dg kecepatan 50rpm selama 8-
14 jam.

Larutan beserta isinya disaring dengan nylon filter

steril ukuran mesh kain 80 mikron, lalu ditampung
dalam tabung centrifuge.

Larutan yang agak keruh di gojog dg

centrifuge dg kecepatan putar 50 g selama ±2
menit
 PROSEDUR ISOLASI
PROTOPLAS
LARUTAN DIBUANG DENGAN PIPET STERIL MELALUI
BAGIAN PINGGIR CENTRIFUGE DAN DIBERI MEDIUM
PENCUCI (WASHING MEDIUM)

LARUTAN DIGOJOG DENGAN CENTRIFUGE KEMBALI

SELAMA 2 MENIT DG KECEPATAN PUTAR 50 G

SUSPENSI BAGIAN ATAS DIBUANG DENGAN PIPET

STERIL DAN DIBERI WM

SAMBIL DIGOYANG DENGAN TANGAN MAKA ANTARA

ENDAPAN DEBRIS DENGAN PROTOPLAS VIABEL
TERPISAH

PROTOPLAS DIPISAHKAN DARI DEBRIS DENGAN PIPET

STERIL, KEMUDIAN DIVERI CPW. SELANJUTNYA
DISIMPAN DAN MENUNGGU SAAT AKAN DIFUSIKAN
 PROSEDUR FUSI PROTOPLAS

DEFENISI:
Dalam Teknik Kultur :
Secara alamiah, terjadi antara sel telur
Dilakukan dengan fusi buatan dengan
dan sperma dan antara sel sperma
cara kimiawi atau cara medan listrik.
dengn inti kandung lembaga

FUSI PROTOPLAS

Ada dua bentuk terjadinya fusi, yaitu:

Pelaksanaannya dibantu oleh alat Self fution, terjadi perkawinan sendiri :
listrik dengan inverted microsop &
monitor-video sehingga dapat dilihat Master fution, terjadi penggabungan
dan di potret protoplas 10 atau lebih
FAKTOR YANG MEMPENGARUHI

Faktor-
faktor
WAKTU lingkungan Pengujian
INKUBASI & viabilitas
AGITASI protoplas

Larutan
Kerapatan
enzim yang
protoplas
digunakan

KONDISI CARA
JARINGAN FAKTOR PENCUCIAN
ALUR ISOLASI FUSI PROTOPLAS

(Sumber : https://docplayer.info)
CONTOH HASIL FUSI ISOLASI
PROTOPLAS

Sumber : https://agroteknologi.web.id
TERIMAKASIH….