METABOLIT SEKUNDER BIOAKTIF

BARU DARI ARTOCARPUS

ELASTICUS
Nama Kelompok :
1. Maria Florida Suhartati (191FF04043)
2. Nor Maulida (191FF04051)
3. Rant Galih (191FF04059)
4. Sintia Veronika Purba (191FF04067)
5. Ida Ayu Komang Anindia Putri (191FF04075)
 Latar belakang
■ Genus Artocarpus (Moraceae) terdiri dari 50 spesies, terutama tersebar di wilayah tropis
Asia. Beberapa spesies dikenal karena nilai pengobatannya dan memiliki sejarah
panjang yang digunakan untuk mengobati sirosis hati, hipertensi, peradangan, demam
malaria, TBC, diare, dan disentri. Beberapa flavon yang diprenilasi, chalcones,
arylbenzofurans dan dihydrobenzoxanthones telah diisolasi dari genus ini dan mereka
menunjukkan sitotoksik, antioksidan, antimikroba, antimalaria, antiarthritic,
antiatherosclerotic, anthelmintik, dan penghambatan aktivitas 5-lipoksigenase 2a.
■ Investigasi fitokimia lebih lanjut dilakukan pada kulit A. elasticus yang menyebabkan
isolasi empat turunan flavonoid, termasuk satu dihydrobenzoxanthone baru. , trivially
bernama elastixanthone, bersama dengan artonin E, cycloartobiloxanthone dan
artobiloxanthone.
■ Penelitian ini melaporkan isolasi dan karakterisasi struktural senyawa ini dan aktivitas
antioksidan, sitotoksik, dan antimikroba.
 Aspek Botani
■ Nama lain : Artocarpus elasticus memiliki beberapa nama daerah, suku Jawa
menyebutnya sebagai bendo atau bendo, dalam Bahasa Sunda disebut teureup,
serta terap dalam Bahasa Sumatra dan Kalimantan. Tumbuhan ini terdapat di
Negara Myanmar, Thailand, Malaysia, Indonesia, Brunei dan Filipina (Teo and
Nasution, 2003).

Kingdom Plantae
Divisi Magnoliophyta
Kelas Magnoliopsida
Ordo Rosales
Famili Moraceae
Genus Artocarpus
Spesies Artocarpus Elasticus
■ Karakteristik tanaman

Pohon berukuran sedang; tinggi 45-65 m, batang bebas cabang bisa mencapai 30 m dan
gemang batang hingga 125-210 cm. Banir mencapai tinggi 3 m di atas tanah. Pepagan
kelabu-cokelat, bagian dalamnya kekuningan hingga cokelat pucat; lateksnya berwarna
putih kekuningan.
Ranting-ranting tebalnya 8-20 mm, berambut rapat keemasan. Daun penumpu
membungkus ujung ranting, 6-20 cm, berambut panjang kuning hingga merah. Daun-
daun kaku menjangat, bundar telur jorong, 12,5-60 × 10-35 cm; pertulangan daun
dengan rambut kasar keemasan di sisi atas dan rambut keemasan rapat di sisi bawah;
ujungnya runcing hingga meruncing; bertepi rata hingga menggelombang; pangkalnya
membulat hingga menyempit.
Daun pada anak pohon berbeda bentuk, berbagi atau bercangap 7-9 taju, panjang 60-
120 cm.
■ Kandungan Kimia
Daun buah, kulit dan batang Artocarpus elasticus mengandung saponin dan polifenol.
Daun dan buah Artocarpus elasticus mengandung flavonoida
 METODE PENELITIAN
Senyawa yang diisolasi Uji aktivitas sitotoksik
dikarakterisasi menggunakan menggunakan uji MTT
metode spektroskopi berdasarkan dengan tamoxifen
Spektrum IR dan Spektrum UV. sebagai standar.

Struktur ditentukan dengan Uji aktivitas antibakteri

membandingkan data menggunakan uji
spektroskopi NMR. difusi cakram.

Uji aktivitas antioksidan

menggunakan uji pembersihan Metode Ekstraksi dan
radikal DPPH dengan metode Isolasi.
bioautografi TLC.
 Metode Ekstraksi dan Isolasi

Maserasikan kulit serbuk kering

A.Elasticus tiga kali selama 72 jam

Diuapkan menggunakan rotary

evaporator pada 40 ° C

Fraksinasi menggunakan kolom

silika gel, dielusi dengan n-
heksanaaseton (1: 9)

Gabungkan kolom dari fraksi 30-43

yang telah dilakukan
Dilakukan metode VLC didapatkan 52 fraksi.
Fraksi 40 dan 41 dikromatografi ulang.

Analisis Autobiografi TLC : senyawa murni

dilarutkan dengan aseton, diendapkan pada plat
TLC

Keringkan dan pelat TLC

dimonitor di bawah sinar UV
pada 254 dan 366 nm

Semprot dengan
DPPH. Amati
 ALAT DAN BAHAN
Alat :

•Alat titik lebur tahap panas, model Leica Galen III, dilengkapi dengan
Uji Titik mikroskop dan titik lebur digital electrothermal.
Lebur

•IR : Spektrofotometer Perkin Elmer FR-IR (model 1725X),

Spektrum •UV : Shimadzu UV 2100.
IR dan UV

•Direkam menggunakan polarimeter digital Jasco P200 pada 20˚C

Rotasi Optik
•NMR : spektrometer JEOL ECA-400 yang beroperasi pada 500 MHz
dan NMR dengan tetramethylsilane (TMS) sebagai standar internal.
 • Spektrometer Shimadzu GSMS-QP5050. HREIMS oleh spektrometri massa ToF
Spektrum dilakukan di Departemen Kimia, Universiti Kebangsaan Malaysia, Selangor.
Massa

• Gel silika Merck 60 (ukuran mesh 0,063-0,200 mm), Darmstadt, Jerman

Kromatogra
fi Kolom
(CC)

• Plastik TLC dari Merck yang di-precoated, Kieselgel 60 F254, dengan

ketebalan 0,2 mm, digunakan untuk melakukan kromatografi lapis tipis
TLC analitik.
Bahan :

Sel :
Reseptor N-heksan, etil
Strain
Kulit kayu A. estrogen asetat,
Bakteri,
elasticus manusia metanol, Pereaksi
bakteri gram
Reinw. ex (ER+ dan ER- silika gel, n- DPPH
positif dan
Blume ) dan sel heksanaaset
negatif
manusia on (1:9)
normal
 HASIL DAN PEMBAHASAN
Penelitian ini bertujuan untuk pencarian
lanjutan dari konstituen bioaktif dari
spesies Artocarpus, pencarian senyawa
fitokimia lebih lanjut dilakukan
menggunakan kulit batang A. elasticus
yang menghasilkan isolasi empat turunan
flavonoid, termasuk dihydrobenzoxanthone
baru. , trivially bernama elastixanthone (2),
bersama dengan artonin E (1),
cycloartobiloxanthone (3) dan
artobiloxanthone (4) (Gambar 1).
Penelitian ini melakukan isolasi dan
karakterisasi struktural senyawa dan
aktivitas antioksidan, sitotoksik, dan
antimikroba.
A. Isolasi dan Penetuan Struktur
Senyawa yang diisolasi dikarakterisasi menggunakan metode spektroskopi dan dengan
perbandingan data penelitian sebelumnya. Data spektroskopi terperinci dari senyawa 1-
5 tersedia di bagian tambahan (Tabel 1-4). Senyawa 2 diisolasi sebagai bubuk kuning
dan menunjukkan pita serapan dalam spektrum IR untuk gugus hidroksil (3375 cm-1),
alkil (2972 cm-1) dan karbonil chelated (1644 cm-1). Spektrum UV dari senyawa 2
menampilkan maksimum penyerapan pada 379, 316, 208 dan 261 nm, yang konsisten
dengan kerangka dihydrobenzoxanthone. Rumus molekul C21H17O7 dikonfirmasi dari
HREIMS yang menunjukkan puncak ion molekul pada m / z 382.1047 (C21H17O7 calcd
untuk 382.1052). Struktur ditentukan terutama dengan membandingkan data
spektroskopi NMR dengan orang-orang dari artoindonesianin S, diisolasi sebelumnya
dari A. champeden oleh Syah et al., dengan perbedaan dalam ketiadaan kelompok
metoksil di C-4 '.
Puncak singlet yang tajam diamati pada δ 3,88
memverifikasi keberadaan satu gugus metoksil,
yang disimpulkan untuk dilampirkan pada
cincin A karena korelasi jarak jauh antara OMe-
7 ke C-7 serta H-8 hingga C-6, C-4a, C-8a dan C-
7 (Gambar 2a).

Kehadiran proton aromatik tunggal di cincin B,

ditunjukkan oleh singlet di .50 6,50, dan yang
dikaitkan dengan H-3 ', merasionalisasi struktur
pentasubstitusi cincin B. Tidak ada korelasi
HMBC yang diamati antara H-3' dan C- 7, yang
selanjutnya mengkonfirmasi perlekatan
kelompok metoksil ke cincin A (Gambar 2b).
Nilai pergeseran kimia sedikit turun pada H-8
dibandingkan dengan 5 menunjukkan bahwa
ada efek anisotropik dari kelompok metoksil
pada C-7 in 2 (Tabel 1 dalam data tambahan).
Sifat dihidrogenasi dari benzoksanthone ini
didukung oleh sinyal proton metilen dari H-9,
yang muncul sebagai dua set doublet ganda
doublet pada δ 2.45 (dd, J = 16.2, 7.1) dan δ
3.40 (d, J = 16.2) , karena posisi sudut dihedral
antara proton.
Spektrum Attached Proton Test (APT) dari 2 menunjukkan dua puluh satu karbon: satu metil
pada .1 21,1; satu metoksil karbon pada δ 55,5; dua metilena pada δ 21,5 dan 21,1; empat
kelompok CH di δ 97.8, 92.3, 37.1 dan 102.9; satu karbon karbonil pada δ 180,2 dan dua belas
karbon kuartener pada δ 161,0, 110,8, 104,7, 162,0, 165,2, 156,7, 144,6, 105,7, 150,3,
150,3, 150,5, 136,1 dan 128,5, yang sesuai dengan rumus molekul senyawa. Atas dasar bukti
di atas, senyawa 2 diidentifikasi sebagai 7 metoksi-10- (2-metilprop-1-ene) -5,2 ', 3', 5'-
tetrahydroxydihydrobzoxanthone, suatu senyawa baru yang secara sepele disebut sebagai
elastixanthone (2).
■ Antioksidan
Artonin E (1) dan elastixanthone (2) menunjukkan hasil positif ketika disaring dengan metode
bioautografi TLC menggunakan DPPH. Tes aktivitas antioksidan lebih lanjut dilakukan dengan
menggunakan uji pembersihan radikal DPPH. Senyawa 1-3 menunjukkan potensi yang baik
untuk pengembangan lebih lanjut sebagai agen antioksidan dengan nilai IC50 11,5, 21,6 dan
40,0 ug / mL (Tabel 5).
Reaksi di atas menjelaskan bahwa gugus hidroksil memainkan peran penting dalam
aktivitas flavonoid melawan radikal bebas, di mana keberadaan substitusi hidroksil
pada C-5 di cincin A menjelaskan alasan mengapa sebagian besar senyawa yang
diisolasi aktif.
Selain itu, konfigurasi hidroksil B-ring adalah penentu paling signifikan dari pembersih
radikal bebas. Grup hidroksil di cincin B menyumbangkan hidrogen yang menyebabkan
radikal flavonoid yang relatif stabil.
Ini menjelaskan aktivitas tinggi artonin E (1) (nilai IC50, 11,5 μg / mL) dibandingkan
dengan senyawa lain, di mana gugus hidroksil bebas pada C-5 'hilang karena siklisasi
oksidatif.
■ Aktifitas Sitotoksik
Aktivitas sitotoksik dipelajari menggunakan uji MTT dengan tamoxifen sebagai standar
atau pembanding. Seperti ditunjukkan pada Tabel 5, dari senyawa yang diisolasi,
artonin E (1) memiliki aktivitas sitotoksik paling kuat terhadap sel MCF-7 dan MDA-MB
231, dengan nilai IC50 2,6 dan 13,5 μg / mL.
Studi sebelumnya menunjukkan bahwa artonin E (1) menunjukkan pengaruh sitotoksik
terhadap garis sel leukemia P388 dengan nilai IC50 0,06 ug / mL [6]. Sayangnya,
HepG2 resisten terhadap senyawa 1 dengan IC50 33,8 μg / mL, yang menunjukkan
bahwa sel-sel mungkin memiliki situs molekul yang berbeda untuk interaksi
ligandreseptor. Aktivitas kuat yang ditunjukkan oleh senyawa tersebut adalah karena
hidroksilasi pada posisi 5 dan gugus resorsinol pada cincin B (substitusi hidroksil pada
posisi C-2 'dan C-4').
Namun demikian, artobiloxanthone (4) dan cycloartobilo-xanthone (3), yang memiliki
struktur yang hampir sama dengan artonin E (1), kecuali untuk siklisasi oksidatif rantai
samping prenyl, tidak menunjukkan penghambatan terhadap garis sel yang diuji. Ini
mungkin karena hambatan sterik dari molekul.
■ Uji Anti Mikroba
Uji difusi cakram menunjukkan berbagai aktivitas antibakteri dari senyawa yang diuji.
Senyawa 2 dan 3 menunjukkan aktivitas lemah terhadap Bacillus ATCC dan B. subtilis,
masing-masing dengan zona penghambatan 7,0 dan 8,3 mm, sementara senyawa 4 tidak
menunjukkan aktivitas terhadap bakteri yang diuji.
Sebaliknya, artonin E (1) menunjukkan spektrum luas pada aktivitas antimikroba ketika
diuji terhadap tiga belas mikroorganisme yang berbeda.
Dalam penelitian kami, artonin E (1) menunjukkan aktivitas yang kuat dan sedang terhadap
Bacillus ATCC 6051, B. cereus, B. subtilis, S. aureus ATCC, S. aureus IMR, S. pyogenes, E.
coli dan S. epidermidis dengan penghambatan zona 13 ± 0, 12 ± 0, 15,7 ± 0,6, 12,3 ± 0,6,
11,3 ± 0,6, 15 ± 0, 13 ± 0 dan 12 ± 0 mm, masing-masing.
 Lanjutan…

Penelitian sebelumnya mengungkapkan bahwa senyawa 1 yang diisolasi dari A. rigida

menunjukkan aktivitas antimikroba terhadap E. coli dan B. subtilis dengan penampilan zona
bening masing-masing berdiameter 1,2 cm dan 0,9 cm.
Ada beberapa studi yang dilakukan pada hubungan aktivitas struktural antara flavonoid
berdasarkan zona hambatan pertumbuhan dalam metode kertas disk. Direkomendasikan
bahwa cincin B flavonoid memainkan peran penting dalam interkalasi atau pembentukan
ikatan hidrogen dengan penumpukan basa asam nukleat yang akan menghambat sintesis
DNA dan RNA, yang menyebabkan bakteriostasis mikroorganisme.
Selain itu, hidroksilasi pada cincin A (5, 7 terhidroksilasi) atau cincin B (2 ', 4' atau 4 ', 6'
dihydroxylation) dapat berkontribusi pada aktivitas antimikroba yang kuat, yang menjelaskan
penghambatan kuat senyawa 1 terhadap beberapa bakteri yang diuji.
Dari data semua sampel yang diuji, artonin E (1) menunjukkan potensi besar untuk
dikembangkan menjadi agen antioksidan, antibakteri, dan kemoterapi.
 KESIMPULAN

1. Hasil dari lanjutan penelitian Artocarpus elasticus didapatkan hasil dari isolasi pada
senyawa flavonoid mengandung 2 senyawa yaitu dihydrobenzoxanthone dan
trivially. Dari senyawa ini didapatkan turunan trivially yaitu artonin E (1),
elastixanthone (2), cycloartobiloxanthone (3) dan artobiloxanthone (4).
2. Dari pengujian aktivitas turunan flavonoid didapatkan hasil yaitu senyawa 1 ,2 dan 3
memiliki aktivitas antioksidan dan antimikroba. Sedangkan senyawa 4 tidak
menunjukan hasil pada ketiga uji aktivitas. Dari keempat senyawa, senyawa 1
memiliki aktivitas sitotoksik yang paling besar.