Cover

Analisis Vitamin Dengan HPLC

Anggota Kelompok :
Muhammad Aprizki F(041811024)
Novitasari Dewi A (041811026)
Rara Maulidya P (041811033)
Tiara (041811036)
Yola Afrillia A (041811039)
Cover
Agenda
01 PENDAHULUAN
02 METODE
03 HASIL
04 PEMBAHASAN
05 KESIMPULAN
PENDAHULUAN

High Performance Liquid Chromatography (HPLC) adalah

teknik kromatografi cair yang dilakukan untuk memisahkan dan
mengukur senyawa yang telah dilarutkan dalam suatu larutan.
HPLC digunakan untuk menentukan jumlah dari suatu senyawa
spesifik dalam suatu larutan.

Penelitian ini memberikan informasi tentang tingkat fortifikasi

dari vitamin larut air yaitu dengan rentang sampel :

Thiamin (B1) (268 ug / mL hingga 3 ug / mL)

Nicotinamide (B3) (41 ug / mL hingga 1 ug / mL)

Pyridoxine (B6) (412 ug / mL hingga 20 ug / mL)

Dalam berbagai bahan makanan termasuk produk susu dan

sereal untuk anak kecil. Fortifikasi makanan adalah alat utama
untuk meningkatkan kesehatan anak-anak yang tumbuh.
METODE

Deteksi vitamin dalam produk makanan dilakukan oleh

HPLC yang merupakan teknik yang sangat sensitif dan
selektif untuk analisis kuantitatif dan kualitatif.

Eksperimen

Analisis ini menggunakan instrumen kromatografi cair

kinerja tinggi dari seri Agilent 1100 dengan pompa
kuaterner yang mencakup degasser vakum, kompartemen
kolom Thermostatted dan Thermostatted Autosampler.
Detektor array dioda digunakan untuk tujuan deteksi.
Kolom fase terbalik Zorbax SB-C18 4,6 × 75 mm digunakan
untuk pemisahan.
Sampel: Produk makanan bayi (susu, jus, biskuit dan
makanan bubuk)
 PEMBAHSAN

Tujuan

Penelitian ini burtujuan untuk menentukan jumlah

vitamin larut dalam air (tiamin, nikotinamid, dan
PowerPoi
piridoksin) dalam produk makanan yang diperkaya
nt
dan dipilih untuk meningkatkan kesadaran para
Presenta
pengguna.
tion
 Bahan kimia / Reagen dan larutan

1. Pelarut tingkat HPLC digunakan 3. Vitamin B1 (Thiamin-Hydrochloride -

sepanjang analisis. Asetonitril, 99%) dan vitamin B6 (Pyridoxine - 98%)
metanol (Merck, UK) dan asam dibeli dari BDH Biokimia, Inggris,
asetat glasial di aplikasikan, sedangkan vitamin B3 (Nicotinamide -
dipasok oleh produsen. 98%) berasal dari Alfa Aesar, Inggris.

2. Sulfon 1-heptana asam, garam natrium 4. Dua puluh produk makanan dibeli dari
monohidrat (C 7 H 15 NaO 3 S. H 2 O) - pasar lokal tergantung pada konsumsinya
96% murni disediakan oleh Fluke untuk bayi dan anak-anak
Chemika.
 Persiapan sampel dilakukan tiga langkah yaitu sebagai
berikut :

01 Persiapan penyangga 02
.
Ekstarsi 03 Penyaringan

Larutan buffer disiapkan

dengan mengambil 1 garam
natrium asam sulfonat 1-
heptana dalam 1000 mL
(1L) labu volumetrik dan
larutkan dengan minimum
jumlah air. 10 mL asam
asetat glasial ditambahkan
dan akhirnya volume dibuat
hingga tandai dengan air.
Semua sampel dihomogenisasi dalam
sebuah blender. 10 gram dari masing-
masing sampel diambil dan dilarutkan
dalam 100 mL buffer. Setelah
dimasukkan dalam pengocok selama
60 menit untuk peleburan bahan
makanan.
Setelah itu disaring oleh
kertas whatmann, jadi makanan
tersuspensi yang keraspartikel
dapat dipisahkan. Solusi yang
sama adalah sekali lagi disaring
melalui filter Millipore 0,22 μm
sebelum injeksi sampel dalam
sistem.
Kondisi Analitik Untuk Hplc

Kolom = Zorbax SB-C18 4,6 × 75 mm

Ukuran partikel = 3,5 μm
Suhu kompartemen kolom = 25 ºC
Volume Injeksi Sampel = 20 μL
Waktu berhenti = 20 menit
Fase seluler = Penyangga (90): Acetonitrile (10) [v / v]
Laju aliran = 1,2 mL / menit
Detector = Array diode
Panjang gelombang untuk deteksi = 280 nm
Analisis Vitamin Dengan HPLC

• Fase gerak ditempatkan dalam pelarut reservoir dan pompa diatur pada laju aliran 1,2 mL /min dan dibiarkan memompa
selama 10 hingga 15 menit sebelum analisis pertama.

• Detektor dihidupkan setidaknya 30 menit sebelum analisis dan ditetapkan pada 280 nm panjang gelombang. Alikuot 20 mL
larutan sampel ditarik ke dalam jarum suntik injeksi HPLC yang bersih.

• Sampel disuntikkan dan sistem detektornya diaktifkan secara bersamaan. Setelah sekitar 15 hingga 20 detik katup
injeksi dikembalikan ke muatan posisi.

• Jarum suntik dan katup dibilas dengan air untuk analisis sampel selanjutnya. Metode yang sama digunakan untuk
menyuntikkan larutan standar dan sisa sampel. Semua tes
dilakukan dalam rangkap tiga.

• Senyawa yang diteliti didokumentasikan dengan menggunakan waktu retensi yang cocok dengan standar kalibrasi,
sedangkan kuantifikasi dicapai dengan menggunakan area puncak yang sesuai dengan standar.
Waktu retensi untuk tiamin, piridoksin dan nicotinamide
adalah 17,77,5,56 dan 3,27 menit masing-masingnya.

Nikotinamid dipisahkan terlebih dahulu, diikuti oleh piridoksin

dan tiamin. Statistik ringkasan data untuk penentuan HPLC
vitamin disebutkan dalam Tabel 1.

• Kandungan tiamin pada sampel 10 menunjukkan yang tertinggi

(268 ug / mL) dan sampel 5 terendah menunjukkan (3 μg / mL).

• Kandungan nikotinamid pada sampel 8 menunjukkan yang

tertinggi (41 ug / mL) dan sampel rendah 2 (1 ug /mL)

• Kandungan piridoksin pada sampel 5 dan 20 lebih tinggi (412 ug

/ mL) dan lebih rendah dalam sampel 14 (20 μg / mL).
Distribusi dan perbandingan vitamin dalam 20 sampel produk
makanan ditunjukkan pada tabel 2 serta pada Gambar 6.
Hasil yang diperoleh dari percobaan adalah juga dibandingkan
dengan Organisasi Kesehatan Dunia (WHO) merekomendasikan
asupan harian.
Perbandingan menunjukkan bahwa tingkat ke tiga vitamin dalam semua
sampel di bawah asupan yang disarankan sebagaimana ditunjukkan pada
Gambar 7.
Pemeriksaan yang tepat diperlukan pada produk makanan ini sehingga
berbagai penyakit pada anak-anak kecil dan bayi dapat dihindari.
 HASIL

• Anak-anak kecil dan bayi umumnya terancam defisiensi

mikronutrien. Fortifikasi makanan penting untuk
menghindari masalah yang terkait dengan defisiensi dimana
mikronutrien ditambahkan ke objek makanan yang berbeda .
Oleh karena itu sangat penting untuk mengetahui jenis dan
jumlah zat gizi mikro yang ditambahkan ke produk makanan
terutama untuk anak kecil. Penentuan vitamin yang larut
dalam air dilakukan dengan menggunakan kromatografi cair
kinerja tinggi untuk menciptakan kesadaran mengenai
Powerproduk
jumlah vitamin dalam beragam PowerPoint
makanan di kalangan
masyarakat umum. Presentation

• Untuk grafik kalibrasi, larutan standar vitamin dibuat

dalam kisaran 100.200.300.400 dan 500 ug / mL dengan
pengenceran serial untuk mengevaluasi rentang dinamis
linier.
 Deteksi vitamin dalam produk makanan dilakukan oleh HPLC yang merupakan
teknik yang sangat sensitif dan selektif untuk analisis kuantitatif dan kualitatif.
Analisis ini menggunakan instrumen kromatografi cair kinerja tinggi dari seri
Agilent 1100 dengan pompa kuaterner yang mencakup degasser vakum,

KESIMPULAN kompartemen kolom Thermostatted dan Thermostatted Autosampler. vitamin B

kompleks, Tiamin, Nikotinamid, dan Piridoksin telah digunakan dianalisis dalam
berbagai bahan makanan termasuk susu produk dan sereal untuk anak kecil dan
bayi Ketiga vitamin dipelajari dalam sampel produk makanan di bawah yang
direkomendasikan nilai-nilai dan itu memastikan bahwa pemeriksaan yang sesuai
dan keseimbangan diperlukan untuk mengendalikan dan menjaminkan kualitas jenis
makanan yang diperkaya untuk bayi. Juga dukungan yang lebih akurat untuk
vitamin harus diikuti untuk variasi seperti yang terlihat dalam penelitian ini.
 DAFTAR
PUSTAKA

Naz, N., Khasif, A., Sheikh, W., Abbas, M., Khan,

A. M., 2016. Analysis of Water Soluble
Vitamins (Thiamine, Nicotinamide and
Pyridoxine) in Fortified Infant Food Products by
HPLC. Oriental Journal Of Chemistry, Vol. 32,
No. (2): Pg. 947-953.
Cover

Thank You
Insert the Sub Title
of Your Presentation