Anda di halaman 1dari 7

BIOTEKNOLOGI

NAMA KELOMPOK 4
“TACHYCTIN”

1. WAHYU KHOLIFATUL JANNAH (1012017012)


2. NIKE ARDIANTI (1012018034)
3. NUR HIDAYAH (1012017005)
4. NOVA PURNAMA SARI (1012017018)
5. ANDRIS DWI SAPUTRO (1012017026)
6. FERNANDA ILHAM
7. ERWIN
Produksi dan karakterisasi dari
tachycitin rekombinan, protein yang Judul Jurnal
mengikat chytin kaya akan sistein

Untuk mengoptimalkan kondisi


eksperimental pelipatan rTcn yang
terdenaturasi diperoleh dari kromatografi Tujuan Penelitian
pertukaran kation (SP-Sepharose FF
kolom), yang dilakukan pada badan inklusi
e-coli yang mengandung rTcn.
METODE YANG DIGUNAKAN

Vector / Plasmid

 Pet-22b (+)

Gen pengkode protein

 TTG-ACG-TCG-AGC-TGG-TAT-ACA-TGG-ACC-GAA-AAG-CAA-
CGCC- 3 untuk 5 primer

TTG-ACGT-CCT-CGA-GCT-TAA-GAA-TAC-AA-AGG-TT-CTA-
CTG-TAAG
Protein yang diproduksi
 rTcn (rekombinan tacycitn)

Sistem ekspresi yang digunakan

 Escherichia Coli BL21 (Bakteri)

Cara purifikasi protein


 Setelah tambahan 3-4 hari waktu inkubasi, sel–sel dipanen dengan
sentrifugasi . Sel yang sudah dipanen dirusak dengan ultrasonikator. Pada
e-coli diisolasi menggunakan sentrifugasi selama 20menit pada suhu 4c.
Dan dicuci dengan air suling. Larutan yang mengandung badan inklusi
dipisahkan dengan menggunakan kolom SP- Sepharose FF. (setelah
dipisah)
 Larutan yang dihasilkan dimasukan kedalam HPLC, (dipisahkan lagi) larutan
yang mengandung rtcn dimasukan kedalam kolom anfinitas kitin.
 Kemudian dari kitin lebih lanjut dianalisis spektrometri masa dengan MALDI
TOF.
ALUR KERJA ATAU BAGIAN METODE SEDERHANA

rTcn Siklus diulang


terdenaturasi 30x lakukan
Denaturasi Ekstensi pemurnian
(kromotografi)
dengan GFX

Purifikasi Ekspresi Inkubasi IPTG Sel dipanen

Data NMR
Sds-page- diperoleh
Disentrifungi HPLC menggunakan
spektroskope
NMRpipe

Hasil
KESIMPULAN

1. Endapan diperoleh setelah setrifugasi


terhadap suspensi yang mengandung
jumlah kelebihan kitin.
2. Hasil menunjukan bahwa rtcn memiliki
kemampuan mengikat kitin.
3. Tahcytin asli mengurangi jamur dan bakteri
sedangkan rTcn mempertahankan aktvitas
antimikroba terhadap jamur tetapi tidak
memiliki aktivitas terhadap bakteri.
TERIMAKASIH