Modul

Kromatografi Konvensional

Penulis : Rusmini S.Pd., M.Si

Email : Rusmini@unesa.ac.id
Penelaah :
Email :

Modul 7 pada BMP lama

 Kegiata
n
belajar

1. Kromatografi kertas

2. Kromatografi lapis tipis

(KLT)
 Kromatografi Kertas
Prinsip:
Fasa gerak: cair (pelarut organik)

Fasa diam: cair (air) yang disokong oleh

molekul selulosa dari kertas

Ingat !!
Kertas bukan fasa diam tetapi hanya
support untuk air
Kromatografi kertas normal:
Cairan fasa diam lebih polar daripada
fasa gerak

Kromatografi kertas terbalik:

kepolaran fasa diam di bawah/lebih
rendah daripada fasa gerak
 Identifikasi noda
1.Penyinaran di bawah lampu UV
2.Pengeringan kertas hasil elusi pada
suhu tinggi

3.Menyemprot kertas dengan

pereaksi yang menimbulkan warna
 1. Pemilihan
pelarut
1.Letakkan satu tetes sampel pada KLT di
tempat yang berbeda

2. Teteskan pada masing-masing spot

sampel dengan pelarut yang berbeda

3.Perhatikan bentuk pengembangan sampel

4.Putuskan solvent yang paling sesuai

not polar too polar

enough polar
2. Preparing Chamber
a. Prepare a clean chamber
b. Prepare a piece of filter paper
c. Put the filter paper inside the chamber
around the wall of chamber
d. Pour about 5 ml of suitable solvent into
the chamber
e. Close the chamber tightly
f. Wait until the whole paper getting wet
 3. Preparing and spotting the plate
a. Heat the plate in an oven to remove water
from the silica
b. Draw two lines on the plate at about
0.5 cm from the top and 1.0 cm from
the bottom
c. Put a spot of sample on the bottom line
Make sure the spot clear enough.
d. Wait until the spot dry

4. Developing sample
a. Put the plate on the chamber
prepared before carefully
b. Make sure that the solvent does not
touch the spot
c. Let the solvent develop until it reaches
the top line
d. Lift the plate from the chamber
5. Calculating Rf.
 Analisis kualitatif dan kuantitatif

Analisis kualitatif dengan harga Rf

yang dibandingkan dengan Rf dari
standar

Analisis kuantitatif dengan:

a. Menghitung luas noda sampel dan
standar
b. Menghitung massa noda sampel
dan standar
   𝑙𝑢𝑎𝑠𝑛𝑜𝑑𝑎 𝑠𝑎𝑚𝑝𝑒𝑙
𝑘𝑜𝑛𝑠𝑒𝑛𝑡𝑟𝑎𝑠𝑖 𝑠𝑎𝑚𝑝𝑒𝑙= 𝑥𝑘𝑜𝑛𝑠𝑒𝑡𝑟𝑎𝑠𝑖 𝑠𝑡𝑎𝑛𝑑𝑎𝑟
𝑙𝑢𝑎𝑠𝑛𝑜𝑑𝑎 𝑠𝑡𝑎𝑛𝑑𝑎𝑟
  𝑚𝑎𝑠𝑠𝑎𝑙𝑢𝑎𝑠𝑎𝑛𝑛𝑜𝑑𝑎𝑠𝑎𝑚𝑝𝑒𝑙
𝑘𝑜𝑛𝑠𝑒𝑛𝑡𝑟𝑎𝑠𝑖𝑠𝑎𝑚𝑝𝑒𝑙= 𝑥𝑘𝑜𝑛𝑠𝑒𝑛𝑡𝑟𝑎𝑠𝑖𝑠𝑡𝑎𝑛𝑑𝑎𝑟
𝑚𝑎𝑠𝑠𝑎𝑙𝑢𝑎𝑠𝑎𝑛𝑛𝑜𝑑𝑎𝑠𝑡𝑎𝑛𝑑𝑎𝑟
 Kromatografi Lapis Tipis (KLT)

• Fasa diam: lapisan tipis berupa padatan

(silica gel, alumina, selulosa, piliamida,
tanah diatome)

• Fasa gerak: cair (pelarut organik) bisa

tunggal atau campuran

• Senyawa polar akan mudah terelusi oleh

fasa gerak polar pada fasa diam yang
nonpolar
• Cara kerja KLT
• tehnik elusi KLT Sama dengan
kromatografi
• identifikasi noda kertas
• Analisis kualitatif
 Analisis kuantitatif

• Noda sampel pada KLT dikerok

• Ditambahkan pelarut yang sesuai
• Diukur dengan spektroskopi UV-Vis
  𝑎𝑏𝑠𝑜𝑟𝑏𝑎𝑛𝑠𝑖 𝑠𝑎𝑚𝑝𝑒𝑙
𝑘𝑜𝑛𝑠𝑒𝑛𝑡𝑟𝑎𝑠𝑖 𝑠𝑎𝑚𝑝𝑒𝑙= 𝑋 𝑘𝑜𝑛𝑠𝑒𝑛𝑡𝑟𝑎𝑠𝑖𝑠𝑡𝑎𝑛𝑑𝑎𝑟
𝑎𝑏𝑠𝑜𝑟𝑏𝑎𝑛𝑠𝑖 𝑠𝑡𝑎𝑛𝑑𝑎𝑟