Pharmaceutical
Pharmaceutical
Biopharmaceutical
Properties
Aufa, Angel, Nadhia
INTRODUCTION
Sifat biofarmasetik yang akan dinilai dan yg memberikan pengaruh ke dalam penyerapan suatu obat adalah:
• Permeabilitas;
usus bagian atas dan kemungkinan akan diberi dosis 15-30 menit, dalam medium yang mensimulasikan
dalam keadaan puasa cairan lambung pada fast state
obat harus diberikan dengan makanan, dan diketahui beberapa jam dalam durasi, dengan berbagai media
diserap dengan baik di sepanjang saluran pencernaan seperti , simulasi cairan lambung untuk keadaan makan,
simulasi cairan usus untuk makan dan kemudian
keadaan puasa
The relevance of drug dissolution and
dissolution testing
A drug can permeate the intestinal mucosa only in its dissolved state. If the
solubility of the drug in the gastrointestinal aqueous fluids is limited, dissolution
will be the rate-limiting step in absorption, and will dictate the rate and extent to
which the drug becomes available in the bloodstream. Because of the link
between oral bioavailability and dissolution, most oral drug products such as
suspensions, granules, pellets, tablets and capsules are currently required to be
tested for their dissolution characteristics
The clinical relevance of the observations of Edwards was realized only in the mid-
1960s, when several reports linking dissolution data with clinical efficacy, inferior
efficacy and even toxicity of some commercial oral solid drug products were
made available. For example, clinical inadequacies with formulations of the oral
antidiabetic and poorly water-soluble drug tolbutamide were documented.
Ineffective tablets were shown to disintegrate and dissolve at a slower rate than
those which were clinically effective
However, undoubtedly the reference case for the impact of drug dissolution on
oral bioavailability was that of digoxin tablets. In the early 1970s, several marketed
formulations of digoxin were shown to yield up to sevenfold differences in blood
levels of the drug. In the search for an explanation, digoxin tablet formulations
were studied for their dissolution properties, exposing huge differences in this
parameter. Interestingly, a good correlation was noted between the dissolution
rate and digoxin blood levels. In other words, absorption of digoxin was higher for
those formulations which dissolved more quickly (Fig. 35.2). In contrast, the
disintegration time of the different tablets was very similar and bore no relation to
digoxin blood levels, raising questions as to the value of the disintegration test in
detecting differences in the oral bioavailability of solid drug products.
In light of these cases, it became
clear that the formulation and
manufacturing process was linked
to the therapeutic efficacy of the
drug. Dissolution, and not
disintegration, became an
accepted indicator of oral
bioavailability of solid drug
products
2. Stabilitas pada Cairan Fisiologis
❏ Stabilitas obat dalam cairan gastrointestinal dapat dinilai dengan simulasi media lambung dan usus atau dengan
memperoleh cairan gastrointestinal dari manusia atau hewan .
❏ Stabilitas obat dalam cairan fisiologis (dalam kasus obat yang diberikan secara oral, cairan gastrointestinal) tergantung pada dua
faktor:
➔stabilitas kimia obat di seluruh rentang pH gastrointestinal
➔kerentanannya terhadap pemecahan enzimatik oleh cairan gastrointestin
❏ Secara umum obat diinkubasi dengan real fluid atau simulasi pada suhu 37 ° C selama 3 jam dan kandungan obat dianalisis.
Hilangnya lebih dari 5% obat menunjukkan potensi ketidakstabilan
Contoh assessment pada cairan GI
OBAT PENILAIAN KETERANGAN
Obat-obatan yang masih Resistensi terhadap enzim Enzim bakteri mampu menghasilkan
berada di lumen bakteri yang ada di bagian sejumlah reaksi. Mungkin ada bagian yang
gastrointestinal ketika usus signifikan dari obat yang kurang larut
mencapai daerah kolon masih dalam saluran pencernaan pada saat
mencapai usus besar
Obat diserap sepanjang Rentan terhadap degradasi Apabila rentan, mk penyerapan obat dan
saluran pencernaan atau metabolisme oleh bioavailabilitasnya cenderung berkurang
enzim bakteri di dalam
saluran pencernaan
A. Koefisien Partisi
● memberikan ukuran lipofilisitas suatu molekul, yang dapat digunakan untuk memprediksi seberapa baik ia dapat melintasi
membran biologis
● Ditandai dgn log P dan log D
● Salah satu cara paling umum untuk mengukur koefisien partisi adalah
dengan menggunakan metode shake-flask (Gbr. 21.2). Ini bergantung
pada distribusi keseimbangan obat antara minyak dan fase berair.
● Obat harus ditambahkan ke fase berair dan fase minyak. Sistem
dicampur dan kemudian dibiarkan mencapai kesetimbangan (biasanya
setidaknya 24 jam). Dua fase dipisahkan dan konsentrasi obat diukur
dalam setiap fase dan koefisien partisi dihitung.
Other method
● Komputasi
● Metode Moriguchi
● HPLC
B. Cell Culture
● Teknik kultur sel untuk mengukur penyerapan molekul oleh molekul telah semakin banyak digunakan dalam beberapa dekade
terakhir dan sekarang menjadi model yang diterima dengan baik untuk penyerapan.
● Sel yang paling banyak digunakan adalah Caco-2.
● Sel-sel Caco-2 adalah garis sel karsinoma usus manusia yang pertama kali diusulkan dan ditandai sebagai model untuk
penyerapan obat oral
● Dalam kultur, sel Caco-2 secara spontan berdiferensiasi untuk membentuk monolayer enterosit yang terpolarisasi. Enterosit ini
mirip dengan yang ada di usus kecil, karena mereka memiliki mikrovili dan banyak sistem transporter yang ada di usus kecil.
Bagaimana CaCO-2 dapat menjelaskan
permeabilitas?
Lapisan tunggal Caco-2 juga dapat digunakan untuk menjelaskan mekanisme permeabilitas.
● Jika koefisien permeabilitas yang jelas ditemukan meningkat secara linier dengan meningkatnya konsentrasi obat (yaitu transpor
tidak jenuh), sama apakah transpor obat diukur dari apikal ke arah basolateral atau dari basolateral ke arah apikal, dan terlepas
dari pH, dapat disimpulkan bahwa transpor bersifat pasif dan bukan proses aktif.
● Jika transpor dalam basolateral ke arah apikal secara signifikan lebih besar dari pada apikal ke arah basolateral, maka ada
kemungkinan bahwa obat secara aktif dikeluarkan dari sel oleh transporter countermembran, seperti P-glikoprotein.
● Jika pengangkutan obat juga dihambat oleh adanya senyawa yang dikenal sebagai penghambat P-glikoprotein, ini memberikan
indikasi lebih lanjut bahwa obat tersebut rentan terhadap efflux P-glikoprotein.
● Untuk membantu menjelaskan apakah transporter membran lain terlibat dalam penyerapan obat tertentu, studi
penghambatan kompetitif lebih lanjut dapat dilakukan dengan inhibitor yang diketahui dari transporter tertentu. Misalnya,
dipeptida glikosilsarcosin dapat digunakan untuk menyelidiki apakah transporter dipeptida terlibat dalam penyerapan obat
tertentu.
● To evaluate whether a compound is absorbed via the paracellular pathway or the transcellular pathway, the tight
junctions can be artificially opened with compounds such as EDTA, which chelates calcium. Calcium is involved in keeping the
junctions together. If the apparent permeability of a compound is not affected by the opening of these junctions, which can be
assessed by use of a paracellular marker such as mannitol, one can assume the drug transport is via a transcellular pathway.
C. Tissues Tehniques
Dua cara yang lebih populer adalah penggunaan lembaran mukosa usus yang terisolasi
dan penggunaan cincin usus terbalik
Lembaran mukosa usus yang terisolasi
● Usus tikus biasanya lebih disukai untuk studi penyerapan karena permeabilitasnya berkorelasi baik
dengan usus manusia
● Sistem ini juga dapat digunakan untuk menyelidiki transportasi aktif.
● Satu keuntungan dari teknik ini dibanding teknik kultur sel adalah bahwa permeabilitas di
berbagai daerah usus dapat dinilai.
● Hal ini sangat membantu untuk dapat membandingkan permeabilitas di seluruh jaringan
usus dan usus besar, terutama ketika seseorang menilai apakah suatu obat cocok untuk
sistem pengiriman lepas yang terkontrol
Cara Kerja
● Lembaran mukosa usus yang terisolasi disiapkan dengan memotong usus menjadi potongan-
potongan.
● Otot-otot kemudian dikeluarkan dan lembaran dipasang dan dijepit dalam ruang difusi atau
ruang diisi dengan buffer biologis yang sesuai.
● Resistensi transepitel diukur di seluruh jaringan untuk memeriksa integritasnya.
● Sistem dipertahankan pada suhu 37 ° C dan diaduk sehingga ketebalan lapisan air yang tidak
tercemar dikontrol dan oksigen diberikan ke jaringan.
● Obat ditambahkan ke ruang donor dan jumlah yang terakumulasi dalam ruang penerima diukur
sebagai fungsi waktu.
● Permeabilitas di seluruh jaringan kemudian dapat dihitung
Cincin usus terbalik (Everted Intestinal Rings)
● Cincin usus terbalik menggunakan seluruh segmen usus daripada hanya lembaran.
● Keuntungan dari penggunaan cincin usus adalah bahwa tes ini relatif sederhana dan cepat
dilakukan.
● Sejumlah besar cincin dapat disiapkan dari setiap segmen usus, yang memungkinkan setiap
hewan untuk bertindak sebagai kontrolnya sendiri.
● Selain itu, kondisi percobaan dapat dimanipulasi dan memberikan wawasan tentang mekanisme
penyerapan.
● Kerugian dari sistem ini adalah sistem ini bersifat biologis dan harus diperhatikan untuk
menjaga kelangsungan jaringan selama percobaan. Ketika obat dimasukkan ke dalam cincin,
jaringan perlu dicerna dan obat diekstraksi sebelum diuji. Ini menghasilkan persiapan sampel
yang panjang dan mempersulit prosedur pengujian.
Cara Kerja
● Segmen usus dipotong, biasanya dari tikus.
● Segmen kemudian diikat di satu ujung dan hati-hati terbalik dengan menempatkannya di atas
batang kaca.
● Lalu dipotong menjadi bagian-bagian kecil atau cincin, dan cincin-cincin ini diinkubasi dalam
buffer berisi obat teroksigenasi diaduk pada 37 ° C.
● Setelah jangka waktu tertentu, penggunaan obat dipadamkan dengan cepat membilas cincin
dengan penyangga dingin dan mengeringkannya dengan hati-hati. Cincin kemudian diuji untuk
kandungan obat, dan jumlah obat yang diambil per gram jaringan basah selama periode waktu
tertentu dihitung (mol g − 1 kali − 1).
D. Perfussion Studies
● Dalam model-model ini 'tingkat penyerapan' dihitung dengan mengukur hilangnya obat dari lumen dan bukan akumulasi
dalam plasma. Oleh karena itu penting untuk memeriksa bahwa obat tersebut tidak terdegradasi di lumen atau
dinding usus karena obat yang telah hilang akan secara keliru dianggap telah diserap
● Cara ini didasarkan atas asumsi bahwa obat yang dicobakan stabil, tidak mengalami metbolisme dalam lumen usus, sehingga
hilangnya obat dari lumen usus akan muncul dalam darah atau plasma darah, atau dengan perkataan lain hilangnya obat dari lumen
usus tersebut adalah karena proses absorbsi.
● Metode ini dapat digunakan untuk mempelajari berbagai factor yang dapat berpengaruh pada permeabilitas dinding usus dari
berebagai macam obat.
● Pengembangan lebih lanjut dapat digunakan untuk merancang obat dalam upaya mengoptimalkan kecepatan absorbsinya melalui
pembentukan prodrug, khususnya untuk obat-obat yang sangat sulit atau praktis tidak dapat terabsorbsi.
● Melalui metode ini akan dapat diungkapkan pula besarnya permeabilitas membran usus terhadap obat melalui lipoid pathway, pori, dan
aqueous boundary layer
Cara Kerja
● larutan obat dengan kadar tertentu dilewatkan melalui lumen usus halus secara perfusi dengan kecepatan tertentu. Adapun caranya
adalah usus dilubangi untuk masuknya ujung kanul, satu kanul di bagian ujung atas usus untuk masuknya sampel cairan percobaan
dan satu lagi bagian bawah untuk keluarnya cairan tersebut.
● Kerugian dari sistem perfusi ini adalah bahwa ketika mereka menjadi lebih kompleks, sejumlah besar hewan diperlukan untuk
menetapkan kondisi perfusi yang sesuai dan kemampuan reproduksibilitas teknik. Namun, secara umum, seiring dengan
meningkatnya kompleksitas, demikian juga jumlah informasi yang diperoleh.
E. Assessment of permeability in humans
Studi perfusi usus Pendekatan noninvasif
cara paling umum untuk mengevaluasi penyerapan obat pada pendekatan berbasis teknik telah dikembangkan untuk
manusia adalah dengan melakukan studi bioavailabilitas dan mengevaluasi penyerapan obat dalam saluran pencernaan.
mendekonvolusi data yang tersedia untuk menghitung laju
penyerapan konstan.
Penyerapan obat dihitung dari tingkat hilangnya obat dari segmen Kapsul InteliSite adalah perangkat pengiriman frekuensi radio
perfusi. yang diaktifkani. Kapsul dapat diisi dengan formulasi cair atau
bubuk, dan transit kapsul diikuti oleh γ-skintigrafi (lihat nanti
dalam bab ini). Setelah kapsul mencapai tempat pelepasan yang
diinginkan, obat diaktifkan secara eksternal
Teknik ini telah memberikan kontrol yang lebih besar dalam Kapsul Enterion serupa karena mengandung reservoir obat dan
perfusi usus manusia, terutama karena itu mengisolasi isi luminal γ-skintigrafi yg digunakan untuk menemukan kapsul di saluran
pencernaan. Namun, muatannya dilepaskan melalui medan
yang menarik, dan telah sangat memudahkan studi mekanisme
elektromagnetik yang memicu aktuasi pegas yang menghasilkan
permeabilitas dan metabolisme obat-obatan dan nutrisi dalam pelepasan langsung formulasi sebagai bolus. Untuk kedua sistem
usus manusia. ini, sampel darah perlu diambil untuk mengukur penyerapan obat.
4. PRESISTEMIC METABOLISM
Metabolisme presistemik
•Metabolisme ini dapat ditinjau dengan model perfusi yang melibatkan usus dan hati.
Contoh :
Ditinjau melalui sel usus dengan :
1.Preparasi membran batas sikat yang mengandung banyak enzim hidrolitik
2.Preparasi yang dihomogenisasi dari segmen usus tikus
Obat-obatan diinkubasi dengan preparasi membran border sikat atau homogenat
dinding usus pada suhu 37 ° C dan dianalisis kandungan obatnya.
Metabolisme presistemik
5. Durasi → periode kons. Obat dalam plasma > kons, efektif plasma min.
7. Waktu Konsentrasi Puncak → waktu utk mencapai kons. Plasma puncak obat
setelah pemberian dosis tunggal (Tmax).
8. Area di bawah Kurva Waktu Konsentrasi Plasma → berhub. Dengan jumlah total
obat yang diserap ke dalam sirkulasi sistemik setelah pemberian dosis tunggal
(AUG)
Penggunaan kurva konsentrasi-waktu plasma dalam Bioavailabilitas
•pemberian dosis tunggal yang sama dari tiga formulasi berbeda, A, B dan C, dari obat yang sama
untuk individu sehat yang sama dengan rute administrasi yang sama pada tiga kesempatan terpisah
dapat dipertimbangkan
Asumsikan faktor-faktor dibawah ini, sama pada setiap kesempatannya. Faktor tersebut antara lain:
1.Waktu untuk administrasi setiap formulasi
2.Kinetika dan pola distibusi obat
3.Fenomena pengikatannya
4.Kinetika eliminasi
5.Kondisi eksperimental pada setiap profil waktu konsentrasi plasma diperoleh
Penggunaan kurva konsentrasi-waktu plasma dalam Bioavailabilitas
Hasil :
- Formulasi B, yang memberikan laju penyerapan lebih lambat daripada A, menunjukkan onset terapi
yang lebih lambat daripada A, tetapi konsentrasi plasma puncaknya berada dalam kisaran terapeutik.
Selain itu, durasi aksi efek terapeutik yang diperoleh dengan formulasi B lebih panjang daripada yang
diperoleh dengan A. Oleh karena itu formulasi B nampaknya lebih unggul daripada formulasi A dari
sudut pandang klinis, di mana konsentrasi plasma puncaknya terletak dalam kisaran terapi. obat dan
durasi efek terapeutik lebih lama
- Formulasi C memberikan area yang jauh lebih kecil di bawah kurva waktu konsentrasi plasma,
menunjukkan bahwa proporsi dosis yang lebih rendah telah diserap. bersama dengan laju penyerapan yang
lebih lambat dari formulasi C (waktu konsentrasi puncak lebih lama daripada formulasi A dan B), menghasilkan
konsentrasi plasma puncak tidak mencapai konsentrasi efektif minimum, yaitu formulasi C tidak menghasilkan efek
terapi. dan akibatnya secara klinis tidak efektif sebagai dosis tunggal
Cont
faktor -faktor yang menyebabkan terjadinya perbedaan yang memengaruhi
bioavailabilitas obat, antara lain :
1. Berat badan
2. Jenis kelamin dna usia subjek uji
3. Asupan makanan dan air
4. Pemberian obat lain secara bersamaan
5. Stress
6. Waktu pemberian obat
Kurva ekskresi obat kemih kumulatif
Pengukuran konsentrasi obat utuh dan / atau metabolitnya dalam plasma juga dapat
digunakan untuk menilai ketersediaan hayati. Ketika metode uji spesifik yang sesuai
tidak tersedia untuk obat utuh dalam urin, atau metode uji spesifik yang tersedia
untuk obat induk tidak cukup sensitif, mungkin perlu untuk menguji metabolit utama
atau obat utuh ditambah metabolitnya dalam urin untuk mendapatkan indeks
ketersediaan hayati.
cont
Parameter penting dalam studi ekskresi urin adalah Jumlah kumulatif obat utuh
dan/atau metabolit yang diekskresikan dan laju ekskresi tersebut.
cont
- Kurva ini diperoleh dengan mengumpulkan sampel urin (yang dihasilkan
dari pengosongan total kandung kemih) pada interval yang diketahui
setelah dosis tunggal obat diberikan)
- Sampel urin harus dikumpulkan sampai semua obat dan / atau
metabolitnya diekskresikan (ini ditunjukkan oleh kurva ekskresi urin
kumulatif yang sejajar dengan absis) jika perbandingan tingkat
penyerapan obat yang diberikan dari formulasi atau bentuk sediaan yang
berbeda harus dibuat
Cont
Kurva ekskresi urin
kumulatif tipikal dan
kurva konsentrasi-
waktu plasma terkait
yang diperoleh setelah
pemberian dosis
tunggal obat yang
diberikan melalui rute
oral ke subjek
cont
● Segmen awal (XY) kurva mencerminkan 'fase penyerapan' (yaitu di mana penyerapan
adalah proses dominan) dan kemiringan segmen ini dari kurva ekskresi urin terkait dengan
tingkat penyerapan obat ke dalam darah.
● Jumlah total obat utuh (dan / atau metabolitnya) diekskresikan dalam urin pada titik Z sesuai
dengan waktu di mana konsentrasi plasma obat utuh adalah nol dan pada dasarnya semua
obat telah dihilangkan dari tubuh.
● Jumlah total obat yang diekskresikan pada titik Z mungkin sangat berbeda dari jumlah total
obat yang diberikan (yaitu dosis), baik karena penyerapan yang tidak lengkap pada karena
obat dieliminasi oleh proses selain dari ekskresi urin.
Cont.
● laju kemunculan obat dalam urin (yaitu kemiringan segmen awal dari setiap
kurva ekskresi urin) dari setiap formulasi berkurang dalam urutan A> B> C.
Karena jumlah total dari obat utuh yang diekskresikan diasumsikan
berhubungan dengan jumlah total yang diserap
Cont. (Gambar 21.12)
● formulasi A dan B menunjukkan bahwa tingkat penyerapan obat dari kedua
formulasi ini adalah sama
● formulasi C menunjukkan tidak hanya bahwa formulasi ini menghasilkan
tingkat yang lebih lambat dari penampilan obat utuh dalam urin tetapi juga
bahwa jumlah total obat yang akhirnya diekskresikan jauh lebih sedikit
daripada dari dua formulasi lainnya.
Bioavalilabilitas relatif
● adalah ukuran fraksi (atau persentase) dari obat yang diberikan yang diserap
secara utuh ke dalam sirkulasi sistemik dari bentuk sediaan relatif ke bentuk
sediaan standar yang diakui (terbukti secara klinis) dari obat tersebut.
cont
● Ketersediaan hayati relatif dari obat yang diberikan yang diberikan pada dosis
yang sama dari bentuk sediaan uji dan bentuk sediaan standar yang diakui,
masing-masing, dengan rute pemberian yang sama untuk individu yang sama
pada kesempatan yang berbeda dapat dihitung dari kurva waktu konsentrasi
plasma yang sesuai.
● sering digunakan untuk menentukan efek perbedaan bentuk sediaan pada
bioavailabilitas sistemik dari obat yang diberikan
Faktor bentuk sediaan yang dapat memengaruhi
ketersediaan hayati obat
● Jenis dan bentuk sediaan (mis. Tablet, larutan, suspensi dll)
● Perbedaan dalam formulasi jenis dan bentuk sediaan tertentu
● Variabel pabriikan dalam produksi jenis bentuk sediaan tertentu
Bioavailabilitas absolut
Bioavailabilitas absolut dari obat yang diberikan dari bentuk sediaan adalah fraksi
(atau persentase) dari dosis yang diberikan yang diserap secara utuh ke dalam
sirkulasi sistemik.