Assessment of

Biopharmaceutical
Properties
Aufa, Angel, Nadhia
INTRODUCTION

Sifat biofarmasetik yang akan dinilai dan yg memberikan pengaruh ke dalam penyerapan suatu obat adalah:

• Kemampuan melepaskan ZA dari bentuk sediaan ke dalam cairan di situs penyerapan;

• Stabilitas dalam cairan fisiologis;

• Permeabilitas;

• Kerentanan terhadap pembersihan pra-sistemik.

MEASUREMENT OF KEY
BIOPHARMACEUTICAL
PROPERTIES
1. Pelepasan Obat ke dalam Cairan GI

❏ Diukur dengan DISOLUSI

❏ - Tujuan dari pengujian disolusi adalah untuk menemukan karakteristik in vitro pd formulasi yg potensial yang dapat
mencerminkan kinerja in vivo obat.
❏ - That’s why dia harus mirip bgt sama kondisi GI Tract
❏ - Korelasi in vitro / in vivo hanya mungkin dilakukan untuk obat-obatan ketika disolusi merupakan salah satu penghambat laju
dalam proses penyerapannya, yaitu obat2 yg sulit larut dalam air
❏ TUJUAN
1.Untuk pengembangan obat baru
2.Mengurangi clinical studies
Uji Disolusi
● Menentukan penuh profil disolusi obat di sejumlah media yang berbeda secara fisiologis akan membantu pemahaman tentang
faktor-faktor yang mempengaruhi angka tersebut dan tingkat disolusi.
● Profil juga bisa digunakan untuk menghasilkan korelasi in vitro / in vivo. Untuk Mencapai ini, setidaknya tiga batch yang
berbeda in vivo serta perilaku in vitro mereka seharusnya tersedia.
● Perbedaan dalam profil in vivo perlu dicerminkan oleh formulasi in vitro. Biasanya, kondisi uji in vitro bisa
dimodifikasi agar sesuai dengan data in vivo untuk mencapai korelasi.
● Dari Perspektif QA Metode disolusi yang lebih diskriminatif lebih disukai karena uji akan menunjukkan kemungkinan
perubahan pada produk sebelum kinerja in vivo terpengaruh.
● Larutan berbasis asam hidroklorat encer pada pH 1.2 dapat mensimulasikan cairan lambung, dan larutan fosfatebuffered pada pH
6,8 dapat meniru usus cairan.media disolusi yang lebih mirip akan mampu mewakili kondisi fisiologis mungkin
memberikan kondisi yang lebih sama.
● Dalam kondisi fed state kondisi perut sangat tergantung pada komposisi makanan dimakan dan karenanya sulit untuk
disimulasikan. Dalam mencoba menghasilkan korelasi in vitro / in vivo disarankan bahwa cara simulasi cairan lambung
yang lebih tepat adalah dengan menghomogenkan makanan untuk digunakan dalam studi klinis dan kemudian
encerkan dengan air Susu jg dapat digunakan untuk mensimulasikan kondisi lambung dalam keadaan fed state.
● Dalam menetukan durasi uji disolusi harus tergantung pada tempat penyerapan obat dan waktu pemberiannya. Diperhatikan juga
permeabilitas obatnya. Contoh:

Tempat penyerapan obat Durasi dan media

usus bagian atas dan kemungkinan akan diberi dosis 15-30 menit, dalam medium yang mensimulasikan
dalam keadaan puasa cairan lambung pada fast state

obat harus diberikan dengan makanan, dan diketahui beberapa jam dalam durasi, dengan berbagai media
diserap dengan baik di sepanjang saluran pencernaan seperti , simulasi cairan lambung untuk keadaan makan,
simulasi cairan usus untuk makan dan kemudian
keadaan puasa
The relevance of drug dissolution and
dissolution testing
A drug can permeate the intestinal mucosa only in its dissolved state. If the
solubility of the drug in the gastrointestinal aqueous fluids is limited, dissolution
will be the rate-limiting step in absorption, and will dictate the rate and extent to
which the drug becomes available in the bloodstream. Because of the link
between oral bioavailability and dissolution, most oral drug products such as
suspensions, granules, pellets, tablets and capsules are currently required to be
tested for their dissolution characteristics
The clinical relevance of the observations of Edwards was realized only in the mid-
1960s, when several reports linking dissolution data with clinical efficacy, inferior
efficacy and even toxicity of some commercial oral solid drug products were
made available. For example, clinical inadequacies with formulations of the oral
antidiabetic and poorly water-soluble drug tolbutamide were documented.
Ineffective tablets were shown to disintegrate and dissolve at a slower rate than
those which were clinically effective
However, undoubtedly the reference case for the impact of drug dissolution on
oral bioavailability was that of digoxin tablets. In the early 1970s, several marketed
formulations of digoxin were shown to yield up to sevenfold differences in blood
levels of the drug. In the search for an explanation, digoxin tablet formulations
were studied for their dissolution properties, exposing huge differences in this
parameter. Interestingly, a good correlation was noted between the dissolution
rate and digoxin blood levels. In other words, absorption of digoxin was higher for
those formulations which dissolved more quickly (Fig. 35.2). In contrast, the
disintegration time of the different tablets was very similar and bore no relation to
digoxin blood levels, raising questions as to the value of the disintegration test in
detecting differences in the oral bioavailability of solid drug products.
In light of these cases, it became
clear that the formulation and
manufacturing process was linked
to the therapeutic efficacy of the
drug. Dissolution, and not
disintegration, became an
accepted indicator of oral
bioavailability of solid drug
products
2. Stabilitas pada Cairan Fisiologis
❏ Stabilitas obat dalam cairan gastrointestinal dapat dinilai dengan simulasi media lambung dan usus atau dengan
memperoleh cairan gastrointestinal dari manusia atau hewan .
❏ Stabilitas obat dalam cairan fisiologis (dalam kasus obat yang diberikan secara oral, cairan gastrointestinal) tergantung pada dua
faktor:
➔stabilitas kimia obat di seluruh rentang pH gastrointestinal
➔kerentanannya terhadap pemecahan enzimatik oleh cairan gastrointestin
❏ Secara umum obat diinkubasi dengan real fluid atau simulasi pada suhu 37 ° C selama 3 jam dan kandungan obat dianalisis.
Hilangnya lebih dari 5% obat menunjukkan potensi ketidakstabilan
Contoh assessment pada cairan GI
OBAT PENILAIAN KETERANGAN

Obat-obatan yang masih Resistensi terhadap enzim Enzim bakteri mampu menghasilkan
berada di lumen bakteri yang ada di bagian sejumlah reaksi. Mungkin ada bagian yang
gastrointestinal ketika usus signifikan dari obat yang kurang larut
mencapai daerah kolon masih dalam saluran pencernaan pada saat
mencapai usus besar

Obat diserap sepanjang Rentan terhadap degradasi Apabila rentan, mk penyerapan obat dan
saluran pencernaan atau metabolisme oleh bioavailabilitasnya cenderung berkurang
enzim bakteri di dalam
saluran pencernaan

Sustained-release or Potensi degradasi atau Jika suatu obat dimetabolisme menjadi

controlled-release metabolisme oleh enzim metabolit yang dapat diserap, potensi
bakteri toksisitas dari metabolit ini harus
dipertimbangkan.
3. Permeabilitas

A. Koefisien Partisi
● memberikan ukuran lipofilisitas suatu molekul, yang dapat digunakan untuk memprediksi seberapa baik ia dapat melintasi
membran biologis
● Ditandai dgn log P dan log D
● Salah satu cara paling umum untuk mengukur koefisien partisi adalah
dengan menggunakan metode shake-flask (Gbr. 21.2). Ini bergantung
pada distribusi keseimbangan obat antara minyak dan fase berair.
● Obat harus ditambahkan ke fase berair dan fase minyak. Sistem
dicampur dan kemudian dibiarkan mencapai kesetimbangan (biasanya
setidaknya 24 jam). Dua fase dipisahkan dan konsentrasi obat diukur
dalam setiap fase dan koefisien partisi dihitung.
Other method
● Komputasi
● Metode Moriguchi
● HPLC
B. Cell Culture
● Teknik kultur sel untuk mengukur penyerapan molekul oleh molekul telah semakin banyak digunakan dalam beberapa dekade
terakhir dan sekarang menjadi model yang diterima dengan baik untuk penyerapan.
● Sel yang paling banyak digunakan adalah Caco-2.

Apa itu sel CaCO-2?

● Sel-sel Caco-2 adalah garis sel karsinoma usus manusia yang pertama kali diusulkan dan ditandai sebagai model untuk
penyerapan obat oral

Mengapa dipilih sbg model?

● Dalam kultur, sel Caco-2 secara spontan berdiferensiasi untuk membentuk monolayer enterosit yang terpolarisasi. Enterosit ini
mirip dengan yang ada di usus kecil, karena mereka memiliki mikrovili dan banyak sistem transporter yang ada di usus kecil.
Bagaimana CaCO-2 dapat menjelaskan
permeabilitas?
Lapisan tunggal Caco-2 juga dapat digunakan untuk menjelaskan mekanisme permeabilitas.

● Jika koefisien permeabilitas yang jelas ditemukan meningkat secara linier dengan meningkatnya konsentrasi obat (yaitu transpor
tidak jenuh), sama apakah transpor obat diukur dari apikal ke arah basolateral atau dari basolateral ke arah apikal, dan terlepas
dari pH, dapat disimpulkan bahwa transpor bersifat pasif dan bukan proses aktif.
● Jika transpor dalam basolateral ke arah apikal secara signifikan lebih besar dari pada apikal ke arah basolateral, maka ada
kemungkinan bahwa obat secara aktif dikeluarkan dari sel oleh transporter countermembran, seperti P-glikoprotein.
● Jika pengangkutan obat juga dihambat oleh adanya senyawa yang dikenal sebagai penghambat P-glikoprotein, ini memberikan
indikasi lebih lanjut bahwa obat tersebut rentan terhadap efflux P-glikoprotein.
● Untuk membantu menjelaskan apakah transporter membran lain terlibat dalam penyerapan obat tertentu, studi
penghambatan kompetitif lebih lanjut dapat dilakukan dengan inhibitor yang diketahui dari transporter tertentu. Misalnya,
dipeptida glikosilsarcosin dapat digunakan untuk menyelidiki apakah transporter dipeptida terlibat dalam penyerapan obat
tertentu.
● To evaluate whether a compound is absorbed via the paracellular pathway or the transcellular pathway, the tight
junctions can be artificially opened with compounds such as EDTA, which chelates calcium. Calcium is involved in keeping the
junctions together. If the apparent permeability of a compound is not affected by the opening of these junctions, which can be
assessed by use of a paracellular marker such as mannitol, one can assume the drug transport is via a transcellular pathway.
C. Tissues Tehniques

Dua cara yang lebih populer adalah penggunaan lembaran mukosa usus yang terisolasi
dan penggunaan cincin usus terbalik
Lembaran mukosa usus yang terisolasi

● Usus tikus biasanya lebih disukai untuk studi penyerapan karena permeabilitasnya berkorelasi baik
dengan usus manusia
● Sistem ini juga dapat digunakan untuk menyelidiki transportasi aktif.
● Satu keuntungan dari teknik ini dibanding teknik kultur sel adalah bahwa permeabilitas di
berbagai daerah usus dapat dinilai.
● Hal ini sangat membantu untuk dapat membandingkan permeabilitas di seluruh jaringan
usus dan usus besar, terutama ketika seseorang menilai apakah suatu obat cocok untuk
sistem pengiriman lepas yang terkontrol
Cara Kerja
● Lembaran mukosa usus yang terisolasi disiapkan dengan memotong usus menjadi potongan-
potongan.
● Otot-otot kemudian dikeluarkan dan lembaran dipasang dan dijepit dalam ruang difusi atau
ruang diisi dengan buffer biologis yang sesuai.
● Resistensi transepitel diukur di seluruh jaringan untuk memeriksa integritasnya.
● Sistem dipertahankan pada suhu 37 ° C dan diaduk sehingga ketebalan lapisan air yang tidak
tercemar dikontrol dan oksigen diberikan ke jaringan.
● Obat ditambahkan ke ruang donor dan jumlah yang terakumulasi dalam ruang penerima diukur
sebagai fungsi waktu.
● Permeabilitas di seluruh jaringan kemudian dapat dihitung
Cincin usus terbalik (Everted Intestinal Rings)
● Cincin usus terbalik menggunakan seluruh segmen usus daripada hanya lembaran.
● Keuntungan dari penggunaan cincin usus adalah bahwa tes ini relatif sederhana dan cepat
dilakukan.
● Sejumlah besar cincin dapat disiapkan dari setiap segmen usus, yang memungkinkan setiap
hewan untuk bertindak sebagai kontrolnya sendiri.
● Selain itu, kondisi percobaan dapat dimanipulasi dan memberikan wawasan tentang mekanisme
penyerapan.
● Kerugian dari sistem ini adalah sistem ini bersifat biologis dan harus diperhatikan untuk
menjaga kelangsungan jaringan selama percobaan. Ketika obat dimasukkan ke dalam cincin,
jaringan perlu dicerna dan obat diekstraksi sebelum diuji. Ini menghasilkan persiapan sampel
yang panjang dan mempersulit prosedur pengujian.
Cara Kerja
● Segmen usus dipotong, biasanya dari tikus.
● Segmen kemudian diikat di satu ujung dan hati-hati terbalik dengan menempatkannya di atas
batang kaca.
● Lalu dipotong menjadi bagian-bagian kecil atau cincin, dan cincin-cincin ini diinkubasi dalam
buffer berisi obat teroksigenasi diaduk pada 37 ° C.
● Setelah jangka waktu tertentu, penggunaan obat dipadamkan dengan cepat membilas cincin
dengan penyangga dingin dan mengeringkannya dengan hati-hati. Cincin kemudian diuji untuk
kandungan obat, dan jumlah obat yang diambil per gram jaringan basah selama periode waktu
tertentu dihitung (mol g − 1 kali − 1).
D. Perfussion Studies
● Dalam model-model ini 'tingkat penyerapan' dihitung dengan mengukur hilangnya obat dari lumen dan bukan akumulasi
dalam plasma. Oleh karena itu penting untuk memeriksa bahwa obat tersebut tidak terdegradasi di lumen atau
dinding usus karena obat yang telah hilang akan secara keliru dianggap telah diserap
● Cara ini didasarkan atas asumsi bahwa obat yang dicobakan stabil, tidak mengalami metbolisme dalam lumen usus, sehingga
hilangnya obat dari lumen usus akan muncul dalam darah atau plasma darah, atau dengan perkataan lain hilangnya obat dari lumen
usus tersebut adalah karena proses absorbsi.

● Metode ini dapat digunakan untuk mempelajari berbagai factor yang dapat berpengaruh pada permeabilitas dinding usus dari
berebagai macam obat.

● Pengembangan lebih lanjut dapat digunakan untuk merancang obat dalam upaya mengoptimalkan kecepatan absorbsinya melalui
pembentukan prodrug, khususnya untuk obat-obat yang sangat sulit atau praktis tidak dapat terabsorbsi.

● Melalui metode ini akan dapat diungkapkan pula besarnya permeabilitas membran usus terhadap obat melalui lipoid pathway, pori, dan
aqueous boundary layer
Cara Kerja
● larutan obat dengan kadar tertentu dilewatkan melalui lumen usus halus secara perfusi dengan kecepatan tertentu. Adapun caranya
adalah usus dilubangi untuk masuknya ujung kanul, satu kanul di bagian ujung atas usus untuk masuknya sampel cairan percobaan
dan satu lagi bagian bawah untuk keluarnya cairan tersebut.

● Kerugian dari sistem perfusi ini adalah bahwa ketika mereka menjadi lebih kompleks, sejumlah besar hewan diperlukan untuk
menetapkan kondisi perfusi yang sesuai dan kemampuan reproduksibilitas teknik. Namun, secara umum, seiring dengan
meningkatnya kompleksitas, demikian juga jumlah informasi yang diperoleh.
E. Assessment of permeability in humans
Studi perfusi usus
cara paling umum untuk mengevaluasi penyerapan obat pada
manusia adalah dengan melakukan studi bioavailabilitas dan
mendekonvolusi data yang tersedia untuk menghitung laju
penyerapan konstan.
Menggunakan Loc-I-Gut
Penyerapan obat dihitung dari tingkat hilangnya obat dari segmen
perfusi.
Teknik ini telah memberikan kontrol yang lebih besar dalam
perfusi usus manusia, terutama karena itu mengisolasi isi luminal
yang menarik, dan telah sangat memudahkan studi mekanisme
permeabilitas dan metabolisme obat-obatan dan nutrisi dalam
usus manusia.
Pendekatan noninvasif
pendekatan berbasis teknik telah dikembangkan untuk
mengevaluasi penyerapan obat dalam saluran pencernaan.
Menggunakan kapsul InteliSite®, Enterion, dan MAARS
Kapsul InteliSite adalah perangkat pengiriman frekuensi radio
yang diaktifkani. Kapsul dapat diisi dengan formulasi cair atau
bubuk, dan transit kapsul diikuti oleh γ-skintigrafi (lihat nanti
dalam bab ini). Setelah kapsul mencapai tempat pelepasan yang
diinginkan, obat diaktifkan secara eksternal
Kapsul Enterion serupa karena mengandung reservoir obat dan
γ-skintigrafi yg digunakan untuk menemukan kapsul di saluran
pencernaan. Namun, muatannya dilepaskan melalui medan
elektromagnetik yang memicu aktuasi pegas yang menghasilkan
pelepasan langsung formulasi sebagai bolus. Untuk kedua sistem
ini, sampel darah perlu diambil untuk mengukur penyerapan obat.
4. PRESISTEMIC METABOLISM
Metabolisme presistemik
•Metabolisme ini dapat ditinjau dengan model perfusi yang melibatkan usus dan hati.
Contoh :
Ditinjau melalui sel usus dengan :
1.Preparasi membran batas sikat yang mengandung banyak enzim hidrolitik
2.Preparasi yang dihomogenisasi dari segmen usus tikus
Obat-obatan diinkubasi dengan preparasi membran border sikat atau homogenat
dinding usus pada suhu 37 ° C dan dianalisis kandungan obatnya.
Metabolisme presistemik

•Berbagai preparasi hati :

1. fraksi subseluler seperti mikrosom, hepatosit yang diisolasi, dan irisan hati,
digunakan untuk menentukan metabolisme hati secara in vitro.
Mikrosom dibuat -> sentrifugasi berkecepatan tinggi dari homogenat hati
(100.000 g) &sebagian besar terdiri dari fragmen retikulum endoplasma.
Mereka kekurangan enzim cystolic dan cofactors dan karenanya hanya cocok
untuk mengevaluasi beberapa proses metabolisme yang mampu dilakukan hati,
yang dikenal sebagai metabolisme fase I.
Metabolisme presistemik

•Sel hepatosit yang dibuat harus dengan segar dan hati-

hati dan hanya dapat bertahan selama beberapa jam,
sehingga sulit mendapatkan hepatosit manusia.
•Sel ini berguna untuk mengevaluasi metabolisme yang
dilakukan oleh hati, yaitu metabolisme fase I dan fase II
PENILAIAN
BIOAVAILIBILITAS
★ Pengukuran bioavailibilitas → hasil dari pelepasan obat ke dalam larutan
dalam cairan fisiologis di tempat absorpsi, kestabilan dalam cairan fisiologis
tersebut, serta permeabilitas dan metabolisme presistemiknya pada laju dan
tingkat penyerapan obat.
★ Metode (paling umum) yang digunakan → KURVA WAKTU KONSENTRASI
PLASMA DARAH.
KURVA WAKTU KONSENTRASI PLASMA
Membuat kurva waktu konsentrasi plasma → mengambil sampel darah pada
pasien yang mengonsumsi dosis tunggal secara oral, plasma darahnya diuji
sebagai konsentrasi obat periode waktu tertentu

★ Bagian kenaikan kurva → fase

absorpsi
★ Konsentrasi >> sampai mencapai
max (puncak) → Cpmax
★ Laju absorpsi > laju distribusi &
eliminasi
★ Berhentinya absorpsi obat → menunjukkan dosis bioavailibilitas telah diserap
& konsentrasi obat dikendalikan oleh laju eliminasi melalui metabolisme dan /
atau ekskresi (kurva fase eliminasi).
PARAMETER KURVA WAKTU KONSENTRASI PLASMA
PARAMETER KURVA WAKTU KONSENTRASI PLASMA

1. Konsentrasi Plasma Minimum yang Efektif (atau Terapeutik) → harus dicapai

sebelum mencapai efek terapeutik/ farmakologis, nilainya bervariatif tiap
obat.
2. Konsentrasi Aman Max → kons, obat dlm plasma yang tidak terjadi ES/ efek
toksik.
3. Rentang Terapi → respon yang diinginkan diperoleh, namun efek toksik dapat
dihindari. Tujuannya → utk mempertahankan kons. Obat plasma dalam
rentang ini.
4. Onset → waktu untuk mencapai kons. Efektif plasma min. Setelah pemberian
dosis.
PARAMETER KURVA WAKTU KONSENTRASI PLASMA

5. Durasi → periode kons. Obat dalam plasma > kons, efektif plasma min.

6. Konsentrasi Puncak → kons, tertinggi obat dalam plasma (Cpmax).

7. Waktu Konsentrasi Puncak → waktu utk mencapai kons. Plasma puncak obat
setelah pemberian dosis tunggal (Tmax).

8. Area di bawah Kurva Waktu Konsentrasi Plasma → berhub. Dengan jumlah total
obat yang diserap ke dalam sirkulasi sistemik setelah pemberian dosis tunggal
(AUG)
Penggunaan kurva konsentrasi-waktu plasma dalam Bioavailabilitas

•pemberian dosis tunggal yang sama dari tiga formulasi berbeda, A, B dan C, dari obat yang sama
untuk individu sehat yang sama dengan rute administrasi yang sama pada tiga kesempatan terpisah
dapat dipertimbangkan
Asumsikan faktor-faktor dibawah ini, sama pada setiap kesempatannya. Faktor tersebut antara lain:
1.Waktu untuk administrasi setiap formulasi
2.Kinetika dan pola distibusi obat
3.Fenomena pengikatannya
4.Kinetika eliminasi
5.Kondisi eksperimental pada setiap profil waktu konsentrasi plasma diperoleh
Penggunaan kurva konsentrasi-waktu plasma dalam Bioavailabilitas

Hasil :

- Konsentrasi plasma puncak berbeda

- Area dibawah kurva untuk formulasi A dan B serupa : menunjukkan bahwa
setiap obat diserap sampai tingkat yang sama pada kedua formulasi
- Waktu konsentrasi plasma puncak menunjukkan obat lebih cepat diserap dari
A daripada dari B, sehingga formulasi A menunjjukan awal yang cepat pada
tindakan terapeutik namun karena konsentrasi plasma puncak melebihi
maksimum, sehingga memungkinkan adanya ES yang toksik
cont .

- Formulasi B, yang memberikan laju penyerapan lebih lambat daripada A, menunjukkan onset terapi
yang lebih lambat daripada A, tetapi konsentrasi plasma puncaknya berada dalam kisaran terapeutik.
Selain itu, durasi aksi efek terapeutik yang diperoleh dengan formulasi B lebih panjang daripada yang
diperoleh dengan A. Oleh karena itu formulasi B nampaknya lebih unggul daripada formulasi A dari
sudut pandang klinis, di mana konsentrasi plasma puncaknya terletak dalam kisaran terapi. obat dan
durasi efek terapeutik lebih lama
- Formulasi C memberikan area yang jauh lebih kecil di bawah kurva waktu konsentrasi plasma,
menunjukkan bahwa proporsi dosis yang lebih rendah telah diserap. bersama dengan laju penyerapan yang
lebih lambat dari formulasi C (waktu konsentrasi puncak lebih lama daripada formulasi A dan B), menghasilkan
konsentrasi plasma puncak tidak mencapai konsentrasi efektif minimum, yaitu formulasi C tidak menghasilkan efek
terapi. dan akibatnya secara klinis tidak efektif sebagai dosis tunggal
Cont
faktor -faktor yang menyebabkan terjadinya perbedaan yang memengaruhi
bioavailabilitas obat, antara lain :

1. Berat badan
2. Jenis kelamin dna usia subjek uji
3. Asupan makanan dan air
4. Pemberian obat lain secara bersamaan
5. Stress
6. Waktu pemberian obat
Kurva ekskresi obat kemih kumulatif
Pengukuran konsentrasi obat utuh dan / atau metabolitnya dalam plasma juga dapat
digunakan untuk menilai ketersediaan hayati. Ketika metode uji spesifik yang sesuai
tidak tersedia untuk obat utuh dalam urin, atau metode uji spesifik yang tersedia
untuk obat induk tidak cukup sensitif, mungkin perlu untuk menguji metabolit utama
atau obat utuh ditambah metabolitnya dalam urin untuk mendapatkan indeks
ketersediaan hayati.
cont

Penilaian bioavailabilitas oleh ekskresi urin didasarkan pada asumsi

bahwa penampilan obat dan / atau metabolitnya dalam urin adalah
fungsi dari laju dan tingkat penyerapan. Asumsi ini hanya berlaku ketika
suatu obat dan / atau metabolitnya diekskresikan secara ekstensif dalam
urin, dan di mana laju ekskresi urin sebanding dengan konsentrasi obat
utuh dalam plasma darah.
cont
Proporsionalitas ini tidak berlaku jika :

1. Obat dan/ metabolitnya diekskresikan melalui proses transpor aktif ke

tubulus ginjal distal
2. Obat utuh dan/ metabolitnya asam lemah atau basa lemah (yaitu, tingkat
ekskresi mereka tergantung pada pH urin)
3. Laju ekskresi tergantung pada laju aliran urin.

Parameter penting dalam studi ekskresi urin adalah Jumlah kumulatif obat utuh
dan/atau metabolit yang diekskresikan dan laju ekskresi tersebut.
cont
- Kurva ini diperoleh dengan mengumpulkan sampel urin (yang dihasilkan
dari pengosongan total kandung kemih) pada interval yang diketahui
setelah dosis tunggal obat diberikan)
- Sampel urin harus dikumpulkan sampai semua obat dan / atau
metabolitnya diekskresikan (ini ditunjukkan oleh kurva ekskresi urin
kumulatif yang sejajar dengan absis) jika perbandingan tingkat
penyerapan obat yang diberikan dari formulasi atau bentuk sediaan yang
berbeda harus dibuat
Cont
Kurva ekskresi urin
kumulatif tipikal dan
kurva konsentrasi-
waktu plasma terkait
yang diperoleh setelah
pemberian dosis
tunggal obat yang
diberikan melalui rute
oral ke subjek
cont
● Segmen awal (XY) kurva mencerminkan 'fase penyerapan' (yaitu di mana penyerapan
adalah proses dominan) dan kemiringan segmen ini dari kurva ekskresi urin terkait dengan
tingkat penyerapan obat ke dalam darah.
● Jumlah total obat utuh (dan / atau metabolitnya) diekskresikan dalam urin pada titik Z sesuai
dengan waktu di mana konsentrasi plasma obat utuh adalah nol dan pada dasarnya semua
obat telah dihilangkan dari tubuh.
● Jumlah total obat yang diekskresikan pada titik Z mungkin sangat berbeda dari jumlah total
obat yang diberikan (yaitu dosis), baik karena penyerapan yang tidak lengkap pada karena
obat dieliminasi oleh proses selain dari ekskresi urin.
Cont.
● laju kemunculan obat dalam urin (yaitu kemiringan segmen awal dari setiap
kurva ekskresi urin) dari setiap formulasi berkurang dalam urutan A> B> C.
Karena jumlah total dari obat utuh yang diekskresikan diasumsikan
berhubungan dengan jumlah total yang diserap
Cont. (Gambar 21.12)
● formulasi A dan B menunjukkan bahwa tingkat penyerapan obat dari kedua
formulasi ini adalah sama
● formulasi C menunjukkan tidak hanya bahwa formulasi ini menghasilkan
tingkat yang lebih lambat dari penampilan obat utuh dalam urin tetapi juga
bahwa jumlah total obat yang akhirnya diekskresikan jauh lebih sedikit
daripada dari dua formulasi lainnya.
Bioavalilabilitas relatif
● adalah ukuran fraksi (atau persentase) dari obat yang diberikan yang diserap
secara utuh ke dalam sirkulasi sistemik dari bentuk sediaan relatif ke bentuk
sediaan standar yang diakui (terbukti secara klinis) dari obat tersebut.
cont
● Ketersediaan hayati relatif dari obat yang diberikan yang diberikan pada dosis
yang sama dari bentuk sediaan uji dan bentuk sediaan standar yang diakui,
masing-masing, dengan rute pemberian yang sama untuk individu yang sama
pada kesempatan yang berbeda dapat dihitung dari kurva waktu konsentrasi
plasma yang sesuai.
● sering digunakan untuk menentukan efek perbedaan bentuk sediaan pada
bioavailabilitas sistemik dari obat yang diberikan
Faktor bentuk sediaan yang dapat memengaruhi
ketersediaan hayati obat
● Jenis dan bentuk sediaan (mis. Tablet, larutan, suspensi dll)
● Perbedaan dalam formulasi jenis dan bentuk sediaan tertentu
● Variabel pabriikan dalam produksi jenis bentuk sediaan tertentu
Bioavailabilitas absolut
Bioavailabilitas absolut dari obat yang diberikan dari bentuk sediaan adalah fraksi
(atau persentase) dari dosis yang diberikan yang diserap secara utuh ke dalam
sirkulasi sistemik.

● Ketersediaan hayati absolut dapat dihitung dengan membandingkan jumlah

total obat utuh yang mencapai sirkulasi sistemik setelah pemberian dosis
yang diketahui dari bentuk sediaan melalui rute pemberian, dengan jumlah
total yang mencapai sirkulasi sistemik setelah pemberian setara.
cont
● Ketersediaan hayati absolut dari obat yang diberikan menggunakan data
plasma dapat dihitung dengan membandingkan total area di bawah kurva
waktu konsentrasi plasma yang diperoleh setelah pemberian dosis obat yang
setara melalui situs penyerapan dan melalui rute intravena pada subjek yang
sama pada subjek yang berbeda.
cont
● Ketersediaan hayati absolut menggunakan data ekskresi urin dapat
ditentukan dengan membandingkan jumlah kumulatif total dari obat
yang tidak berubah yang akhirnya diekskresikan dalam urin setelah
pemberian obat melalui tempat penyerapan dan rute intravena (injeksi
bolus), masing-masing, pada kesempatan yang berbeda dengan subjek
yang sama.
cont

Pengukuran bioavailabilitas absolut yang diperoleh dengan memberikan

obat yang diberikan dalam bentuk larutan air sederhana (yang tidak
mengendap pada pengenceran dengan cairan gastrointestinal) oleh rute
oral dan intravena memberikan wawasan tentang efek yang faktor yang
terkait dengan rute oral mungkin memiliki bioavailabilitas, misalnya
metabolisme presistem oleh usus atau hati, pembentukan kompleks
antara obat dan zat endogen (misalnya musin) di lokasi penyerapan dan
stabilitas obat dalam cairan gastrointestinal
cont
Perlu dicatat bahwa nilai yang dihitung untuk bioavailabilitas absolut hanya
akan valid untuk obat yang diperiksa jika kinetika eliminasi dan distribusi
tidak tergantung pada rute dan waktu pemberian, dan juga dari ukuran dosis
yang diberikan (jika dosis yang berbeda diberikan).
cont
Sejumlah faktor bentuk sediaan dapat memengaruhi ketersediaan hayati
suatu obat. Ini termasuk jenis bentuk sediaan (misalnya tablet, larutan,
suspensi, kapsul gelatin keras), perbedaan dalam formulasi jenis bentuk
sediaan tertentu, dan variabel pabrikan yang digunakan dalam produksi jenis
sediaan bentuk tertentu
Bioekuivalensi
Dua atau lebih produk yang setara secara kimiawi (yaitu produk yang
mengandung dosis yang sama dari bahan aktif terapeutik yang sama dalam jenis
bentuk sediaan yang sama yang memenuhi semua standar fisikokimia yang ada
dalam ringkasan resmi) dikatakan bersifat bioekivalen jika tidak berbeda secara
signifikan dalam karakteristik bioavailabilitas mereka ketika diberikan dalam dosis
yang sama dalam kondisi percobaan yang sama.
Tujuan bioekivalensi
● untuk menunjukkan kesetaraan antara produk obat generik dan produk obat
referensi untuk memungkinkan menjembatani tes praklinis dan data uji klinis,
dan oleh karena itu untuk menghindari perlunya efikasi klinis lebih lanjut atau
studi keselamatan.
Studi farmakokinetik untuk menilai bioekivalensi
● Bioekivalensi perlu ditunjukkan antara produk uji dan produk referensi, dan
sejumlah metode dapat digunakan: metode farmakokinetik, metode
farmakodinamik, metode in vitro dan studi klinis komparatif.
● Merupakan metode yang paling umum
● Perluasan dari konsep bioavailabilitas relatif
● melibatkan membandingkan jumlah total obat tertentu yang diserap secara
utuh ke dalam sirkulasi sistemik dari produk uji dan dari bentuk dosis
standar yang diakui (produk referensi).
● Desain umum untuk studi bioekivalensi adalah desain studi crossover
● Langkah-langkah farmakokinetik, seperti AUC untuk menilai tingkat paparan
sistemik dan Cmax dan tmax untuk menilai tingkat penyerapan sistemik,
dihasilkan
syarat
● Para peserta harus menjadi sukarelawan yang sehat, jika mungkin, dengan
usia yang sama / ditentukan (biasanya 18-50 tahun) dan kisaran berat badan
(dalam 10% dari berat badan ideal untuk tinggi dan pembentukan tubuh).
● Peserta pria dan wanita harus dipilih sehingga sampel lebih representatif,
kecuali ada alasan untuk mengecualikan satu jenis kelamin (misalnya untuk
kontrasepsi oral yang dimaksudkan untuk digunakan hanya pada wanita).
● Penelitian ini biasanya dilakukan dalam kondisi puasa setelah puasa
semalam sebelum pemberian dosis. Olahraga, konsumsi makanan, cairan
dan alkohol biasanya distandarisasi atau dihindari selama penelitian.
syarat
● Jumlah peserta yang dimasukkan dalam penelitian akan tergantung pada
variabilitas parameter farmakokinetik yang akan dievaluasi (AUC, Cmax,
dll.). Ini harus ditentukan dari studi sebelumnya atau studi percontohan
khusus, tingkat signifikansi yang diinginkan (α = 0,05) dan penyimpangan
dari produk referensi yang kompatibel dengan bioekivalensi normal ± 20%,
tetapi pertimbangan keamanan dan kemanjuran perlu dipertimbangkan
dalam menentukan ini.
● Jumlah minimum peserta yang diperlukan adalah 12; Namun, secara umum,
studi bioekivalensi memerlukan 18 hingga 24 peserta untuk dapat bertahan
secara statistik, tetapi untuk obat yang sangat bervariasi diperlukan jumlah
yang lebih besar.
cont
● Penilaian bioekivalensi didasarkan pada interval kepercayaan 90% untuk rasio
rata-rata geometrik populasi (tes / referensi) untuk Cmax dan AUC.
● Metode ini setara dengan dua tes satu sisi dengan hipotesis nol
bioinequivalence pada tingkat signifikansi 5%.
● Untuk parameter ini, interval kepercayaan 90% untuk rasio pengujian dan
produk referensi harus terkandung dalam interval penerimaan 80,00% hingga
125,00%.
Metode lain
● Adalah mungkin untuk menggunakan metode in vitro untuk menentukan
bioekivalensi dalam beberapa situasi dan mengesampingkan persyaratan
untuk studi bioekivalensi in vivo.
● Studi farmakodinamik, yaitu pengukuran proses patofisiologis dari waktu ke
waktu, dapat digunakan untuk menentukan bioekivalensi dari dua produk
yang berbeda. Jenis studi bioekivalensi ini kurang umum tetapi dapat
dilakukan di mana analisis kuantitatif dalam plasma atau urin tidak
dimungkinkan dengan tingkat akurasi dan sensitivitas yang memadai, atau di
mana konsentrasi plasma bukan pengganti untuk kemanjuran, misalnya
formulasi topikal yang tidak memiliki sistemik.
Cont
● Gamma scintigraphy sekarang digunakan secara luas dan memungkinkan
pengetahuan dan pemahaman yang lebih besar tentang transit dan nasib
obat-obatan dalam saluran pencernaan yang akan diperoleh
● Teknik ini melibatkan radiolabelling bentuk sediaan dengan isotop pemancar
half paruh dan aktivitas yang sesuai. Technetium-99m sering menjadi isotop
pilihan untuk studi farmasi karena waktu paruh yang singkat (6 jam)
SKEMA KLASIFIKASI BIOPHARMASI
Skema klasifikasi biofarmasi telah diusulkan yang mengklasifikasikan obat
menjadi empat kelas sesuai dengan kelarutannya di seluruh rentang pH
gastrointestinal dan permeabilitasnya di seluruh mukosa gastrointestinal (Amidon
et al 1995).
Keempat kelas tersebut adalah:

• Kelas I: kelarutan tinggi / permeabilitas rendah

• Kelas II: kelarutan rendah / permeabilitas tinggi

• Kelas III: kelarutan tinggi / permeabilitas rendah

• Kelas IV: kelarutan rendah / permeabilitas rendah.

cont
Suatu obat dianggap sangat larut dimana kekuatan dosis tertinggi larut dalam 250
mL atau kurang dari media berair pada kisaran pH 1-8. Volume berasal dari
volume minimum yang diantisipasi di perut ketika bentuk sediaan diambil dalam
keadaan puasa dengan segelas air. Jika volume media berair diambil untuk
melarutkan obat dalam kondisi pH mulai dari 1 hingga 8 lebih besar dari 250 mL
maka obat dianggap memiliki kelarutan yang rendah.
cont
Obat dianggap sangat permeabel ketika tingkat penyerapan pada manusia
diperkirakan lebih besar dari 90% dari dosis yang diberikan. Permeabilitas dapat
dinilai dengan menggunakan salah satu metode yang dibahas sebelumnya yang
telah dikalibrasi dengan senyawa standar yang diketahui atau oleh studi
farmakokinetik.
Cont - Obat Kelas I
akan larut dengan cepat ketika disajikan dalam bentuk sediaan lepas langsung,
dan juga dengan cepat diangkut melalui dinding usus. Oleh karena itu, kecuali jika
mereka membentuk kompleks yang tidak larut, tidak stabil dalam cairan lambung
atau menjalani pembersihan pra sistemik, diharapkan obat-obatan tersebut akan
cepat diserap dan dengan demikian menunjukkan ketersediaan hayati yang baik.
Contoh obat kelas I adalah propranolol dan metoprolol 3-blocker.
Cont - Obat kelas II
untuk obat-obatan di kelas II laju disolusi cenderung menjadi langkah pembatasan
laju penyerapan oral. Untuk obat kelas II, oleh karena itu, harus mungkin untuk
menghasilkan korelasi yang kuat antara disolusi in vitro dan penyerapan in vivo
(lihat sebelumnya). Contoh obat kelas II adalah ketoprofen antiinflamasi
nonsteroid dan karbamazepin antiepileptik. Kelas obat ini harus dapat menerima
pendekatan formulasi untuk meningkatkan laju disolusi dan karenanya
ketersediaan hayati oral.
Cont - Obat kelas III
obat-obatan yang larut dengan cepat tetapi memiliki permeabel yang buruk;
contohnya adalah H2-antagonist ranitidine dan atenolol jS-blocker. Adalah penting
bahwa bentuk sediaan yang mengandung obat kelas III melepaskannya dengan
cepat, untuk memaksimalkan jumlah waktu obat ini, yang lambat untuk
menembus epitel gastrointestinal, bersentuhan dengan itu.
Cont - Obat Kelas IV
obat-obat yang digolongkan sebagai larutan larut dan permeabel buruk. Obat-
obatan ini cenderung memiliki bioavailabilitas oral yang buruk, atau penyerapan
oral mungkin sangat rendah sehingga tidak dapat diberikan melalui rute oral.
Diuretik hidroklorotiazid dan frusemid adalah contoh obat kelas IV. Membentuk
prodrug senyawa kelas IV atau menemukan rute pengiriman alternatif adalah
pendekatan yang harus diadopsi untuk secara signifikan meningkatkan
penyerapannya ke dalam sirkulasi sistemik.