METODA SPESIFIK DLM

PELABELAN

DEDI NOFIANDI, M.Farm, Apt

Dlm Kedokteran Nuklir, rudionuklida yg sering dipakai sbg
RADIOFARMASETIKA :
- 99mTc : 80%
- 131 I : 15%
-Sisanya : 5%
IODINASI
Proses Iodinasi telah digunakan sec ekstensif sbg pelabelan utama dr
senyawa obat dan biologik.
Iodin adalah elemen metal milik grup Halogen VIIA.
Nomor atom 53 dan hanya stabil sbg Isotop ¹²⁷I.
123
I isotop cocok utk prosedur diagnostik IN VIVO krn mempunyai Half Life
yang baik 13 jam dan energi Foton 159 keV dg menggunakan dosis rendah
shg tak membahayakan. Hanya krn Isotop dibuat dg Siklotron, menjadi
mahal.
 Isotop 125I umumnya digunakan utk membuat Antigen RIA dan
seny lain utk prosedur IN VITRO, memp Half Life panjang 60
hari dan tidak mengeluarkan partikel.
Tetapi mengeluarkan foton dg energi rendah, 27-35 keV, shg
tidak cocok utk pencitraan.
 Isotop 131 I adl yg banyak dipakai sec luas dlm klinik, khusus
utk studi In Vivo, Half Life 8 hari, dan Foton 364 keV.,
mengeluarkan partikel β, shg memberi radiasi yg lebih besar
dibanding 123I.
 Isotop 132 I memp HL pendek 2-3 jam dan mengeluarkan sinar
gama maka digunakan sangat terbatas.(hanya untuk studi
klinis)
METODA IODINASI
Terdapat 5 metoda Iodinasi :
1. TRIIODIDA
2. MONOKLORIDA IODIN
3. KLORAMIN T.
4. ELEKTROLITIK
5. ENZIMATIK.
 Iodinasi Molekul: dilakukan oleh sifat oksidasi dr I.
Dlm btk teroksidasi, Iod berikatan sec kuat dg mol aromatik.
Dlm bentuk tereduksi, Iod tak berikatan dg kuat. PH utk
Iodinasi antara 6-9, tetapi utk Iodinasi dg protein pd pH alkali.
Temperatur dan lama proses Iodinasi tergantung pd tipe
senyawa yg akan direaksikan dan metoda yg dipakai
METODA TRIIODIDA
 Metoda ini tdr dr penambahan radioiodin kpd senyawa yg
dilabel dlm campuran Iodin dan KI:

I₂ + KI + I¹³¹ + R --- ¹³¹I R + ¹³¹IK + RI

R adl seny organik yg dilabel. Pelabelan protein dg cara ini

akan terjadi Denaturasi minimum, tetapi hasil rendah hanya
10-30%.
Dengan adanya Iod yg dingin maka spes aktiv dr produk
rendah.
MONOKLORIDA IODIN
 Pertama kali RadioIodin diekulibrasi (diseimbangkan) dg
I Monoklorida dlm HCl encer, campuran itu langsung
127

ditambahkan pd seny yg akan dilabel, pd pH dan Temp yg

spesifik.
 Hasilnya 50-80%.
 Namun Iod dingin dan Iod Monoklorida dpt berekasi dg
molekul, berakibat merendahkan Spesifik Aktiv dr Seny
Label, shg hasilnya menjadi tak dpt diperkirakan krn
tergantung pd jumlah Iod Monoklorida yg ditambahkan.
KLORAMIN T
 Kloramin T adl garam Na dari Na.monokloro Toluen
sulfonamida, suatu seny pengoksidasi sedang.
 Pertama seny yg akan dilabel dan Kloramin T ditambahkan
larutan ¹³¹I-NaI. Kloramin –T mengoksidasi Iod menjadi I yg
reaktif, yg kemudian melabeli senyawa.
 Oleh krn tak ada Iod dingin, maka seny produk mempunyai Akt
Spes yg tinggi, efisiensi pelabelan sangat tinggi, hampir 100%.
 Namun Kloramin T sangat reaktif dan dpt menyebabkan
Denaturasi Protein.
 Kadang Oksidan sedang yg lain dpt menggantikan Kloramin T
spt: NATRIUM NITRIT dan NA HIPOKLORIT.
 Metoda Monoklorida Iod dan Kloramin T sering dipakai pd
berbagai Iodinasi.
METODA ELEKTROLITIK
 Banyak asam amino dan protein dpt diradioiodinasi dg cara
ini.
Cara : Elektrolisis dr campuran Radioiodida dan material
yg akan dilabel.
 Dlm sel elektrolitik, ruang katoda dan anoda dipisahkan
oleh Kantung Dialisis yg berisi katoda dlm rendaman
garam, sebaliknya anoda dlm ruangan berisi campuran
elektrolit.
 Elektrolisis membebaskan Iod yg reaktif, yg akan melabel
senyawa. Perlahan tapi pasti, pembebasan Iod
menyebabkan Iodinasi seny yg seragam, krn bebas dr Iod
pembawa maka hasil pelabelan hampir 80%.
METODA ENZIMATIK
 Enzim dipakai biasanya LAKTOPEROKSIDASE,
KLOROPEROKSIDASE, dan H2O2 dlm jumlah sangat
kecil (nanomolar), ditambahkan pd campuran Iodinasi yang
tdr dari radioiodine dan seny yg akan dilabel.
 H2O2 akan mengoksidasi Iod membentuk Iod yg reaktif,
kemudian meiodinasi senyawa.
 Denaturasi Protein atau perubahan molekul organik
minimal, krn hanya dipakai H2O2 yg sangat sedikit.
 Hasil antara 60-85% dg Spes Aktiv yg tinggi.
 Cara ini bagus dipakai utk melabel Protein dan Hormon2.
PASCA RADIOIODINASI
Pembersihan Iod bebas dilakukan dg :
- Ekstraksi dg CCl4
- Presipitasi
- Pertukaran Ion.
- Filtrasi Gel
- Dialisis.
 Pemilihan tergantung pd seny yg dilabel.
 Sterilisasi bisa dg Autoclave, tetapi untuk Protein hanya dg cara Filtrasi
Milipor.
 Pd umumnya Iod berikatan dg seny aromatik dg kuat, sebaliknya dg seny
alifatik agak tidak stabil. Pd protein Iod mengikat gugus TIROSIL
kemudian cincin IMIDAZOL dr HISTIDIN, selain itu juga Iod mengikat
as. Amino dan ggs Sulfhidril tetapi reaksinya reversibel. Sebagian Alifatik
tak jenuh, asam lemak dan lemak netral spt: a. oleat dan triolein, dpt dilabel
dg radioiodin, hanya Iodinasi akan memecah ikatan rangkap mol, shg
mengubah sf kimia dan biologi.
SENYAWA YG DILABEL RADIOIOD
 Human Albumin Serum (HAS), fibrinogen, insulin,
globulin, hormon, enzim.
 HAS untuk tumor otak, penumpukan darah.
 Rose Bengal: pencitraan liver.
 MAA (MAKRO AGREGAT ALBUMIN): paru-paru
 Fibrinogen: deteksi trombus.
PELABELAN DG 99mTc
Sifat-sifat Tc.:
 Hampir 80% seny RF adl seny yg dilabel 99mTc.
 Dipakai krn memp sft fisik dan radiasi yg khas.
 Half Life fisik selama 6 jam, bebas radiasi β, shg dg milicuri
Tc radioaktif aman utk pasien.
 Memberikan citra yg bagus dg monokromatik foton 140 keV.
 Tersedia dlm keadaan: steril, bebas pirogen dr Generator
99Mo99mTc.
 Tc adl metal transisi dr Grup VIIB (Mn, Tc, Re), no atom 43,
di alam ada Tc yg tak stabil, Yang stabil bervalensi 7+ dan 4+,
sebaliknya valensi 2+, 3+, 5+, dan 6+ tak stabil.
REDUKSI TEKNISIUM
 Dibuat di generator Moly, menggunakan 99m Tc-NaTcO4.
 Sec kimia 99mTcO4- adalah non reaktif, tak dapat melabeli
seny dg penambahan langsung.
 Cara utk mereduksi, menurunkan 7+ menjadi 3+, 4+ atau
5+.
 Metoda/Sistem utk reduksi :
1- SnCl2.2H2O, A. Askorbat, Feriklorida, HCl pekat,
NaBH4, Fero sulfat.
2- Elektrolisis campuran antara Na perteknetat, seny yg akan
dilabel, dg anoda dr Zirkonium.
REAKSI KIMIA
3 Sn 2+ ---- 3Sn 4+ + 6e -
2 99m TcO4- + 16 H+ + 6e- - 2 99mTc 4+ + 8H2O
——————————————————————————
2 99mTcO4- + 16H+ + 3Sn 2+  2 99mTc 4+ + 3 Sn 4+ + 8H2O

99mTc 7+ telah diubah jadi 99mTc 4+

Bentuk tereduksi lain spt 99mTc3+ atau 99mTc5+ mungkin
terbentuk pd kondisi berbeda.
Penelitian menghasilkan bhw:
- Dg milimol 99Tc dengan Sn 2+ dlm bufer sitrat dan pH 7,
99Tc akan tereduksi menjadi bentuk 5+, yg sec perlahan jadi
4+
- 99Tc tereduksi menjadi 4+ oleh penambahan Sn2+ pd HCl
pkt
PELABELAN DG TEKNISIUM
 Jenis 99mTc sangat reaktif dan berkombinasi dg berbagai
macam seny pengkelat (CA). Skema reaksi:
99mTc tereduksi + Chelating agent  99m Tc-Chelate.

 CA umumnya memberi sepasang elektron bebas untuk

membentuk ikatan kovalen koordinat dg 99mTc.
 Gugus kimia spt -COO-, -NH2, -SH adl donor elektron kpd
DTPA, glukohepton, berbagai Protein.
 Kelat-99mTc mempunyai muatan negativ, akan migrasi ke
Anode pd Elektrolisis.
PENGARUH OKSIGEN
 Adanya O dan seny pengoksidasi, maka 99m Tc yang sudah
tereduksi akan mudah teroksidasi.
 Maka seny berlabel 99mTc harus bebas dr O maupun Seny
pengoksidasi.
 Diberi A.Askorbat atau Na Askorbat sbg inhibitor.
HIDROLISIS
 Kemungkinan terjadi adanya Hidrolisis dlm lrt air.
 99mTc yang sudah tereduksi akan bereaksi dg air
menghasilkan berbagai jenis hidrolisat, tergantung pd pH,
waktu dan senyawa asing misalnya 99mTcO2, 99mTcO2⁺
dan 99mTcOOH⁺.
 Hidrolisis bersaing dg proses terbentuknya kelat, akan
mengurangi jumlah hasil Kelat-99mTc.
 Hasil hidrolisis juga akan mengganggu pd tes diagnostik
terlebih dlm jumlah cukup banyak dlm RF.
 PENGARUH STANUM KLORIDA

Kelemahan penggunaan SnCl2 adalah :

 mengalami hidrolisis dlm pelarut air, pd pH 6-7, membentuk koloid
yg sukar larut.
 Koloid yg terbentuk akan mengikat 99mTc tereduksi shg bersaing dg
seny pengkelat (CA) dlm proses pelabelan.
 Untuk mencegah hal tsb, maka diberi asam utk mencegah hidrolisis
Sn sebelum reduksi Tc jika preparasi memakai bahan dasar, bukan
suatu kit.
 Pengaruh buruk Hidrolisis dan Sn diatasi dg menambahkan CA yg
cukup, yg akan mengikat Sn dan 99mTc tereduksi shg mencegah
Hidrolisis.
 Rasio penambahan CA thd Sn tergantung pd Konstan afinitas. Bila
CA lemah (spt Pospat) jenis hidrolisat pd preparasi cukup tinggi.Bila
koef afin. tinggi spt DTPA, mk hidrolisat minim
BERBAGAI JENIS TEKNISIUM
Pd preparasi Senyawa berlabel 99mTc, ada 3 jenis Tc:
1 99mTc bebas a.l. 99mTcO4- yg tidak direduksi Sn.
2 99mTc yg terhidrolisa a.l. 99mTcO2, yg tak bereaksi dg
Seny pengkelat (CA), termasuk 99mTC yg berikatan dg
Sn2+hidrolisat.
3 Ikatan 99mTc-Kelat, senyawa berlabel yg diinginkan.
 Pada preparasi rutin, fraksi terbanyak adalah no 3.
 No 1 dan 2 tak diinginkan, hrs dibuang agar tak
mengganggu pd tes diagnostik.
 Pengukuran sec Polarografi dan titrasi Iodometri dipakai
utk mengetahui Valensi Tc tereduksi.
PEMAKAIAN DI KEDOKTERAN NUKLIR
Radiofarmasetika (RF) yg memakai 99mTc di Kedokteran
Nuklir a.l.:
 - 99mTc-Na perteknetat
 -99mTc-HAS label
 -99mTc-MAA
 -99mTc-makroagregat Feri Hidroksida
 -99m Tc-difosfonat
 -99mTc-pirofosfat.
 -99mTc-koloid sulfur
 -99mTc – glukoheptonat.
 -99mTc-sel darah merah.
 -99mTc DTPA .
 - 99mTc DMSA
KIT
 Adanya kit akan memudahkan produksi 99mTc –RF di unit
Radiofarmasi.
 Kit mempunyai umur panjang, dpt dibeli dan disimpan utk
preparasi setiap hari, pelabelan dg 99mTc dapat dibuat hanya dg
menambahkan TcO pada kit.
 Kit disiapkan dari Larutan Master yg berisi seny yg akan dilabel
dan larutan asam dr Sn dlm proporsi yang pas.
 pH dibuat pH 5-7 dg NaOH, alikuot lrt dibagikan (dispens)
kedlm vial kit individual. Larutan dilipolisa (freeze-dried) dan
vial disemprot dan diisi Nitrogen steril.
 Lipolisis membuat material kering dlm vial utk mudah larut dlm
air dan membantu proses pelabelan dr kelat.
 Pembuatan dilakukan dg material steril, kondisi aseptik dlm
LFH isi N2 dibawa tekanan positiv.
…..KIT
 Senyawa Sn yang dipakai berbagai pabrik a.l: SnCl2, SnF2, Sn-sitrat, Sn-
tartrat, Sn-pirofosfat.
 SnCl2 yang biasa dipakai.
 Dlm preparasi Kit, Sn dan asam ditambahkan, akan terjadi Kompleks dg
CA:
Sn2+ + Kelat - Sn-Kelat.
 Bila pH dinaikkan, hidrolisis thd Sn tak terjadi krn Sn2+ telah berikatan dg
Kelat dg jumlah seny kelat yg besar.
 Demikian juga dikala 99mTcO4- ditambahkan pd CA yg dilipolisis dlm
vial kit. Jumlah Sn yg ditambahkan ke dlm kit harus lebih dr cukup agar dpt
mereduksi Tc dlm jumlah nanomol. Tetapi Sn tak boleh berlebihan, bisa
hidrolisis. Biasanya CA diberikan sdk berlebih.
MENGOPTIMALKAN PRODUK SENY BERLABEL
99mTc
 PADA SETIAP KIT, JUMLAH AWAL Sn2+ DAN SENY
PENGKELAT ADALAH SANGAT PENTING.
 BILA TERLALU BANYAK tin DIGUNAKAN 
KEMUNGKINAN HIDROLISIS tin MENINGKAT, DAN tin
YG TERHIDROLISIS AKAN BERKOMPETISI DG 99mTc
YG TEREDUKSI MEMBENTUK 99mTc-Sn-KOLOID, SHG
AKAN MENURUNKAN HASIL KELAT BERLABEL.
 TERLALU SEDIKIT tin MENYEBABKAN REDUKSI YG
TIDAK KOMPLET DR 99mTc PD TINGKAT OKSIDASI YG
DIINGINKAN, BERAKIBAT KECILNYA HASIL
KOMPLEKS-99mTc.
Lanjutan…
 SENY PENGKELAT HARUS CUKUP BANYAK
UNTUK MEMBUAT KOMPLEKS DG tin 
MENCEGAH HIDROLISIS tin DAN Tc PADA pH 6-7
SETELAH PENAMBAHAN 99mTcO4 PADA KIT, SHG
AKAN MENAIKKAN JUMLAH HASIL 99mTc-
KOMPLEKS.
 UNTUK SENY PENGKELAT YG LEMAH, RASIO DG
tin HRS LEBIH BESAR  UNTUK MENCAPAI NILAI
OPTIMUM TIAP KIT HRS DILAKUKAN TRIAL AND
ERROR
 STABILISATOR KOLOID
 UNTUK MENCEGAH TERJADINYA AGREGASI DR
KOLOID MAKA SERING DITAMBAHKAN
STABILISATOR KOLOID A.L:
 GELATIN, POLIVINIL PIROLIDON, KARBOKSI METIL
SELULOSE.
 STABILISATOR DAN KARAKTERISTIK KOLOID
TERGANTUNG BEBERAPA FAKTOR A.L:
- SIZE PARTIKEL
- MUATAN UTAMA
- Ψ POTENSIAL
- VALENSI ION,
-TEGANGAN PERMUKAAN,
- VISKOSITAS,
- POLARITAS DR MEDIUM DISPERSI.
PENGGUNAAN KOLOID 99mTc
 PARTIKEL2 KOLOID TAK TERLIHAT DIBAWAH
MIKROSKOP RINGAN TETAPI DPT DIDETEKSI DIBWH
ULTRA MIKROSKOP ATAU MIKROSKOP ELEKTRON.
KOLOID SERING DISEBUT “MIKRO AGREGAT” DG
PARTIKEL 0,5 -5 µM.
 KOLOID YG SERING DIPAKAI : KOLOID EMAS 195Au DAN
KOLOID SULFUR 99mTc.
 PARTIKEL INI DLM TUBUH DIBUANG OLEH SEL
RETIKULOENDOTELIAL DAN DPT DIPAKAI UNTUK
PENCITRAAN : liver, spleen, bone marrow.
 KOLOID DG UKURAN LEBIH KECIL SPT KOLOID 99mTc-
ANTIMONI SULFIDA DIPAKAI PD “LIMPOSCINTIGRAFI”.
 PARTIKEL BESAR ATAU MAKROAGREGAT > 1µM, DPT
DILIHAT DIBWH MIKROSK RINGAN. UKURAN DPT
DITENTUKAN DG HEMOSITOMETER DIBWH MIKR
RINGAN, CONTOH : 99mTc-MAA DAN ALBUMIN
MIKROSPERE DG UKURAN 15-100µM.
 PARTIKEL2 TERJERAT (trapped) DLM KAPILER PARU2
DAN DIPAKAI UTK PENCITRAAN PARU-PARU
 ADITIV (ZAT TAMBAHAN)
 ADITIV ATAU PRESERVATIV DITAMBAHKAN PD KEBANYAKAN
RF ATAU SENY BERLABEL (SB), DLM RANGKA MENJAGA
INTEGRITAS DAN EFIKASI.
 SB MUDAH RUSAK (degradasi) KRN ADANYA RADIOLISIS DAN
KEMUNGKINAN TUMBUHNYA MIKROBA, KEBANYAKAN ADITIV
DITAMBAHKAN UTK MAKSUD mencegah TERJADINYA HAL TSB
 PRESERVATIV A.L: STABILIZER, ANTIOKSIDAN, PEMBUNUH
MIKROBA ATAU SELURUHNYA.
 SYARAT : ADITIV TIDAK BEREAKSI DG INGRIDIEN APAPUN DLM
PREPARAT RF.
 INTEGRITAS RF PENTING, TERUTAMA DIPAKAI DLM WAKTU YG
PANJANG  DIPERLUKAN STABILIZER
 STABILIZER A.L: A. ASKORBAT, GARAM ASKORBAT, A.
GENTISAT, SITRAT DAN ASETAT. DIPAKAI PD PREPARAT SB 99mTc.
 SURFACE ACTIVE AGENT A.L: TWEEN 80, DIPAKAI PD
MIKROSPERE ALBUMIN-99mTc UTK MENCEGAH AGREGASI
 GELATIN DIPAKAI DLM PREPARASI KOLOID , tetapi gelatin mudah
ditumbuhi mikroba ( SERING DIPAKAI SBG MEDIUM
PERTUMBUHAN) MAKA HRS DISTERILKAN DAN PREPARASI DG
CARA ASEPTIS.
 Antimikroba
 SENY PEMBUNUH MIKROBA DIGUNAKAN UTK MENCEGAH
TUMBUHNYA MIKROBA DLM LARUTAN.
 BENZIL ALKOHOL DLM KONS 0,9% SERING DIPAKAI tetapi
KONSENTRASI HRS RENDAH KRN MEMP EFEK “VASODILATING”,
 BENZ ALKOHOL MEMPUNYAI SIFAT MENGURANGI RADIOLISIS
DLM PREPARASI RF.
 ETANOL 2,0% SERING DIGUNAKAN SBG ANTIMIKROBA TETAPI
TIDAK UNTUK KELAT 99mTc.
CATATAN:
 pH RF SANGAT PENTING UTK STABILITAS DAN SIFAT BIOLOGI,
MENJAGA pH MENJADI SANGAT PENTING, YG DPT DILAKUKAN
DG PENAMBAHAN : ASAM, ALKALI, BUFER YG COCOK (spt
BUFER TRIS ATAU BUFER FOSFAT) PD PREPARASI
RADIOFARMASETIKA.
 HILANGNYA RADIOIODIN KRN OKSIDASI DLM LARUTAN
IODIDA DPT DICEGAH DG PENAMBAHAN SENY PEREDUKSI
SPT :
Na TIOSULFAT, Na SULFIT ATAU ASAM ASKORBAT.
 KEMURNIAN & ANALISIS
KETIDAK MURNIAN RN BERASAL DR KONTAMINAN
RADIOAKTIF YG MUNCUL PD METODA PRODUKSI
RN
PROSES FISSION SERING MENGHASILKAN KETIDAK
MURNIAN YG BANYAK DRPD REAKSI NUKLIR DLM
SIKLOTRON ATAU REAKTOR (BANYAK CARA DLM
FISSION UTK INTI YG BERAT).
KETIDAK MURNIAN TARGET JUGA MENAMBAH
KETIDAK MURNIAN RN. UNTUK MENGHILANGKAN
KONTAMINAN R.AKTIF DPT DG METODA
PEMISAHAN SEC KIMIAWI PD FASE-FASE PRODUKSI
RN.
KETIDAK MURNIAN KIMIA & RADIOKIMIA MUNCUL
DR PROSES LABELING SB YG TIDAK KOMPLET,
DAPAT DIATASI EKSTRAKSI, PENUKARAN ION,
KROMATOGRAFI (KLT, KGel, KKertas)
SERING KETIDAK MURNIAN SB BERASAL DR
DEGRADASI ALAMIAH & RADIOLISIS
 SHELF LIFE
SENYAWA BERLABEL (SB) MEMPUNYAI
SHELF LIFE  WAKTU DIMANA SB DAPAT
DIPAKAI SECARA AMAN SESUAI DG TUJUAN
HILANGNYA EFIKASI DR SB UTK PERIODE
WAKTU TERTENTU MUNGKIN AKIBAT
RADIOLISIS, TERGANTUNG PADA :
Waktu paruh DARI RN, PELARUT, ADITIV, SIFAT
RADIASI, MOLEKUL SENY YG DILABEL,
IKATAN KIMIA ANTARA RN DG SENY YG
DILABEL,
UMUMNYA MAKSIMAL 6 BULAN SBG LIMIT
DR SHELF LIFE SUATU SENY BERTANDA.