Tahapan DNA Fingerprint

• Pengambilan sampel (darah, rambut, sel epitel, daging, sperma, kuku, tul
ang , air liur, urin dst.)
• Sampel DNA dimasukkan kedalam mesin PCR
• Amplifikasi (pembesaran) sebuah set potongan DNA.
• Primer amplifikasi tersebut digunakan untuk penjiplakan pada sampel D
NA yang mempunyai urutan basa yang cocok
• Hasil akhirnya berupa kopi urutan DNA lengkap hasil amplifikasi dari DNA
Sampel.
• Kopi urutan DNA akan dikarakterisasi dengan elektroforesis untuk meliha
t pola pitanya.
• Pola pita ditransfer ke membran dan dilakukan pewarnaan.
• Finishing dari metode ini adalah mencocokkan tipe-tipe DNA fingerprintd
engan pemilik sampel jaringan
Teknik PCR analisis
• Polymerase chain reaction (PCR) adalah suatu proses p
embentukan cetakan DNA secara berulang kali dengan
menggunakan prosedur dan waktu yang tertentu. PCR
menggunakan teknik amplifikasi(perbanyakan) secara s
pesifik pada suatu segmen DNA secara invitro dengan
menggunakan DNA polimerase, cetakan (template),DN
A genom, dan primer oligonukleotida.
• Prinsip dasar dari teknik PCR tersebut merupakan adan
ya enzim DNA polimerase yang digunakan untuk memb
uat cetakan dari segmen DNA yang diinginkan.
RESTRICTION FRAGMENT LENGTH
POLYMORPHISM (RFLP)
• RFLP merupakan teknik sidik DNA berdasarkan deteksi fragme
n DNA dengan panjang yang bervariasi. Awalnya DNA diisolasi
dari sampel yang kemudian dipotong dengan enzim khusus re
striction endonuclease. Enzim ini memotong DNA pada pola s
ekuen tertentu yang disebut restriction endonuclease recogni
tion site (sisi yang dikenali oleh enzim restriksi). Keberhasilan
metode ini sangat tergantung pada isolasi sejumlah DNA tanp
a terdegradasi. Pada persidangan kasus kriminal, hal ini bisa
menjadi suatu masalah jika jumlah DNA sangat sedikit dan ku
alitasnya rendah. Ini terlihat dari hasil pita-pita sidik DNA yang
tidak tajam. Dengan perkembangan dan adanya teknik analisi
s DNA yang lebih baru dan lebih efisien, RFLP tidak lagi diguna
kan karena membutuhkan sampel DNA yang relatif banyak.