MEDIA DAN

REAGENSIA
 MEDIA DAN REAGENSIA

Media Reagensia
bahan yang terdiri dari bahan yang terdiri dari
campuran nutrisi yang campuran atau murni yang
digunakan untuk digunakan untuk reaksi
pertumbuhan secara kimiawi dan
mikroorganisme biokimiawi.
Ex : BAP, MC, NAP, EAP Ex : Giemsa, Eosin 2 %
PROSES PEMBUATAN

1. PERSIAPAN ALAT

2. PENIMBANGAN

3. PELARUTAN

4. STERILISASI

5. PENUANGAN

6. PENYIMPANAN
 PERSIAPAN
ALAT
Sterilisasi Alat
CAWAN PETRI  cuci  keringkan  pasangkan
cawan  susun dalam DHO  sterilisasi DHO 140-
170oC 2 jam
sumbat dengan kapas  susun
dalam DHO  sterilisasi DHO
140-170oC 2 jam
TABUNG  cuci 
keringkan
masukkan media  sterilisasi
PENIMBANGAN
PENIMBANGAN dan
PELARUTAN
STERILISASI MEDIA
STERILISASI MEDIA

1. Letakkan erlenmeyer atau

tabung yang berisi media di
keranjang autoclave
2. Tempelkan tape indikacator
3. Masukkan keranjang tersebut
ke dalam autoclave
4. Sterilisasi media pada suhu
121⁰ C selama 15'
5. Setelah selesai, keluarkan
keranjang dari autoclave
 STERILISASI dan
PENUANGAN
ALAT STERILISASI PENUANGAN
 PENYIMPANAN

1. Labeli media dengan

nama media dan
tanggal pembuatan
2. Susun media dalam
lemari pendingin
sesuai dengan
kelompoknya
 Alat

• Neraca Analitik • Kertas pH

• Autoclave • Plate
• Cawan Petri • Batang pengaduk
• Tabung Reaksi • Kapas
• Pipet tetes • Beaker Glass
• Erlenmeyer • Gelas Ukur
• Sendok Stainless • Kulkas / Lemari
Pendingin
 MEDIA BAP 1000ml
(Blood Agar Plate)
Prosedur Kerja
1. Timbang bubuk agar base sebanyak 40 gr.
2. Tambahkan 1000 ml Aquadest kedalam erlenmeyer,
homogenkan. tutup erlenmeyer dengan menggunakan kapas.
3. Sterilisasi kedalam Autoclave dengan suhu 121oC selama 15
menit.
4. Setelah sterilisasi saat di pegang tidak terlalu panas lagi ±5 oC
tambahkan darah domba 5-10% sebanyak 5 cc untuk 100 ml
larutan.
5. Campurkan dengan digoyang-goyang sampai rata. tuang ke
dalam petridisk sebanyak 15-20 ml (setinggi 4 mm).
6. Biarkan dingin pada suhu kamar sampai mengeras kemudian
 PEMBUATAN MEDIA MH 1000 ml
(MULLER HINTON )
Prosedur Kerja :
1. Timbang bubuk MH sebanyak 38 gr larutkan dalam 1000 ml
aquadest kedalam erlenmeyer, campur sampai kemudian
tutup erlenmeyer dengan menggunakan kapas.
2. Sterilisasi kedalam Autoclave dengan suhu 121oC selama 15
menit.
3. Setelah proses sterilisasi selesai, keluarkan media dan tunggu
sampai suhunya ± 60-70 oC. kemudian tuang ke dalam
petridisk sebanyak 15-20 ml (setinggi 4 mm).
4. Biarkan dingin kemudian masukkan dalam lemari es dengan
cara di balik.
 PEMBUATAN MEDIA NAP 1000 ml
(Nutrient Agar Plate)
Bahan Prosedur Kerja :
• Aquadest 1000 1. Timbang bubuk nutrient agar sebanyak 28
ml gr larutkan dalam 1000 ml aquadest
• Lab. Lemco powder kedalam erlenmeyer, campur sampai
1 gr kemudian tutup erlenmeyer dengan
• Yeast exstract menggunakan kapas.
2 gr 2. Sterilisasi kedalam Autoclave dengan suhu
• Pepton 5 gr 121oC selama 15 menit.
• Sodium chloride 3. Setelah proses sterilisasi selesai, keluarkan
5 gr media dan tunggu sampai suhunya ± 60-70
• Agar 15 gr o
C. kemudian tuang ke dalam petridisk
sebanyak 15-20 ml (setinggi 4 mm).
4. Biarkan dingin kemudian masukkan dalam
 PEMBUATAN MEDIA EAP 1000 ml
( Prosedur
Endo AgarKerja
Plate)
Bahan 1. Timbang Endo Agar sebanyak 36 gr
• Aquadest 1000 ml larutkan ke dalam 1000 ml aquadest
• Pepton 10 gr campur sampai homogen.
• Lactose 10 gr 2. Tambahkan 10 % (6 ml) basic fuchin lalu
• Potassium homogenkan kembali. Tutup erlenmeyer
dengan menggunakan kapas
phosphatase 3,3 gr
3. Sterilisasi kedalam Autoclave dengan
• Sodium sulphite 2,5
suhu 121oC selama 15 menit.
gr
4. Setelah proses sterilisasi selesai,
• Agar 10 gr keluarkan media dan tunggu sampai
• Basic fuchin 10 % suhunya ± 60-70 oC. kemudian tuang ke
(6ml) dalam petridisk sebanyak 15-20 ml
(setinggi 4 mm).
5. Biarkan dingin kemudian masukkan
MEDIA ARGININ, ORNITHIN, LYSIN DAN CONTROL

Bahan
Prosedur Kerja
• Decarboxylase medium
1. Campur kedua bahan di atas.
2. Ukur pH sampai 6,5.
100 cc
3. Tuang ke dalam tabung reaksi
• Arginin/Ornithin/Lysin
sebanyak ± 3cc.
1 gr
4. Untuk pembuatan control sama
dengan decarboxylase medium
tanpa ada tambahan.
5. Sterilkan di autoclave selama 15
menit dengan suhu 121oC.
 MEDIA UREA AGAR
Prosedur Kerja
Bahan 1. Timbang bubuk urea sebanyak 2,4 gram
• Aquadest 95 ml larutkan dalam 95 ml aquadest campur
• Urea agar 2,4 gr sampai homogen.
• Urea solution 2. Sterilisasi kedalam Autoclave dengan suhu
40% 121oC selama 15 menit.
1 ampul (5cc) 3. Setelah proses sterilisasi selesai, keluarkan
media dan biarkan agak dingin dan
tambahkan urea solution 40% 1 ampul
secara vaseptic. Goyang supaya tercampur
rata.
4. Tuang kedalam tabung reaksi steril ±5cc.
5. Dinginkan dalam posisi miring.