Dnk*kkII Transaminase • Aminotransferase merupakan sekelompok enzim yang mengkatalisis interkonversi asam amino menjadi asam α-keto melalui transfer gugus amino
• Aspartat aminotransferase (AST)/GOT & Alanin
aminotransferase (ALT)/GPT adalah aminotransferase yang penting di bidang klinik AST ALT Transaminase • Pyridoxal-5'-phosphate (P-5'-P) dan analog aminonya, pyridoxamine-5'-phosphate, berfungsi sebagai koenzim di reaksi transfer amino. • P-5'-P terikat pada apoenzim dan berfungsi sebagai kelompok prostetik sejati. • P-5'-P yang terikat pada apoenzim menerima gugus amino dari substrat pertama, aspartat atau alanin, untuk membentuk P-5'-P yang terikat enzim dan produk reaksi pertama, oksaloasetat atau piruvat, masing-masing. Transaminase • Transaminase membutuhkan koenzim P5P, yang akan dikonversi menjadi pyridoxamine pada fase pertama reaksi ketika asam amino berubah menjadi asam α-keto • Enzim mengikat pyridoxamin untuk direaksikan dengan pyruvat, oxaloacetat atau α-ketoglutarat membentuk alanin, asam aspartat atau asam glutamat masing2. • Reaksi transaminasi terjadi di dalam jaringan, transaminase spesifik mengkatalis khas pasangan amino/asam keto BIOKIMIA BIOKIMIA • ALT secara eksklusif di sitoplasma; kedua bentuk mitokondria dan sitoplasma AST ditemukan di dalam sel. METODE ANALISIS • mengukur aktivitas aminotransferase → dua asam amino dan dua asam keto. • metode : pembentukan asam keto diukur. • Metode dengan menggabungkan reaksi aminotransferase dengan reaksi dehidrogenase spesifik TUJUAN PEMERIKSAAN • ALT / AST termasuk dalam kelompok transaminase, yang mengkatalisis konversi asam amino menjadi asam keto alfa yang sesuai melalui transfer gugus amino, mereka juga mengkatalisis proses sebaliknya. PRINSIP PEMERIKSAAN ALT METODE BERDASARKAN REKOMENDASI IFCC
• ALT mentransfer gugus amino dari alanin ke 2-
oxoglutarate untuk membentuk piruvat dan glutamat. penambahan fosfat piridoksal ke campuran reaksi memastikan aktivitas katalitik maksimum ALT • piruvat memasuki reaksi katalis laktat dehidrogenase (LDH) dengan NADH untuk menghasilkan laktat dan NAD+. penurunan absorbansi karena konsumsi NADH diukur pada 340 nm dan proposional dengan aktivitas ALT dalam sampel. • piruvat endogen dikeluarkan selama masa inkubasi←LDH ALT PRINSIP PEMERIKSAAN AST METODE BERDASARKAN REKOMENDASI IFCC
• AST mentransfer gugus amino dari aspartat ke 2-
oxoglutarate untuk membentuk oxaloasetat dan glutamat. penambahan piridoksal fosfat ke campuran reaksi memastikan aktivitas katalitik maksimum AST • oxaloasetat memasuki reaksi katalis malat dehidrogenase (MD) dengan NADH untuk menghasilkan malat dan NAD+. penurunan absorbansi karena konsumsi NADH diukur pada 340 nm dan proposional dengan aktivitas AST dalam sampel. • piruvat endogen dikeluarkan selama masa inkubasi←LDH AST