M U H A M M A D G H U L A M A L AY U B I
13419005
APA ITU SPEKTROFOTOMETRI ?
Energi foton :
C C
E = C=
= h u
=h
h (Tetapan Planck) = 6.62 x 10-27 (Erg sec)
SPEKTRUM
ELEKTROMAGNETIK
Transmitansi :
T = I/Io
I : intensitas cahaya setelah melewati sampel
Io : intensitas cahaya awal
T= (I/Io) = 10-A
A = -logT = log(1/T)
PENYIMPANGAN HUKUM
LAMBERT-BEER
Larutan pekat
Pada konsentrasi larutan yang terlalu pekat, Absorbansi
yang terbaca terlalu tinggi, sehingga grafik tidak linear
Larutan yang diukur harus encer
Faktor instrumentasi sinar yang diserap tidak
monokromatis menyebabkan 2 panjang gelombang
maksimum
Faktor kimia karena terjadinya reaksi disosiasi,
asosiasi, polimerisasi, solvolisis
Jika terjadi reaksi konsentrasi zat yang akan diukur
berkurang
KOMPONEN ISTRUMEN
SPEKTROFOTOMETER
SPEKTROFOTOMETER
Spektrofotometer UV
2.Lampu Merkuri
Spektrofotometer Visible
Lampu Tungsen
KOMPONEN
MONOKROMATOR
Cahaya merah
yang diserap
oleh larutan
hijau
DETEKTOR
Berfungsi menangkap cahaya yang diteruskan
dari sampel dan mengubahnya menjadi arus
listrik. Syarat-syarat sebuah detektor :
Kepekaan yang tinggi
Perbandingan isyarat atau signal dengan
bising tinggi
Respon konstan pada berbagai panjang
gelombang.
Waktu respon cepat dan signal minimum
tanpa radiasi.
Signal listrik yang dihasilkan harus
sebanding dengan tenaga radiasi.
MACAM-MACAM
DETEKTOR
Detektor foto (Photo detector)
Photocell, misalnya CdS.
Phototube
Hantaran foto
Dioda foto
Detektor panas
TIPE INSTRUMEN
SPEKTROFOTOMETER
1. Single-beam instrument ( satu berkas sinar )
digunakan untuk kuantitatif dengan mengukur
absorbansi pada panjang gelombang tunggal. Single
beam menghasilkan pengukuran sinar UV dan
sinar tampak. Skema Instrumen Single Beam :
STRUKTUR KIMIA DAN
ABSORPSI UV
Larutan yang dapat dianalisis dengan
spektrofotometer UV senyawa yang
mempunyai gugus kromofor
Protein
Glucose Determination
Enzyme Activity (Hexokinase)
Amino Acids (aromatic)
STRUKTUR KIMIA DAN ABSORPSI
VISIBLE