S

K U
O
K
I F
I T
S
P O
M
RA
G
N
G E
TO
PA
RI
T E
K
BA

P re s en t By.
Windya Nazmatur Rahmah, S.Tr.A.K., M.Biomed
 INTRODUCTION
• Bakteri gram positif adalah bakteri yang mempertahankan zat warna metil ungu
sewaktu proses pewarnaan Gram. Bakteri jenis ini akan berwarna biru atau ungu
dibawah mikroskop.

• Bakteri Kokus (Coccus) adalah bakteri yang berbentuk bulat seperti bola, dan
mempunyai beberapa variasi sebagai berikut:
- Mikrococcus
- Diplococcus
- Tetracoccus
- Sarcina
- Staphylococcus
- Streptococcus
VARIASI BENTUK KOKUS (BULAT)
1. Monococcus = sel bakteri kokus
tunggal, contoh: Monococcus
gonorrhoe
2. Diplococcus = dua sel bakteri kokus
berdempetan, contoh: Diplococcus
pneumoniae
3. Streptococcus = lebih dari empat sel
bakteri kokus berdempetan
membentuk rantai, contoh:
Streptococcus lactis
4. Staphylococcus = lebih dari empat sel
bakteri kokus berdempetan seperti
buah anggur, contoh: Staphylococcus
aureus
5. Tetracoccus = empat sel bakteri kokus
berdempetan berbentuk segi empat,
contoh: Deinococcus radiodurans 
6. Sarcina = delapan sel bakteri kokus
berdempetan membentuk kubus,
contoh: Sarcina sp.
 monococcus

COCCUS (BULAT)
 streptococcus

COCCUS (BULAT)
 staphylococcus

COCCUS (BULAT)
 Sarcina

COCCUS (BULAT)
 tetracoccus

COCCUS (BULAT)
KARAKTERISTIK BAKTERI GRAM POSITIF
1. Memiliki cytoplasmic lipid membrane
2. Memiliki lapisan peptidoglikan yang tebal
3. Terdapat asam teichoic dan lipoid yang membentuk lapisan asam
lipoteichoic yang berguna untuk chelating agen dan untuk adhesi tipe
tertentu.
4. Beberapa spesies memiliki kapsul polisakarida
5. Beberapa spesies memiliki flagellum
6. Jika terdapat falgella maka diperkuat oleh 2 cincin, berbeda dengan
bakteri gram negative yang flagellumnya diperkuat oleh 4 cincin.
PEWARNAAN GRAM
 GRAM POSITIF VS GRAM NEGATIF
Karakteristik Gram positif
Homogen dan tebal (20-80 nm serta
sebagian besar tersusun dari
Dinding sel peptidoglikan. Polisakarida lain dan
asam teikoat dapat ikut menyusun
dinding sel.
Gram negatif
Peptidoglikan (2-7 nm) di antara
membran dam dan luar, serta adanya
membran luar (7-8 nm tebalnya) yang
terdii dari lipid, protein, dan
lipopolisakarida

Bulat, batang atau filamen Bulat, oval, batang lurus atau

melingkar seprti tand koma, heliks
Bentuk sel atau filamen; beberapa mempunyai
selubung atau kapsul
Pembelahan biner Pembelahan biner, kadang-kadang
Reproduksi pertunasan
kemoorganoheterotrof Fototrof, kemolitoautotrof, atau
Metabolisme kemoorganoheterotrof
Kebanyakan nonmotil, bila motil tipe Motil atau nonmotil. Bentuk flagela
flagelanya adalah petritrikus dapat bervariasi-polar,lopotrikus
Motilitas (petritrichous) (lophtrichous), petritrikus
(petritrichous).
Anggota tubuh Biasanya tidak memiliki apendase Dapat memiliki pili, fimbriae, tangkai
(apendase)
Beberapa grup dapat membentuk Tidak dapat membentuk endospora
Endospora endspora
KOKUS GRAM POSITIF
Ciri-ciri
Bentuk sel Kokus, tunggal, berpasangan, rantai, paket, gerombol
Gram positif
Heterotropik (persyaratan nutrien berkisar luas)
Anaerobik fakultatif
Pergerakan nonmotil
Patogenesis Hewan, manusia
Habitat Tanah, air tawar, kulit dan selaput lendir hewan berdarah panas
(manusia)
 Gram Genus Penyakit
Staphylococcus impetigo, keracunan makanan, bronkitis
Streptococcus pneumonia/radang paru, meningitis, karies gigi
Enterococcus enteritis
Listeria listeriosis
Bacillus anthrax
Gram positif
Clostridium tetanus, botulisme
Mycobacterium difteri
Propionibacterium tuberkulosis
Mycoplasma jerawat
pneumonia
Salmonella salmonelosis
Escherichia gastroenteritis/radang saluran cerna
Shigella disentri
Neisseria meningitis, gonorea
Bordetella batuk rejan
Legionella legionnaires' disease
Gram negatif Pseudomonas infeksi luka bakar
Vibrio kolera
Campylobacter gastroenteritis
Helicobacter tukak lambung
Haemophilus bronkitis, pneumonia
Treponema sifilis
Chlamydia pneumonia, uretritis, trakoma
MACAM-MACAM BAKTERI PATOGEN GRAM POSITIF
KOKUS
1. Staphyloccus aureus
Klasifikasi :
Kingdom : Bacteria
Phylum   : Firmicutes
Class        : Bacilli
Ordo      : Lactobacillales
Family     : Staphylococcaceae
Genus      : Staphylococcus
Species     : S. aureus
Morfologi
Staphylococcus aureus (S. aureus) adalah bakteri gram positif yang
menghasilkan pigmen kuning, bersifat aerob fakultatif, tidak menghasilkan 
spora dan tidak motil, umumnya tumbuh berpasangan maupun
berkelompok, dengan diameter sekitar 0,8-1,0 µm. S. aureus tumbuh dengan
optimum pada suhu 37oC dengan waktu pembelahan 0,47 jam.
Bakteri yang berada dalam genus Staphylococcus berbentuk seperti sekelompok
anggur. Salah satu karakteristik penting bakteri Staphylococcus yaitu bahwa
bakteri ini dapat tumbuh baik dalam kondisi aerobik maupun anaerobik. Bakteri
Staphylococcus juga mampu menghasilkan enzim koagulase, yaitu enzim yang
bertanggung jawab terhadap pembekuan darah.
2. Streptococcus pyogenes
Klasifikasi
Kingdom : Bacteria
Phylum   : Firmicutes
Class       : Coccus
Ordo        : Lactobacillales
Family      : Streptococcaceae
Genus      : Streptococcus
Species     : S. pyogenes
Morfologi
       Streptococcus pyogenes ialah bakteri Gram-positif bentuk bundar yang
tumbuh dalam rantai panjang  dan merupakan penyebab 
infeksi Streptococcus Grup A. Streptococcus pyogenes menampakkan 
antigen grup A di dinding selnya dan beta-hemolisis saat dikultur di plat
agar darah. Streptococcus pyogenes khas memproduksi zona beta-hemolisis
yang besar, gangguan eritrosit sempurna dan pelepasan hemoglobin,
sehingga kemudian disebut Streptococcus Grup A (beta-hemolisis).
3.  Streptococcus agalactiae
Klasifikasi
Kingdom : Bacteria
Phylum   : Firmicutes
Class       : Coccus
Ordo       : Lactobacillales
Family      : Streptococcaceae
Genus      : Streptococcus
Species     : S. Agalactiae
Morfologi
Streptococcus agalactiae adalah bakteri gram positif yang
merupakan fakultatif anaerob Biasanya ditemukan berpasangan atau
rantai hingga 50 sel atau lebih, bakteri bulat telur ini biasanya 0,5-1,0 x 1,0-
2,0 pM Hal ini β-hemolitik pada agar darah dan memiliki 9 serotipe yang
berbeda.
Streptococcus adalah bakteri patogen yang menyebabkan penyakit seperti
pneumonia, meningitis, necrotizing fasciitis, erisipelas, endokarditis, dan
lainnya. Namun, terdapat bakteri streptococcus yang bersimbiosis
komensalisme dengan manusia. Bakteri-bakteri tersebut biasanya
ditemukan pada kulit, mulut, saluran pernapasan bagian atas, dan usus.
4.      Streptococcus anginosus
Klasifikasi
Kingdom : Bacteria
Phylum   : Firmicutes
Class        : Bacilli
Ordo        : Lactobacillales
Family      : Streptococcaceae
Genus      : Streptococcus
Species     : S. Anginosus
Mofologi
Mungkin akan beta-hemolitik atau nonhemolitik. Bagian Dari bakteri
manusia tumbuhan (budaya yang diperoleh dari mulut, tenggorokan,
kotoran, dan vagina, lainnya).
5.      Streptococcus bovis
Klasifikasi
Kingdom : Bacteria
Phylum  : Firmicutes
Class     : Bacilli
Ordo        : Lactobacillales
Family      : Streptococcaceae
Genus      : Streptococcus
Species     : S. bovis      
Morfologi
S. bovis adalah catalase- dan oksidase negatif, non-motil, non-bersporulasi,
Gram-positif bakteri asam laktat yang tumbuh sebagai pasangan atau rantai
kokus. Ini adalah anggota dari D streptococci grup Lancefield.
Kebanyakan strain non atau gamma-hemolitik, tetapi beberapa juga
menampilkan aktivitas alpha-hemolytic pada ovin piring agar darah.
6.      Streptococcus canis
Klasifikasi
Kingdom : Bacteria
Phylum   : Firmicutes
Class        : Bacilli
Ordo        : Lactobacillales
Family      : Streptococcaceae
Genus      : Streptococcus
Species     : S. Canis
 Morfologi
      Merupakan bakteri beta-hemolitik, pada manusia positive Hyaluronidase,
negative α-Galactosidase dan β-Galactosidase, positive β-Glucuronidase dan
Acid produced from trehalose serta Fibrinolysin.
7.      Streptococcus pneumoniae
Klasifikasi
Kingdom : Bacteria
Phylum   : Firmicutes
Class        : Bacilli
Ordo        : Lactobacillales
Family      : Streptococcaceae
Genus      : Streptococcus
Species     : S. pneumoniae
Mofologi
      Streptococcus pneumoniae, atau pneumokokus, adalah Gram-positif, alpha
hemolytic, anggota anaerobik fakultatif dari genus Streptococcus.
Sebuah bakteri patogen manusia yang signifikan,
 S. pneumoniae diakui sebagai penyebab utama pneumonia pada akhir abad ke
19, dan merupakan subyek dari banyak penelitian kekebalan humoral.
S. pneumoniae berada asymptomatically di nasofaring pembawa sehat. Saluran
pernafasan, sinus, dan rongga hidung adalah bagian tubuh inang yang
biasanya terinfeksi.
8.      Streptococcus mutans
Klasifikasi
Kingdom : Bacteria
Phylum   : Firmicutes
Class        : Bacilli
Ordo        : Lactobacillales
Family      : Streptococcaceae
Genus      : Streptococcus
Species     : S. mutans
Morfologi
      Streptococcus mutans adalah bakteri Gram-positif yang hidup di mulut. Hal
ini dapat berkembang dalam suhu berkisar 18 40 derajat Celcius. Bakteri
memetabolisme berbagai jenis karbohidrat, menciptakan lingkungan asam di
dalam mulut sebagai akibat dari proses ini. Lingkungan asam ini
dalam mulut inilah yang menyebabkan kerusakan gigi.
9.      Streptococcus parasanguinis
Klasifikasi
Kingdom : Bacteria
Phylum   : Firmicutes
Class        : Bacilli
Ordo        : Lactobacillales
Family      : Streptococcaceae
Genus      : Streptococcus
Species     : S. parasanguinis
Mofologi
      Streptococcus parasanguinis adalah bakteri gram positif Streptococcus
genus yang diklasifikasikan sebagai anggota kelompok Streptococcus
viridans. S. parasanguinis adalah salah
satu dari penjajah awal utama permukaan gigi dalam rongga mulut
manusia. Struktur permukaan sel termasuk pili dan fimbriae memungkinkan
bakteri untuk melekat pada permukaan mulut..
10.  Streptococcus peroris
Klasifikasi
Kingdom : Bacteria
Phylum   : Firmicutes
Class        : Bacilli
Ordo        : Lactobacillales
Family      : Streptococcaceae
Genus      : Streptococcus
Species     : S. peroris
Morfologi
Studi taksonomi dilakukan pada delapan strain alpha-
hemolitik streptokokus yang menunjukkan nilai-nilai DNA-
DNA hibridisasi kesamaan yang sangat rendah dengan semua anggota yang
ditetapkan kelompok mitis dari genus Streptococcus.
11.  Streptococcus ratti
Klasifikasi
Kingdom : Bacteria
Phylum  : Firmicutes
Class       : Bacilli
Ordo       : Lactobacillales
Family     : Streptococcaceae
Genus     : Streptococcus
Species    : S. ratti
Morfologi
  Streptococcus ratti adalah spesies Streptococcus. Streptococcus Ratti dapat
dilihat sebagai jenis bakteri mulut. Ini adalah jenis antibakteri yang dapat
ditemukan pada orang sehat. Salah satu contoh mungkin rongga mulut.
Streptococcus Ratti juga merupakan komponen biofilm gigi.
12.  Streptococcus salivarius
Klasifikasi
Kingdom : Bacteria
Phylum   : Firmicutes
Class        : Bacilli
Ordo        : Lactobacillales
Family      : Streptococcaceae
Genus      : Streptococcus
Species     : S. salivarius
Morfologi
      S. salivarius merupakan bakteri Gram-positif berbentuk bulat yang menjajah
mulut dan saluran pernapasan bagian atas dari manusia beberapa jam setelah
lahir, membuat paparan lebih lanjut untuk bakteri berbahaya di sebagian besar
keadaan. Bakteri dianggap sebagai patogen oportunistik, jarang menemukan
jalan ke dalam aliran darah, di mana ia telah terlibat
dalam kasus septicemia pada orang dengan neutropenia, (kekurangan sel darah
putih).
13.  Streptococcus parasanguis
Klasifikasi
Kingdom : Bacteria
Phylum   : Firmicutes
Class        : Bacilli
Ordo        : Lactobacillales
Family      : Streptococcaceae
Genus      : Streptococcus
Species     : S. Parasanguis
Morfologi
S. parasanguis adalah gram positif, non-motil, katalase organisme-negatif
dan anggota dari kelompok sanguinis dari viridans streptococcus. Hal ini
tidak mapan patogen manusia, tetapi telah diisolasi dari darah manusia dan
urin dan dari tenggorokan.
14. Streptococcus thermophilus  
Klasifikasi
Kingdom : Bacteria
Phylum  : Firmicutes
Class       : Bacilli
Ordo       : Lactobacillales
Family     : Streptococcaceae
Genus     : Streptococcus
Species    : S. thermophilus
Morfologi

Streptococcus thermophilus (sebelumnya nama Streptococcus salivarius sub
sp. Thermophilus) adalah bakteri gram positif dan anaerob fakultatif bersifat
homofermentatif, kelompok viridans Ini tes negatif
untuk sitokrom, oksidase dan katalase, dan positif untuk kegiatan alpha-
hemolitik ini adalah non-motil dan tidak membentuk endospora.
15. Streptococcus sanguinis
Klasifikasi
Kingdom : Bacteria
Phylum   : Firmicutes
Class        : Bacilli
Ordo        : Lactobacillales
Family      : Streptococcaceae
Genus      : Streptococcus
Species     : S. sanguinis
Morfologi
Streptococcus sanguinis, sebelumnya dikenal sebagai Streptococcus sanguis,
adalah Gram positif fakultatif spesies coccus aerobik bakteri dan anggota
kelompok viridans Streptococcus. S. sanguinis merupakan penghuni normal
dari mulut manusia yang sehat di mana ia sangat ditemukan pada plak gigi, di
mana ia memodifikasi lingkungan untuk membuatnya kurang ramah bagi jenis
lainnya Streptococcus yang menyebabkan gigi berlubang, seperti
Streptococcus mutans.
16. Streptococcus sobrinus
Klasifikasi
Kingdom : Bacteria
Phylum   : Firmicutes
Class        : Bacilli
Ordo        : Lactobacillales
Family      : Streptococcaceae
Genus      : Streptococcus
Species     : S. sobrinus
Morfologi
Streptococcus sobrinus is a Gram-positive, catalase-negative, non-motile,
and anaerobic member of the genus Streptococcus
17. Streptococcus suis
Klasifikasi
Kingdom : Bacteria
Phylum   : Firmicutes
Class        : Bacilli
Ordo        : Lactobacillales
Family      : Streptococcaceae
Genus      : Streptococcus
Species     : S. suis
Morfologi
Streptococcus suis adalah, bakteri Gram-
positif kacang berbentuk, dan patogen penting
dari babi. Endemik di hampir semua negara dengan industri babi yang luas,
S. suis juga penyakit zoonosis, mampu transmisi ke manusia dari babi.
18. Staphylococcus epidermidis
Klasifikasi
Kingdom : Bacteria
Phylum   : Firmicutes
Class        : Bacilli
Ordo        : Lactobacillales
Family      : Staphylococcaceae
Genus      : Staphylococcus
Species     : S. epidermidis
Morfologi
      Staphylococcus epidermidis adalah bakteri Gram-positif, dan salah
satu dari lebih dari 40 spesies yang termasuk genus Staphylococcus. Ini adalah
bagian dari flora manusia normal, biasanya flora kulit, dan kurang
umum flora mukosa.Meskipun S . epidermidis biasanya tidak patogen, pasien
dengan sistem kekebalan tubuh berada pada risiko mengembangkan infeksi.
19. Staphylococcus haemolyticus
Klasifikasi
Kingdom : Bacteria
Phylum   : Firmicutes
Class        : Bacilli
Ordo       : Lactobacillales
Family      : Staphylococcaceae
Genus      : Staphylococcus
Species     : S. haemolyticus
Morfologi
Staphylococcus haemolyticus adalah anggota dari koagulase-negatif
staphylococcus (kontra). Ini adalah bagian dari flora kulit manusia, dan
populasi yang terbesar biasanya ditemukan di aksila, perineum, dan daerah
inguinal. S. haemolyticus juga berkolonisasi prosimians, monyet, dan
hewan domestik
20. Staphylococcus lugdenensis
Klasifikasi
Kingdom : Bacteria
Phylum   : Firmicutes
Class        : Bacilli
Ordo        : Lactobacillales
Family      : Staphylococcaceae
Genus      : Staphylococcus
Species  : S. lugdenensis
Morfologi
Staphylococcus lugdunensis adalah anggota koagulase-negatif
dari Staphylococcus genus, yang terdiri dari bakteri Gram-positif
dengan sel bulat yang muncul dalam cluster
21. Micrococcus
Micrococcus adalah bakteri yang berbentuk bola, ukurannya berkisar
antara 0,5 sampai 3 mikrometer. Bakteri Micrococcus dapat
ditemukan di lingkungan akuatik, tanah, produk susu, dan kulit
manusia. Mereka bertindak sebagai patogen, saprofit oportunistik,
dan juga tumbuh subur sebagai organisme komensal. Penyakit yang
disebabkan oleh spesies Micrococcus diantaranya adalah meningitis,
endokarditis, syok septik, pneumonia kavitasi, arthritis septik, dan
bakteremia.
22. Listeria
Bakteri gram positif ini terkenal karena menyebabkan penyakit yang disebut
listerosis. Spesies bakteri yang biasa diobservasi dari genus ini adalah Listeria
monocytogenes, yang bisa ditemukan di lingkungan seperti tanah, makanan,
tanaman, air sungai, dan lain-lain. Bakteri yang dikelompokkan dalam genus
Listeria ini memanfaatkan mekanisme interseluler untuk menimbulkan infeksi.
Namun bakteri ini jarang menyebabkan infeksi pada manusia karena dihadang
oleh sistem kekebalan tubuh.
IDENTIFIKASI BAKTERI KOKUS GRAM POSITIF

• Identifikasi morfologi bakteri dapat diteliti melalui teknik pewarnaan.

Salah satu teknik pewarnaan adalah pewarnaan Gram. Pewarnaan
Gram termasuk ke dalam pewarnaan diferensial karena dapat
membagi kelompok bakteri Gram positif dan Gram negatif.
• Pewarnaan gram ditemukan oleh Christian Gram pada tahun 1884
untuk membedakan bakteri berdasarkan susunan dinding selnya.
berdasarkan ketebalan lapisan peptidoglikan pada dinding sel dengan
sistem pewarnaan.
• Bakteri Gram positif (menyerap violet): memiliki dinding sel
dengan peptidoglikan yang tebal dan kompak (30 lapisan),
permeabilitas rendah, contoh: Staphylococcus aureus
• Bakteri Gram negatif (menyerap merah): memiliki dinding sel
dengan peptidoglikan tipis (1-2 lapis) dan tidak kompak,
permeabilitas tinggi, contoh: Escherichia coli.
TUJUAN FIKSASI
• Melekatkan spesimen pada object glass
• Membunuh kuman tanpa merubah morfologi
• Sebagai intensifier sehingga kuman mudah dicat
• Menyimpan slide yang tak mudah dicat
FUNGSI PEWARNAAN
• Memberi warna pada sel-sel atau bagian-bagian lain,
sehingga menambah daya kontras dan tampak jelas
• Menunjukkan struktur sel
• Menunjukkan distribusi dan susunan kimia sel
• Membedakan mikroba satu dengan lainnya
Reagen-reagen yang digunakan dalam pengecatan
gram adalah:
1. Larutan violet kristal hucker sebagai cat utama yang akan
diikat oleh peptidoglikan bakteri = Gram A
2. Iodin sebagai mordan untuk mengintensifkan cat utama =
Gram B
3. Ethanol 95% sebagai bahan peluntur untukk melunturkan
cat utama = Gram C
4. Safranin sebagai cat penutup untuk mewarnai kembali sel-
sel yang sudah kehilangan warna cat utamanya = Gram D
PROSES PENGECATAN GRAM

Pemberian cat utama

• Kristal violet (ungu)

Pengintensifan cat utama

• Lar.Mordan

Pencucian (Dekolorisasi)
• Lar. alkohol

Pemberiaan cat penutup (cat lawan)

• Safranin
GRAM STAINING
 PEWARNAAN GRAM

• Pada saat pemberian larutan cat kristal violet, bakteri

gram postif dan negatif sam-sama berwarna ungu.
• Saat ditetesin iodin, pada gram positif terbentuk
kompleks iodin kristal violet sehingga sel berwarna biru,
demikian juga gram negatif.
• Namun setelah pencucian dengan etanol warna ungu
yang diikat oleh bakteri gram NEGATIF luntur,
sedangkatkan pada bakteri gram POSITIF tidak.
BAKTERI GRAM POSITIF
GAMBARAN MIKROSKOPIS
• Bakteri Gram negatif yang bersifat patogen lebih
berbahaya daripada bakteri Gram positif, karena
membran luar pada dinding selnya dapat melindungi
bakteri dan sistem pertahanan inang dan menghalangi
masuknya obat-obatan antibiotik.
• Senyawa lipopolisakarida pada membran luar bakteri
Gram negatif dapat bersifat toksik (racun) bagi inang
yang memicu aktivasi sistem kekebalan.
 KESALAHAN-KESALAHAN DALAM PEWARNAAN GRAM

Presipitasi kristal violet → disangka sebagai gram positif coccus

Presipitasi kristal violet → disangka sebagai gram positif
coccus
OVERDECOLORIZATION
KELEBIHAN PEWARNAAN GRAM
Kelebihan :
• Pewarnaan Gram penting sebagai pedoman awal untuk
memutuskan terapi antibiotik, sebelum tersedia bukti definitif
bakteri penyebab infeksi (kultur dan tes kepekaan bakteri
terhadap antibiotik). Hal ini karena bakteri Gram positif dan
negatif mempunyai kepekaan yang berbeda terhadap berbagai
jenis antibiotika.
• Kadang-kadang morfologi bakteri yang telah diwarnai Gram
mempunyai makna diagnostik. Misalnya pada pemeriksaan
Gram ditemukan Gram negatif diplococci intraseluler dari
spesimen pus (nana) uretral, maka memberikan presumptive
diagnosis untuk penyakit infeksi gonore.
KEKURANGAN PEWARNAAN GRAM

• Pewarnaan Gram memerlukan mikroorganisme dalam

jumlah banyak yakni lebih dari 104 per ml. Sampel yang
cair dengan jumlah kecil mikroorganisme misalnya cairan
serebrospinal, memerlukan prosedur sentrifuge dulu untuk
mengkonsentrasikan mikroorganisme tersebut. Pellet
(endapan hasil sentrifuge) kemudian dilakukan pengecatan
untuk diperiksa secara mikroskopis.
THANK YOU