Sitotoksisitas Sediaan Nanopartikel Kitosan miR-217

terhadap Cell Line Karsinoma Hepatoseluler HepG2:

Kajian In Vitro terhadap Ekspresi mRNA PTEN dan p21

Dhani Rinaldi Maulana

18/43043/PMU/09554
Pembimbing Tesis:
Prof. dr. Sofia Mubarika Haryana, M.Med.Sc, Ph.D
Dr.rer.nat. Ronny Martien, M.Si
Penguji Tesis:
Dr. Med. dr. Indwiani Astuti
Dr. Dini Wahyu Kartika Sari, S.Pi, M.Si

SEKOLAH PASCASARJANA
UNIVERSITAS GADJAH MADA
YOGYAKARTA
2021
 KHS Sirosis
Latar Belakang

(Suyadi et al)

• Karakteristik nanopartikel kitosan

• Sitotoksisitas nanokitosan miR-217 pada sel KHS
• ekspresi gen relatif dari sel KHS (PTEN & p21)
Permasalahan & Tujuan Penelitian

Apakah sediaan nanokitosan mampu • uji enkapsulasi, elektroforesis, scanning

menghantarkan mimik miR-217 ke dalam sel electron microscopy (SEM), Uji distribusi
HepG2? partikel dan pengamatan ekspresi miR-217

Bagaimana efek pemberian sediaan nanokitosan • Uji sitotoksisitas terhadap cell line HepG2
miR-217 terhadap pertumbuhan sel HepG2?

Bagaimana pengaruh pemberian mimik miR-217 • Analisis ekspresi relatif dari PTEN dan
terhadap ekspresi mRNA PTEN dan p21 pada cell p21
line HepG2?
Manfaat Penelitian

Formula nanokitosan sebagai vektor mimik miR-217

Penggunaan terapi berbasis miRNA dalam

penanganan kasus KHS

Evaluasi miR-217 sebagai kandidat terapi KHS

Menjadi dasar untuk penelitian lanjutan dalam

pengembangan terapi KHS secara umum
Keaslian Penelitian

POIN UTAMA SITASI

Sitotoksisitas lipofectamine miR-217 terhadap HepG2 dan efek Zhang et al, 2017
inhibisinya pada MTDH
miR-217 mampu menghambat ekspresi PTEN pada model gagal Nie et al, 2018
jantung
Peningkatan ekspresi p21 oleh miR-let-7b mampu menghambat Hui et al, 2020
proloferasi sel pada jaringan KHS
Sediaan nanopartikel kitosan efektif dalam menghantarkan miR- Ysrafil, 2018
155-5p dan miR-324-5p ke sel SKOV3
Karsinoma Hepatoseluler
PTEN dan p21

p21 dapat berperan sebagai onkogen & anti-onkogen (Ohkosi, Yano, & Matsuda, 2019)
Mekanisme PTEN dalam KHS (Cretella et al, 2019)

Hubungan ekspresi
Pada KHS, baik PTEN miR-217 + PTEN =
PTEN & p21 terhadap
maupun p21 sama- downregulate PTEN miR-217 + p21 = ?
sitotoksisitas miR-
sama downregulated (Nie et al, 2018)
217 pada KHS?
Formula Nanokitosan

Struktur kimia kitosan

pH 2-6 optimal untuk formulasi Ukuran 10-300 nm

nanopartikel
(Grossman & McNeil, 2012)
(Saeed et al., 2020)
Tripolifosfat (TPP) berperan sebagai crosslinker
Landasan Teori

Suyadi et al. Zhang et al., 2017 Nie et al., 2018 Hui et al., 2020 Ysrafil, 2018

• Downregulasi miR-217 • Interaksi miR-217- • Interaksi miR-217 • Downregulasi • Formulasi nanokitosan

pada jaringan KHS MTDH pada HepG2 dengan PTEN p21 pada sel KHS sebagai vector miRNA
Hipotesis Penelitian

Sediaan nanokitosan miR-

n 217 menunjukkan efek m Nan

sa e m ok
k ito rkan sitotoksik pada HepG2 m
did R pe itos
no ta ug NA nga an
n a a n
a l am p2 a e PT ru m
a n gh d 1 a ks EN hi iR-
ia e n k e ti f ka pre da eks 217
d m 7 k pe n m si n pr
se 21 fe
pu - e nu e PT p2 esi
am iR ra ru ng EN 1;
m
m
im
ik

H
m

e pG
2 se
ca
HIPOTESIS na ala d
n m an
i

HIPOTESIS
PENELITIAN
Hasil & Pembahasan
A. Karakterisasi Nanokitosan miR-217 (1)

miR-217 100%
Well 92,19%
+
kosong
nanokitosan

pita miR-217

Efisiensi Enkapsulasi (EE) dari nanokitosan

Hasil & Pembahasan
A. Karakterisasi Nanokitosan miR-217
(2)
Distribusi Ukuran Partikel

Ukuran Partikel (nm) PDI

Nanokitosan
miR-217 413,3 ± 5,77
0,4

Pengamatan SEM
Hasil & Pembahasan

Kontrol HepG2 HepG2 + nanokitosan miR-217

Hasil & Pembahasan
B. Uji Sitotoksisitas Nanokitosan miR-217 terhadap HepG2
Hasil & Pembahasan
C. Ekspresi Relatif dari PTEN dan
p21
PTEN p21
PCT = 0,31
PCT = 0,31
Penutup
Kesimpulan
Formulasi nanokitosan berhasil menghantarkan miR-217
ke dalam sel KHS dengan baik didukung oleh data
karakterisasi formula dan ekspresi relatif miR-217
Nanokitosan miR-217 mampu menekan pertumbuhan sel
KHS didukung dengan IC50 sebesar 123,5 μM,
Nanokitosan miR-217 mempengaruhi ekspresi
mRNA PTEN dan p21
Rekomendasi
Penelitian lanjutan untuk mengkaji lokasi p21 pada sel
KHS terkait fungsi gandanya sebagai onkogen & tumor
supresor
Penelitian lanjutan terhadap pengaruh miR-217 dalam
peningkatan ekspresi p21 pada jaringan KHS, khususnya
pada sisi interaksi miRNA-mRNA yang non-mainstream.
Terima Kasih