Kelompok 2

1.Dhea Aprilia (PO.71.39.1.19.007)

2.Dian Rana Yusriah (PO.71.39.1.19.008)

3.Elza Novia (PO.71.39.1.19.009)

4.Fransiska Angelina (PO.71.39.1.19.010)

5.Haikal Ahmad Mujahidin (PO.71.39.1.19.011)

6.Hanifah Dzakirah (PO.71.39.1.19.012)

HIGH PERFORMANCE LIQUID
CHROMATOGRAPHY
 HPLC adalah singkatan dari High Performance Liquid
Chromatography, yaitu alat yang berfungsi mendorong analit melalui
sebuah kolom dari fase diam ( yaitu sebuah tube dengan partikel bulat
kecil dengan permukaan kimia tertentu) dengan memompa cairan (fase
bergerak) pada tekanan tinggi melalui kolom.
KOMPONEN UTAMA
Komponen utama dari HPLC yaitu,

• Pompa
• Injector
• elusi gradient
• Kolom
• Detector
• pengolahan data.
 PRINSIP KERJA

HPLC menggunakan fase gerak cair untuk memisahkan komponen

sampel. Komponen dilarutkan dalam pelarut, kemudian dipaksa
melewati kolom pada tekanan tinggi. Kemudian komponen
berinteraksi dengan fase stasioner dan keluar pada waktu yang
berbeda-beda, sama seperti dalam gas chromatography.
 Kelebihan & Kekurangan HPLC
KELEBIHAN
1. Mampu memisahkan molekul - molekul dari suatu campuran
2. Mudah melaksanakannya
3. Kecepatan analisis dan kepekaan yang tinggi
4. Dapat dihindari terjadinya dekomposisi / kerusakan bahan yang dianalisis ü
Resolusi yang baik

KEKURANGAN
5. Larutan harus dicari fase diamnya terlebih dahulu
6. Hanya bisa digunakan untuk asam organic
7. Harus mengetahui kombinasi yang optimum antara pelarut, analit, dan gradient
elusi
8. Harganya mahal sehingga penggunaannya dalam lingkup penelitian yang terbatas
 PENERAPAN HPLC DALAM ANALISIS
SENYAWA OBAT

Metode HPLC merupakan metode yang sangat populer untuk

menetapkan kadar senyawa obat baik dalam bentuk sediaan atau dalam
sampel hayati .Hal ini disebabkan HPLC merupakan metode yang
memberikan sensitifitas  dan spesifitas yang tinggi. Contohnya adalah
menganalisis parasetamol dan kafein dalam suatu campuran.
 PENERAPAN HPLC DALAM ANALISIS
SENYAWA OBAT
Pengujian kadar parasetamol dalam obat menggunakan teknik HPLC, dalam
proses analisisnya HPLC memiliki beberapa tahapan. Diawali dengan
menginjeksikan sampel uji yaitu larutan obat yang sebelumnya telah disaring
dengan membran PTFE ke dalam kolom HPLC dengan injektor khusus /
syringe yang bervolume 20 µL, penyaringan sebelum penginjeksian ini
dilakukan agar tidak terjadi penyumbatan didalam kolom dan menghilangkan
gas dari pelarutnya. Sampel didorong cepat saat melalui kolom dengan
bantuan pompa bertekanan tinggi. Di dalam kolom, komponen- komponen
pada sampel dipisahkan berdasarkan pada perbedaan kekuatan interaksi
solut terhadap fasa diamnya
 PENERAPAN HPLC DALAM ANALISIS
SENYAWA OBAT
Dalam penetapan kandungan kafein digunakan sampel berupa minuman berkafein.
HPLC yang digunakan adalh jenis HPLC Series 200 dengan detector 275 nm Perkin
Elmer, Kolom : Supelcosil LC : 18, (25 cm X 4,6mm, 5 μm). Menggunakan asam asetat
70% dan methanol 30% sebagai fasa gerak. Proses pengerjaan terdiri dari 2 tahap, yaitu
tahap preparasi dan tahap injection ke HPLC.
Mengenal HPLC
Bagian-Bagian Instrumen HPLC
Terima Kasih