PRAKTIKUM IMUNOSEROLOGI

FEBRILE
A N T I G EN
Disusun oleh Kelompok 3A :
1. Ade Nur Aisyah
2. Anggita Pangastuti
3. Helda Maulida
4. Rahmawati Pauziah
Suspensi anti gen bernoda untuk tes Widal dan Weil-Felix. Untuk
identi fi kasi dan deteksi kuanti tati f anti bodi spesifi k dalam serum
manusia untuk tujuan epidemiologis dan diagnosti k, terutama dalam
penyelidikan demam dan infeksi enterik dengan patogen
Salmonellae, Rickett siae dan Brucellae tertentu. Mereka cocok
untuk uji lempeng cepat dan tabung agluti nasi.

HANYA UNTUK PENGGUNAAN DIAGNOSTIK IN VITRO.

ISI
MAST® ASSURE FEBRILE
ANTIGENS ™ (kecuali
diwarnai
ditandai) suspensi anti gen dari
bakteri yang mati, diwarnai
untuk meningkatkan
pembacaan
uji agluti nasi. Antigen 'O'
somati k diwarnai biru dan
fl agela 'H' anti gen berwarna
merah dan tersedia sebagai
berikut:
 STABILITAS DAN
PENYIMPANAN

Simpan belum dibuka pada suhu 2 hingga 8⁰C dalam posisi

tegak hingga tanggal kedaluwarsa yang ditunjukkan pada label
kemasan. Setelah dibuka, MAST® ASSURE FEBRILE ANTIGENS
harus disimpan pada suhu 2 hingga 8⁰C dan dapat digunakan
hingga tanggal kedaluwarsa yang tertera pada label. Reagen
mungkin peka cahaya. Jangan membekukan reagen.
PERINGATAN
DAN
P E untuk
Hanya N Cpenggunaan
E G Adiagnosti
H A kNin vitro. Amati ti ndakan pencegahan biohazard dan
teknik asepti k yang disetujui. Untuk digunakan hanya oleh personel laboratorium yang
terlatih dan berkualifi kasi. Sterilkan semua limbah biohazard sebelum dibuang.
Peralatan non-sekali pakai harus disterilkan setelah digunakan dengan metode yang
sesuai. Tumpahan bahan yang berpotensi infeksius harus diserap dan dibuang seperti di
atas. Tempat tumpahan harus disterilkan dengan disinfektan atau alkohol 70%. Jangan
gunakan pipet melalui mulut. Reagen kontrol mengandung serum kelinci. Produk
mengandung natrium azida (0,095% b / b) dan Thiomerosal ™ (0,0095% b / b) sebagai
pengawet. Lihat lembar Data Keamanan Produk. Jangan menghirup atau menelan
aerosol - cuci percikan dengan banyak air.
K EW A SP A DA A N
ANALITIS

Jangan ubah prosedur pengujian. Jangan mencairkan atau

memodifi kasi reagen dengan cara apapun. Biarkan semua reagen
dan sampel mencapai suhu kamar (18 hingga 30⁰C) sebelum
digunakan. Jangan menukar reagen dari kelompok kit yang
berbeda.
B A H A N DIBUTUHKAN T A P I
TIDAK DISEDIAKAN

Persediaan dan peralatan mikrobiologi standar seperti gelas kecil

atau tabung plasti k, pipet, slide reaksi dengan latar belakang puti h.
Tongkat pencampur dan penangas air (waterbath) 37⁰C dan 50⁰C.
P RO SEDUR
• Persiapan sampel
Gunakan sampel serum segar yang
diperoleh dengan sentrifugasi darah
yang membeku. Sampel serum dapat
disimpan pada suhu 2 hingga 80C
hingga 48 jam atau dibekukan untuk
penyimpanan jangka panjang. Jangan
gunakan plasma atau spesimen serum
yang ti dak aktif, hemolisis, lipemik
atau terkontaminasi panas.
P RO SEDUR

Prosedur Titrasi Lempeng Cepat

1.Dengan menggunakan pipet, keluarkan 80μl, 40μl, 20μl, 10μl dan

5μl serum yang tidak diencerkan ke sebaris lingkaran berdiameter 3
cm pada slide reaksi.
2.Kocok botol reagen antigen dengan baik dan tambahkan satu tetes
suspensi antigen yang tidak diencerkan ke setiap serum aliquot.
3.Aduk rata menggunakan tongkat pencampur dan putar slide.
4.Baca aglutinasi setelah satu menit.
P RO SEDUR

Prosedur Aglutinasi Tabung

Semua hasil titrasi slide cepat positif harus dikonfirmasi dengan menggunakan teknik
berikut.
1.Beri label 8 tabung plastik kecil di rak.
2.Dengan menggunakan pipet, tuangkan 1,9 ml larutan garam 0,85% ke dalam tabung
pertama, dan 1,0 ml ke dalam tujuh tabung lainnya.
3.Dengan menggunakan pipet, keluarkan 0,1 ml serum pasien yang tidak diencerkan ke
dalam tabung pertama.
4.Campur isi dengan pipet dengan baik. Jangan sampai membuat gelembung udara.
5.Keluarkan 1,0 ml dari tabung pertama ke dalam tabung kedua dan aduk rata.
6.Lanjutkan metode penggandaan pengenceran hingga tabung ketujuh dan kemudian
buang 1,0 ml dari tabung ketujuh. Tabung kedelapan hanya akan berisi saline
sebagai kontrol dan oleh karena itu tidak boleh mengandung serum apapun.
.
P RO SEDUR

Prosedur Aglutinasi Tabung

7. Kocok botol pereaksi antigen dengan baik sebelum digunakan kemudian

tambahkan satu tetes suspensi antigen yang sesuai ke setiap tabung dan aduk rata.
8.Inkubasi tabung sebagai berikut :
o Antigen Salmonella “O” dan Proteus selama 4 jam pada suhu
50oC. oAntigen Salmonella “H” selama 2 jam pada suhu 50oC.
o Brucella Antigen selama 24 jam pada suhu 37oC.
o Salmonella typhi Vi selama 2 jam pada suhu 37oC.
Biarkan semua tabung semalaman di lemari es, kemudian biarkan
mencapai suhu kamar sebelum membaca hasilnya.
Catatan : Sangat penting bahwa ketika tabung ditempatkan dalam
penangas air,
ketinggian air harus mencapai sekitar 2/3 dari ketinggian isi
tabung. Ini akan mempertahankan arus konveksi di dalam tabung dan
I N T E R P R E T A S I HAS I L

Prosedur Titrasi Lempeng Cepat

Aglutinasi yang terlihat di lingkaran mana pun dari kartu reaksi
menunjukkan hasil berikut dalam prosedur aglutinasi uji tabung yang
sesuai. Dengan cara ini prosedur titrasi geser cepat memberikan perkiraan
hasil yang diharapkan dalam prosedur aglutinasi tabung.

Penting bahwa semua pengenceran dalam uji slide dilakukan untuk

memungkinkan adanya efek "prozon" (di mana konsentrasi serum yang
lebih tinggi dapat memberikan hasil negatif tetapi pengenceran lebih lanjut
dapat memberikan hasil yang positif) untuk dikenali dan diabaikan.
I N T E R P R E T A S I H ASI L T I T R A S I L E M P E N G C E P A T
I N T E R P R E T A S I HAS I L

Prosedur Aglutinasi Tabung

Tabung harus dibaca setelah waktu inkubasi yang disarankan untuk
menghilangkan kemungkinan hasil yang salah.Hasil negatif dan kontrol
saline seharusnya tidak menunjukkan perubahan tampilan dan harus
menunjukkan karakteristik "pusaran" saat dijentikkan. Tabung tidak boleh
diguncang. Tes positif akan menunjukkan aglutinasi flokular yang jelas di
seluruh tabung. Tabung terakhir yang menunjukkan tanda-tanda aglutinasi
harus diambil sebagai titer untuk tes tersebut.
I N T E R P R E T A S I HASIL A G L U T I N A S I T A B U N G
BATASAN
P EN G G UN A A N
Telah ditemukan bahwa banyak serotipe Salmonella yang memiliki
antigen somatik dari jenis yang sama. Oleh karena itu, aglutinasi salah
satu antigen Salmonella dengan serum manusia tidak boleh dianggap
sebagai bukti infeksi oleh satu organisme tertentu, melainkan sebagai
infeksi oleh organisme dengan struktur antigenik yang serupa. Tes
harus dibaca setelah waktu inkubasi yang disarankan untuk
menghilangkan kemungkinan hasil yang salah.
KONTROL
K UA LI T A S

Direkomendasikan bahwa kontrol kualitas harus dilakukan secara

berkala dengan kontrol demam positif dan negatif untuk memverifikasi
bahwa tes tersebut bekerja dengan benar. Jangan gunakan reagen jika
menunjukkan tanda kerusakan.
T HA N K
YOU!