PERTUMBUHAN BAKTERI

Apa itu
pertumbuhan ?
Pertumbuhan
 Secara individu artinya :
 suatu pertambahan bagian-bagian sel dan
atau unsur-unsur kimia dari bagian-bagian
sel tersebut.
 Adanya pertumbuhan sel ditandai oleh
pertambahan ukuran dan pembelahan sel
 Secara populasi artinya :
 pertumbuhan bakteri merupakan akibat
dari pertumbuhan sel secara individu.
 Pertumbuhan populasi ditunjukkan dengan
pertambahan jumlah sel dan/ massa sel
yang tumbuh
 Pertumbuhan bakteri

Tumbuh:
 Jumlah sel
 Massa sel bertambah
 Senyawa makromolekul sel
Hal yang terjadi
selama siklus sel
adalah :

 Pertambahan ukuran
yang merupakan
perluasan dinding sel
dan membran sel
 Pembentukan sekat
 Pembagian DNA ke
sel anak

Pertumbuhan sel bakteri :

1 Sel  2 sel  4 sel
 Faktor yang
mempengaruhi
pertumbuhan ?
 Faktor yang mempengaruhi
pertumbuhan mikroba

 Nutrisi
 Air
 Temperatur
 pH
 Kadar O2
 Cahaya
 Salinitas
 Kelembaban
 NUTRISI
 KARBON (C)
 NITROGEN (N)
 OKSIGEN (O)
 SULFUR (S)
 FOSFOR (P)
 UNSUR LAIN
 suhu & Oksigen

Kondisi fisik Tipe mikroba Kondisi biakan

kelompok fisiologis (inkubasi)
Suhu Psikrofil 0 – 30 oC
Mesofil 25 – 40 oC
Termofil :
termofil fakultatif 25 – 55 oC
termofil obligat 45 – 75 oC
Kebutuhan akan Aerob Harus ada oksigen
gas Anaerob Tanpa oksigen
Anaerob fakultatif Keduanya bisa
Tumbuh dengan
Mikroaerofilik
kadar oksigen
rendah
 ph, cahaya, salinitas

Kondisi fisik Tipe mikroba Kondisi biakan

kelompok fisiologis (inkubasi)
Keasaman atau Kebanyakan bakteri pH optimum
alkalinitas (pH) yang berkaitan dengan 6,5-7,5
kehidupan hewan dan
tumbuhan

pH minimum 0,5
Beberapa spesies
eksotik pH maksimum 9,5
Cahaya Fotosintetik (autotrof dan Sumber cahaya
heterotrof)
Salinitas Halofil (halofil obligat) Konsentrasi garam
yang tinggi (10 – 15
% NaCl )
 Pertumbuhan Populasi Bakteri
 Hubungan antara jumlah sel
dengan waktu pertumbuhan
dapat dinyatakan dalam Kurva
Pertumbuhan
 Kurva pertumbuhan bakteri pada
umumnya dibagi dalam 4 fase
 Fase lag
 Fase eksponensial (log)
Four phase in growth curve :
 Fase pertumbuhan a. Bacteria start to reproduce 
acclimatize to the new environment
maksimum/stasioner
b. Reproduction proceeds logarithmically
 Fase kematian
c. Bacteria growth constantly
(growth=dying)
d. Cell gradually die
 FASE LAG
 Tidak ada pertambahan populasi
 Kecepatan pertumbuhan nol/lebih
dari nol tetapi belum mencapai
maksimum
 Fase adaptasi terhadap lingkungan
baru
 Sel bakteri memerlukan bahan-
bahan penting atau enzim enzim
yang perlu disintesis sehingga
substansi interselular bertambah
 Sel mengalami perubahan dalam
komposisi kimiawi dan bertambah
ukurannya
 FASE LOGARITMA / EKSPONENTIAL

 Aktivitas metabolik konstan

 Massa dan jumlah sel
bertambah secara eksponential
 Laju/ waktu generasi konstan
 Biakan dalam keadaan paling
homogen dengan sel-sel yang
semuanya tumbuh pada
kecepatan dan interval yang
sama
 FASE PERTUMBUHAN
STASIONER/SEIMBANG/MAKSIMUM
 Fase dengan kecepatan
pertumbuhan yang stabil
 Beberapa sel mati sedangkan
yang lainnya tumbuh dan
membelah
 Fase maksimum dikarenakan :
 Kekurangan nutrien
 Akumulasi hasil
metabolisme akhir
 FASE KEMATIAN

 Kecepatan pertumbuhan
terus berkurang
 Kematian sel bakteri
 Sel bakteri yang mati lebih
cepat dari pada
terbentuknya sel-sel baru
 WAKTU GENERASI DAN
KECEPATAN PERTUMBUHAN
 Waktu Generasi :
 Waktuyang diperlukan untuk
pembelahan sel dari satu sel
menjadi dua sel anak dengan
sempurna

 Kecepatan pertumbuhan:
 Jumlahgenerasi per satuan
waktu tertentu
Generation time

Time Jumlah
(minutes) bacteria

0 1
20 2
40 4
60 8
80 16
100 32
120 64
180 512
240 4096
300 32768
360 262144
420 2000000
Kapan waktu yang tepat untuk
menghitung kecepatan
pertumbuhan bakteri?
Penentuan kecepatan pertumbuhan
dan waktu generasi
 Dihitung pada fase logaritma karena sel
anakan mempunyai kemampuan tumbuh
yang sama dengan sel induknya
 Untuk menghitung waktu generasi suatu
bakteri diperlukan data ;
 Jumlah sel /massa pada awal
percobaan
 Jumlah sel /massa pada akhir
percobaan
 Jarak waktu dari awal sampai akhir
percobaan
GENERASI KE Jumlah sel pada generasi Rumus
tertentu (b)
0 b.0 = a
1 b.1 = 2 X a 21 a
2 b.2 = 2 X 2 X a 22 a
3 b.3 = 2 X 2 X 2 X a 23 a
.
.
n b.n 2n a

 Dalam logaritma biasa ;

Log b = n log 2 + log a
n = log b – log a = log b/a
log 2 0,310

Atau n = 3,32 (log b – log a)

Waktu generasi
g = t  g= t

n 3,32 (log b – log a)

g = waktu generasi
n = jumlah generasi
t = selang waktu antara pengukuran jumlah sel di
dalam populasi pada suatu saat dalam fase log
(a) dan kemudian pada suatu titik waktu tertentu (b)
a = populasi awal
b = populasi setelah waktu t
log = log 10
3,32 = faktor konversi log 2 – log 10
 soal
Jika 100 sel bakteri ditumbuhkan
selama 5 jam dan menghasilkan
1.730.320 sel.
Berapa jumlah generasi?
Waktu generasi?
1. Jumlah generasi (n)

n = log b – log a = log b/a

log 2 0,310

n= log 1.720.320 – log 100

0,301
n= 14

2. Waktu generasi (g)

g= t
n
g= 60x5 menit
14
g= 21 menit/generasi
Pengukuran pertumbuhan bakteri
Cara mengukur pertumbuhan bakteri

1. Total Plate Count (TPC)/ Viable Cell

Count
2. Filtrasi (very small numbers)
3. Most Probable Number (MPN)
4. Direct Microscopic Count
- Breed Count method : Petroff-Hausser counter
5. Metode secara tidak langsung:
- kekeruhan (turbidity)
- Aktifitas metabolik
- Berat kering
 1. Metode hitungan cawan
(TPC)
Prinsip :
•Pengenceran

•Berdasarkan sel hidup yg tumbuh

membentuk koloni pada medium agar
(jumlah colony forming units= CFU)
Cara perghitungan koloni pada
cawan :
Cawan yang dipilih yang
mengandung jumlah koloni 30-300
Beberapa koloni yang bergabung
jadi satu merupakan kumpulan
koloni yg besar dimana jumlah
koloni diragukan, dihitung sebagai 1
koloni
Suatu deretan (rantai) koloni yg
terlihat sebagai garis tebal dihitung
sebagai satu koloni
soal

 Jikasetelah inkubasi diperoleh 60

dan 64 koloni masing-masing pada
cawan duplo yang mengandung
pengenceran 10-4.
 Berapa jumlah sel/ml ?
Faktor pengenceran = Pengenceran x jumlah yang ditumbuhkan
Jumlah koloni = Jumlah koloni x 1/ faktor pengenceran

 F.pengenceran = 10-4 x 1
= 10-4

 Jumlah koloni = (60+64)/2 x 1/ 10-4

= 6,2 x 105 sel/ml
Kelebihan
Yang terukur adalah sel hidup

Kelemahan
Memerlukan media dan peralatan dalam
jumlah besar
Bahan dan peralatan harus steril
Perlu waktu inkubasi
2. Filtrasi
 Sejumlah volume sampel disaring
 Filter diletakkan di atas medium
 Dihitung jumlah koloni yang tumbuh
 Digunakan untuk mikroorganisme yang
jumlahnya sedikit
Kelebihan
Yang tumbuh menjadi koloni adalah
sel hidup

Kelemahan
Hanya cocok digunakan untuk jumlah
sampel yang mengandung mikroba
sedikit
3. Most Probable Number (MPN)
 adalah metode yang digunakan untuk
menghitung mikroorganisme yang hidup di
dalam sampel yang diuji
 Prinsip : pengenceran berseri (serial
dilution)
 Biasa digunakan untuk sampel heterogen,
seperti: tanah, air, produk pertanian, yang
jumlah sel individu mikroorganisme yang
pasti tidak mungkin ditentukan
Kelebihan
Yang terukur adalah sel hidup

Kelemahan
Memerlukan media dan peralatan
dalam jumlah besar
Bahan dan peralatan harus steril
Perlu waktu inkubasi
4. Direct Microscopic Count
Breed Count method : Petroff-Hausser counter
Kelemahan
Tidak dapat membedakan sel hidup atau mati
Tidak dapat digunakan pada jumlah sel yang
sangat sedikit

Kelebihan
Pelaksanaannya cepat
Tidak memerlukan banyak peralatan
5. Pengukuran secara tidak langsung–
kekeruhan (turbidity) – spektrofotometer
(Absorbansi 450-660 nm)

 Spektrofotometer digunakan untuk mengukur kekeruhan

 Absorbansi/Densitas optis (Optical Density/OD) : ukuran
kuantitatif yang diekspresikan sebagai rasio logaritmik antara
radiasi yang jatuh ke suatu bahan dan yang ditransmisikan
menembus bahan.
Kelebihan
Mudah dan cepat

Kelemahan
Tidak dapat membedakan antara sel mati
dan sel hidup 
Pengukuran secara tidak langsung -
Aktifitas Metabolik
Pengukuran secara tidak
langsung – Berat Kering

• Filtrasi kultur dengan filter (0.20 µm)

• Filtrat dikeringkan pada temp. 80°C
• Hasil: mg berat kering x ml-1
Kelebihan
Untuk mengukur efesiensi fermentasi 
dapat diperhitungkan konsumsi substrat dan
produksi senyawa yang diinginkan

Kelemahan
Tidak dapat membedakan sel yang hidup
dan mati
 APA TUJUAN
MENGUKUR
PERTUMBUHAN
BAKTERI ?
 Faktor lingkungan yang
menghambat pertumbuhan
mikroba
 Kekurangan makanan, air, atau nutrisi
 Populasi yang terlalu padat
 Akumulasi metabolit yang tidak berguna
 Kekurangan oksigen
 Perubahan pH
 Temperatur
TERIMAKASIH