PEDOMAN PEM AIR SECARA MIKROBIOLOGI

• DALAM RANGKA MENINGKATKAN “ Derajat “ KESEHATAN MASYARAKAT

PERLU DILAKSANAKAN PENGAWASAN KUALITAS AIR SECARA INTENSIF &
TERUS MENERUS KUALITAS AIR YG DIGUNAKAN MASYARAKAT HARUS
MEMENUHI SYARAT KESEHAAN AGAR TERHINDAR DARI GANGGUAN KES
• SYARAT –SYARAT KUALITAS AIR YG BERHUBUNGAN DGN KESEHATAN YG
TELAH ADA PERLU DISESUAIKAN DGN PERKEMBANGAN TEKNOLOGI &
UPAYA KES SERTA KEBUTUHAN MASYARAKAT DEWASA INI.
MACAM AIR ADALAH : AIR MINUM, AIR BERSIH,AIR KOLAM RENANG,& AIR
PERMANDIAN.
 AIR MINUM : AIR YG KUALITASNYA MEMENUHI SYARAT KESEHATAN &
DAPAT LANGSUNG DIMINUM
 AIR BERSIH : AIR YG DIGUNAKAN UT/. KEPERLUAN SEHARI-HARI YG
KUALITASNYA MEMENUHI SYARAT KES & DPT DIMINUM APABILA TELAH
DIMASAK
 AIR KOLAM RENANG : AIR DI DLM KOLAM RENANG YG DIGUNAKAN UT./
OLAHRAGA RENANG & KUALITASNYA MEMENUHI SYARAT KES.
 AIR PERMANDIAN UMUM : AIR YG DIGUNAKAN PADA TEMPAT PERMANDIAN
BAGI UMUM TDK TERMASUK PERMANDIAN UT/.PENGOBATAN TRADISIONAL
& KOLAM RENANG YG KUALITASNYA MEMENUHI SYARAT KES.
A I R:
 ZAT MUTLAK BAGI SETIAP MAHLUK HIDUP , KEBERSIHAN AIR SYARAT UTAMA
BAGI TERJAMINNYA KESEHATAN.
 MERUPAKAN TEMPAT BAIK BAGI KEHIDUPAN MO
 MERUPAKAN WAHANA / TEMPAT BAGI BERBAGAI PENYAKIT MENULAR ,
DISENTRI,TYPHES, CHOLERA.
GENUS MO PATOGEN YG DPT DIBAWAH OLEH AIR DIANTARANYA :
 Salmonella spesies
 Shigella spesies
 Entamuba hystolitica
 Vibrio spesies
 Clostridium Tetani
 Escherichia coli
PENGUJIAN AIR DIDASARKAN ATAS ADA TIDAKNYA BAKTERI DARI GOLONGAN “
KOLON”
BAKTERI KOLON MERUPAKAN PENGHUNI BIASA DARI USUS MANUSIA & HEWAN
KEHADIRAN BAKTERI TSB DALAM AIR MENUNJUKKAN ADANYA PENCEMARAN
( INDIKATOR) YG DIGUNAKAN BAKTERI KELOMPOK COLIFORM
 AEROBIK
 BATANG GRAM NEGATIF
 TDK BENTUK SPORA
 FERMENTASI LAKTOSA (ASAM / GAS)
 KUALITAS AIR HARUS MEMENUHI SYARAT KESEHATAN MELIPUTI
 PENGAWASAN KUALITAS AIR BERTUJUAN UT/. MENCEGAH PENURUNAN
KUALITAS & PENGGUNAAN AIR YG DPT MENGGANGGU & MEMBAHAYAKAN
KES, SERTA MENINGKATKAN KUALITAS AIR
 KEGIATAN PENGAWASAN LAPANGAN & PENGAMBILAN CONTOH AIR TERMASUK
AIR PADA PROSES PRODUKSI & DISTRIBUSI
 PEMERIKSAAN CONTOH AIR
 ANALISIS HASIL PEMERIKSAAN
 PERUMUSAN SARAN & CARA PEMECAHAN MASALAH YG TIMBUL
 KEGIATAN TINDAK LANJUT BERUPA PEMANTAUAN UPAYA PENANGGULANGAN /
PERBAIKAN TERMASUK KEGIATAN ENYULUHAN .

KELOMPOK KEHIDUPAN DALAM AIR TERDIRI DARI :

 BAKTERI
 JAMUR
 MIKRO ALGA
 PROTOZOA

KEHADIRAN MIKROBA DI DLM AIR , DPT MENGUNTUNGKAN TETAPI JUGA DPT

MENDATANGKAN KERUGIAN.
MIKROBA YG MENGUNTUNGKAN :
 PLANKTON ( FITOPLANKTON & ZOOPLANKTON) DI DLM AIR MERUPAKAN
MAKANAN UTAMA IKAN KECIL, SELAIN ITU KEBERADAAN TANDA KESUBURAN
PADA PERAIRAN.
 LANJUTAN
 BAKTERI & CENDAWAN DLM BADAN AIR BERFUNGSI SBG DEKOMPOSER
( MENGURAIKAN / MEROMBAK SENYAWA YG ADA DLM AIR.
 MIKROALGA BERKLOROFIL ERPOTENSI MENGHASILKAN OKSIGEN SEHINGGA
NILAI KERUTAN OKSIGEN ( DO =DISSOLVED OXYGEN AKAN NAIK.)
MIKROBA YG MERUGIKAN :
 JR PATOGEN BERBAHAYA BILA DI DLM BADAN AIR,
SALMONELLA,SHIGELLA,VIBRIO,ENTAMUBA DLL
 BILA MIKROBA PENGHASIL TOKSIN YG BERBAHAYA
(CLOSTRIDIUM,PSEUDOMONAS,SALMONELLA,STAPHYLOCOCCUS
 BAKTERI BESI ( CRENOTHRIX ATAU SPHAEROTILUS PUNYA KEMAMPUAN
UT/.MENGOKSIDASI SENYAWA FERRO JADI FERRI MERUBAH WARNA AIR BILA
DISIMPAN.
 MENIMBULKA BAU BUSUK PADA AIR BILA TERSIMPAN DISEBABKAN ADANYA
BAKTERI BELERANG, THIOBACILLUS MEREDUKSI SULFAT

KRITERIA KUALITAS AIR

 AIR YG DIGUNAKAN SEHARI-HARI SEBAIKNYA MEMENUHI SYARAT
KESEHATAN & DPT DIMINUM APABILA TELAH DIMASAK.
 PERSYARATAN INI DITETAPKAN MENKES RI NO : RI/416/MENKES/PER/IX/1998
 SYARAT AIR
• PERSYARATAN KUALITAS AIR SB: MIKROBIOLOG, FISIK, KIMIA & RADIOAKTIF.
1. PARAMETER FISIK
DITENTUKAN : O/.FAKTOR-FAKTOR KEKERUHAN ,WARNA ,BAU,MAUPUN RASA,
DARI KEEMPAT INDIKATOR HANYA BAU YG PENILAYANNYA DITENTUKAN SECARA
SUBYEKTIF
CARANYA : DGN MENGENCERKAN AIR SECARA BERTAHAP,SAMPAI PADA
PENGENCERAN KEBERAPAKALI AIR TSB MASIH BERBAU PADA LARUTAN YG
MASIH ENCER. UMUMNYA PENILAIAN BAU & RASA SERING DILAKUKAN
BERSAMAAN INDIKATOR.
2. PARAMETER KIMIA
PARAMETER : LOGAM AIR
RAKSA,ARSEN,BARIUM,BESI,FLUORIDA,KADMIUM,KALSIUM
KARBONAT,KLORIDA,KROMIUM VALENSI 6, MANGAN, NITRAT,NITRIT,DERAJAT
KEASAMAN,SELENIUM,ZINK,SIANIDA,SULFAT,HIDROGEN,SULFIDA , TEMBAGA ,
TIMBAL,ALDRIN,BENZENA,KHOLR,KALIUM PERMANGANAT.
3. PARAMETER MIKROBIOLOGI.
a. KOLIFORM TINJA: AIR YG MENGANDUNG KOLIFORM TINJA BERARTI AIR TSB TELAH
TERCEMAR OLEH TINJA. TINJA INI SANGAT POTENSIAL UT./ MENULARKAN
PENYAKIT YG BERHUBUNGAN DGN AIR.
b. KOLIFORM TOTAL : BILA AIR MENGANDUNG BAKTERI KELOMPOK INI AKAN DPT
MENGAKIBATKAN PENYAKIT-PENYAKIT SALURAN PENCERNAAN KUMAN
KOLIFORM TOTAL TDK SEPENUHNYA PATOGEN.
 LANJUTAN

4. PARAMETER RADIOAKTIF : APAPUN BENTUK RADIOAKTIF EFEKNYA

SAMA , YAKNI MENIMBULKAN KERUSAKAN SL TERPAPAR ,KERUSAKAN DPT
MENGAKIBATKAN KEMATIAN PERUBAHAN KOMPOSISI GENETIK, DLL DPT
MENIMBULKAN KANKER & MUTASI SEL, PARAMETER RADIOAKTIVITAS
DIBAGI PARAMETER SINAR ALFA,SINAR BETA, SINAR GAMMA.
ANALISIS MIKROBA AIR
 ALAT YG DIGUNAKAN : OVEN,
AUTOCLAVE,INCUBATOR,WATERBATH,TIMBANGAN,BOTOL SAMPEL,PIPET
1ML,5ML,10 ML,LAMPU SPIRTUS,TABUNG REAKSI,TABUNG
DURHAM,OSE/SENGKELIT, DLL
 MEDIA/NUTRISI YANG DIGUNAKAN : LAKTOSE BROTH (SINGLE& DOUBLE
STRENGTH) BRILLIAN GREEN LAKTOSE BILE BROTH (BGLB), SODIUM
THIOSULFATE 10 %
 PEMBUATAN MEDIA/NUTRISI LAKTOSE BROTH SINGLE SRENGTH.
* TIMBANG SESUAI KEINGINAN YG AKAN DIBUAT KEMUDIAN DILARUTKAN &
CAMPUR HINGGA LARUT
*MASUKAN SEBANYAK 10 ML KEDALAM TABUNG REAKSI YG BERISI
TABUNG DURHAM DALAM POSISI TERBALIK KEMUDIAN DITUTUP DGN
KAPAS/KARET
* STERILKAN PADA AUTOCLAVE DGN SUHU 1210C SELAMA 15 MENIT.
* UT./ LB DOUBLE STRENGTH SAMA DGN DIATAS HANYA PENIMBANGAN 2X
LIPAT
 ANALISIS UTAMA
BERDASARKAN PADA PEMERIKSAAN MIKROBIOLOGIS MELIPUTI :
1. ANGKA LEMPENG TOTAL / TOTAL CAUNT
2. PENENTUAN INDEKS PENCEMAR BIOLOGIS ( IPB)
3. PERHITUNGAN NILAI JUMLAH PERKIRAAN TERDEKAT (JPT)
ANGKA LEMPENG TOTAL :
 PERHITUNGAN JUMLAH MIKROBA SECARA KESELURUHAN , TDK BERDASARKAN
PADA JENIS-JENIS MIKROBA TERTENTU. MISALNYA DITENTUKAN BERDASARKAN
PENANAMAN BAHAN DLM JUMLAH & PENGENCERAN TTT KE DLM MEDIA YG
UMUM UT/. BAKTERI, SETELAH MASA INKUBASI TTT,PERHITUNGAN KOLONI
BARU DILAKUKAN, DIANGGAP BAHWA TIAP KOLONI BERASAL DARI SEBUAH SEL,
MAKA JUMLAH KOLONI DIHITUNG SBG JUMLAH SEL YG TERDPT PD BAHAN.
 JENIS MEDIA YG DIGUNAKAN BERBENTUK MEDIA SELEKTIF / PENGAYA

PENENTUAN INDEKS PENCEMAR BIOLOGIS ( IPB)

 UMUMNYA DILAKUKAN BILA AIR AKAN DIPERGUNAKAN SBG BAHAN BAKU UT/.
PABRIK/INDUSTRI ( SBG AIR PENDINGIN, AIR UT/. REKREASI ATAU KOLAM
RENANG)
PERHITUNGAN NILAI JUMLAH PERKIRAAN TERDEKAT (JPT) / MPN
 PERHITUNGAN MIKROBA JUMLAH COLIFORM TOTAL ATAU COLI TINJA DLM
SAMPEL AIR DIPAKAI METODE/CARA TABUNG FERMENTASI ATAU UJI MPN
 PROSEDUR SECARA BERTAHAP ( PRESUMTIVE,CONFIRMATIF,LENGKAP)
 RAGAM 5.1.1 & 5.5.5 ( JAZAD RENIK RENDAH & TINGGI)
 LANJUTAN
 PEDOMAN PENENTUAN KUALITAS AIR MENURUT MENKES RI THN 2002
SEBAGAI PENYEMPURNAAN PEDOMAN SEBELUMNNYA, YAKNI TAHUN 1990,
WHO (1981)MAUPUN PEDOMAN BAKU MUTU AIR GOLONGAN A & GOL B
( PERATURAN PEMERINTAH RI ) THN 1990 MASIH MENGGUNAKAN COLIFORM
TOTAL & COLITINJA SBG PARAMETER MIKROBILOGI AT./ BAKTERIOLOGI
 SAMPAI SAAT INI LAB PEMERIKSAAN AIR DI INDONESIA MASIH MENGACU
KEPADA PEDOMAN KUALITAS AIR PERMENKES RI THN 1990 & PEDOMAN BAKU
MUTU AIR PEMERINTAH RI THN 1990.
 MENGGUNAKAN COLIFORM & COLITINJA SBG PARAMETER MIKROBIOLOGIK

TEHNIK PENGAMBILAN SAMPEL AIR UT./PEM BAKTERIOLOGI

a. PROSEDUR MENSTERILKAN BOTOL SAMPEL
b.KLASIFIKASI TEHNIK PENGAMBILAN SAMPEL AIR
_ SAMPEL DARI AIR KRAN ASAL JARINGAN DISTRIBUSI / POMPA
_ SAMPEL DARI ALIRAN AIR ( DANAU,SUNGAI)
_ SAMPEL DARI SUMUR GALI
PENGEPAKAN ALAT & PENGIRIMAN BOTOL SAMPEL
_ PENGEPAKAN BOTOL
_ PENGIRIMAN SAMPEL AIR UT./ PEM BAKTERIOLOGI
 SKEMA PEMERIKSAAN
JPT / MPN ( MOST PROBABLE NUMBER)

BAHAN /SAMPEL

LAKTOSE BROTH
( TES PERKIRAAN )370C
DOUBLE/SINGEL STRINGTH

B.G.L.B
( TEST PENEGASAN )37 &440C

BACA PADA TABEL MPN

JUMLAH COLIFORM & COLI TINJA

TES LENGKAP
( ISOLASI & IDENTIFIKASI)
 TABEL MPN
VOLUME 10 ML VOLUME 1 ML VOLUME 0,1 ML MPN / 100 ML
0 0 1 2
0 1 0 2
0 1 1 4
1 0 0 2,2
1 0 1 4,4
1 1 0 4,4
1 1 1 6,7
2 0 0 5
2 0 1 7,5
2 1 0 7,5
2 1 1 10
3 0 0 8,8
3 0 1 12
3 1 0 12
3 1 1 16
4 0 0 15
4 0 1 20
4 1 0 21
4 1 1 27
5 0 0 38
5 0 1 96
5 1 1 240
 CARA KERJA JPT/MPN
 PERTUMBUHAN KOLONI BAKTERI COLIFORM SETELAH SAMPEL
DIINOKULASIKAN PD MEDIA CAIR YG SESUAI, DGN MENGAMATI ADANYA
REAKSI FERMENTASI & PEMBENTUKAN GAS DI DLM TABUNG DURHAM,
DILANJUTKAN DGN ISOLASI & IDENTIFIKASI BAKTERI ESCHERICHIA COLI.

UJI PRESUMTIVE ( UJI PERKIRAAN)

 PERALATAN YG DIPAKAI DIPERSIAPKAN DLM KEADAAN STERIL & SEMUA
PEKERJAAN DILAKUKAN SECARA ASEPTIS.
 DISIAPKAN 5 TABUNG YG MASING-MASING TELAH TERISI MEDIA LB
DOUBLE STRENGTH DAN 2 TABUNG YG BERISI LB SINGLE STRENGTH.
 SAMPEL AIR DIPIPET SECARA STERIL DAN DIMASUKAN KEDALAM
- TABUNG “DS” MASING-MASING 10 ML
_ TABUNG SS 1 MASING-MASING 1 ML
_ TABUNG SS 2 MASING-MASING 0,1 ML
 DIKOCOK PERLAHAN-LAHAN AGAR SAMPEL AIR MENYEBAR RATA
KESELURUH BGN MEDIA KEMUDIAN INCUBASI PADA SUHU 370C SELAMA
24-48 JAM
 SETELAH 24 JAM DIAMATI ADANYA GAS POSITIF & WARNA BIAKAN
DIDALAM TIAP-TIAP TABUNG , JIKA BLM TERJADI GAS INCUBASI TETAP
DILANJUTKAN SELAMA 48 JAM.
 UJI CONFIRMATIVE ( PENEGASAN)
• DISIAPKAN MEDIA BGLB 2% MASING –MASING TELAH BERISI 10 ML
 SELANJUTNYA DILAKUKAN PEMINDAHAN / INOKULASI DARI TIAP-
TIAP TABUNG POSITIF GAS KEDALAM MEDIA BGLB DGN
MENGGUNAKAN OSE / SENGKELIT SEBANYAK 1 – 2 OSE
 KEMUDIAN DI INCUBASI LAGI PADA SUHU YANG SAMA. DAN SUHU
440C UNTUK COLI TINJA.
 DILAKUKAN PENGAMATAN TERHADAP PEMBENTUKAN GAS POSITIF,
ANGKA YG PALING MUNGKIN DARI COLIFORM TERSEBUT DAPAT
DILIHAT / DIBACA PADA DAFTAR TABEL MPN.
UJI LENGKAP ( COMPLETED TES)
 TEST INI DIPERGUNAKAN UT/. MENERUSKAN & MELENGKAPI TEST
PENEGASAN & PADA IDENTIFIKASI E.COLI
 DARI PEMERIKSAAN PENEGASAN YG MENUNJUKKAN POSITIF GAS
DIAMBIL DGN MENGGUNAKAN OSE KEMUDIAN DIINOKULASIKAN
PADA MEDIA SELEKTIVE UNTUK E.COLI
 DENGAN DILENGKAPI UJI/TES BIOKIMIA SERTA TEST AGLUTINASI.
 ANGKA LEMPENG TOTAL (ALT) / PLAT CAUNT AGAR

DILAKUKAN DENGAN METODE POUR PLATE UNTUK MENENTUKAN JUMLAH

MIKROORGANISME YG TERDPT DALAM SAMPEL
1. ALAT YG DIGUNAKAN DLM KEADAAN STERIL
2. DISIAPKAN 5 TABUNG MASING-MASING DIISI 9 ML PEPTON DILUTION FLUID
(PDF) HASIL HOMOGENISASI PADA PENYIAPAN CONTOH MERUPAKAN
PENGENCERAN 10-1
3. DARI LARUTAN 10-1 DIPIPET DIMASUKAN PADA TABUNG PDF PERTAMA
KOCOK SAMPAI HOMOGEN HINGGA DIPEROLEH PENGENCERAN 10-2 DIBUAT
PENGENCERAN SELANJUTNYA HINGGA 10-6
4. DARI TIAP PENGENCERAN DIPIPET 1ML SECARA ASEPTIS KEDLM CAWAN
PETRI & DIBUAT DUPLO , KEMUDIAN DITUANGI MEDIA PCA BERSUHU KIRA-
KIRA 450C SEBANYAK 15-20 ML. SAMBIL DIGOYANG & DIPUTAR AGAR
BERCAMPUR TERSEBAR MERATA UT/. MENGETAHUI STERILITAS MEDIA
DIGUNAKAN KONTROL.
5. SETELAH CAWAN MEMBEKU LALU DI INCUBASI 37 0C SELAMA A24-48 JAM
6. HITUNG KOLONI BAKTERI YG TUMBUH PADA SETIAP CAWAN OETRI DGN
MENGGUNAKAN COLONY CAUNTER DINYATAKAN SEBAGAI COLONY
FORMING UNIT (CFU)/ML
7. DIPILIH CAWAN PETRI SATU PENGENCERAN YG MENUNJUKKAN JUMLAH
KOLONI ANTARA 30-300 . LALU DIKALIKAN DGN FAKTOR PENGENCERAN
8. HASIL DINYATAKAN SBG ANGKA LEMPENG TOTAL.