PEMURNIAN
TITIK SUNARNI
KONTRAK PERKULIAHAN
PEMISAHAN DAN PEMURNIAN
Mata kuliah WAJIB yang berisikan tentang :
cara-cara melakukan proses pemisahan dan pemurnian suatu analit
dalam suatu sampel atau memisahkan pengotor dari sampel yang ada
dengan beberapa metode seperti ekstraksi dan kromatografi.
Metode isolasi kandungan kimia tanaman yang meliputi senyawa
alkaloid, alkaloid, flavonoid, triterpene dan steroid
MODEL PERKULIAHAN : CERAMAH DAN PENUGASAN PRESENTASI
DOSEN PENGAMPU :
1. Dr. apt. Titik Sunarni
2. Dr. apt. Iswandi
3. Dr. Suwandri
PEMISAHAN & PEMURNIAN
Ilmu pemisahan (Separation Science)
Ilmu yang mempelajari gejala fisika dan kimia yang
terlibat dalam proses atau pencapaian pemisahan,
pengembangan dan penggunaan berbagai proses
pemisahan.
Definisi pemisahan :
Cara kerja atau pengerjaan sehingga suatu campuran
dibagi menjadi sekurang-kurangnya 2 bagian atau lebih
yang berbeda susunannya
SISTEM PEMISAHAN
TERDIRI DARI 2 FASE :
FASE 1
FASE 2
Bahan Tumbuhan
c Standardization of extract
te nt Fractionation
l c on Fraction
m ica gies)
c he trate Separation -
s ed r s
a
B (old e Purification
Isolate
Characterization
& Identification
Molecular
structure
c omp ou nd
Isolation a ure
a struct
ct i vit y
se d A s)
Ba te g ie
s t ra
e r n
(mod
Phytochemistry Extract
Screening
Standardization
Standardized
Extract
Natural Product
c i dent i ty
n o f )
a tio k er Crude drug
Isol ( m ar
ou nd
p
com Extraction
Extract
Fractionation
Fraction
Separation -
Purification
Isolate
Characterization
& Identification
Marker
d fe ct Natural Product
gy ef
co lo
Pharma
test Crude drug
Extraction
Phytochemistry Extract
Screening
Standardization
Standardized
Extract
Pharmacology test
Pharmacology
Effect
f
d ti on
o
Natural Product
a r a rm
p fo
Pre sage
do
Crude drug
Extraction
Phytochemistry Extract
Screening
Standardization
Standardized
Extract
Formulation
Dosage Form
EXTRACTION
Extracting of component in
crude drug – selectively with
suitable solvent
Criteria of solvent :
• Dissolve solute
• Selective
• Volatile
• Non toxic
• Non corrosive
• Non expensive relatively
• Viscosity
Extraction
Using suitable solvent
Extraction
Tujuan redistilasi :
Untuk menghilangkan bahan kimia lain yang seringkali ada
dalam pelarut teknis yang dapat mengacaukan proses
isolasi
Kontaminan pelarut
HO
N HO
N
O
R
R
N
N
Alkaloid kina Turunan N-oksida dari alkaloid
PENGGOLONGAN PELARUT
A. BERDASARKAN KEPOLARAN
N-Heksana
Benzena
Dietileter
Diklorometan Kepolaran meningkat
Kloroform
Etilasetat
Aseton
Etanol
Metanol
air
B. BERDASARKAN GUGUS FUNGSI
Pelarut Hidroksi : Alkohol
Pelarut Oksigen : Eter, Aseton
Pelarut Belerang : Cs2
Pelarut Klor : Kloroform
Pelarut Hidrokarbon : N-heksana
Pelarut Nitrogen : Piridin
Pelarut Asetat : Asam Asetat
C. BERDASARKAN BAHAN ORGANIK / NON ORGANIK
KEUNTUNGAN : KEUNTUNGAN :
Melarutkan Lebih Slektif MURAH
Mdan Mudah Terbakarudah
Diperoleh Kembali KERUGIAN :
KERUGIAN : Tidak selektif
Harga Mahal Tidak tahan lama
Beberapa Toksik
PEMILIHAN PELARUT
ATURAN UMUM
Pelarut non-polar (petroleum eter dan heksana) akan larut senyawa non-
polar (lemak dan lilin).
Sedangkan pelarut polar (metanol, etanol dan air) melarutkan senyawa
polar (garam dan gula alkaloid).
(that mean like dissolve like)
O Hydrogen
bond
In acetone R-C
CH3
O-H---------O=C
CH3
In a mixture of acetone and ethanol
O HO-C2H5 (ethanol)
R-C CH3
OH O=C (acetone)
CH3
KONDISI YANG HARUS DIPERHATIKAN
PADA WAKTU EKSTRAKSI
1. SUHU
2. PENGADUKAN
3. PENGGANTIAN PELARUT
4. PERBANDINGAN PELARUT – LINARUT
5. UKURAN MATRIKS
SUHU
DI SEKITAR DINDING
TERJADI
SEL TERJADI
KESEIMBANGAN GRADIEN
KONSENTRASI KONSENTRASI
DI ALAM DAN DIFUSI BERHENTI
LUAR SEL
PERBANDINGAN PELARUT – LINARUT
CONTOH MASERASI :
BPOM RI 2011
10 bagian serbuk simplisia dituangi dengan 75
bagian cairan penyari, tutup, biarkan 5 hari sambil
sesekali diaduk, serkai, peras, dengan cairan : 7 ,5
1
penyari secukupnya hingga diperoleh 100 bagian.
2. KEMENKES RI 2013
Satu bagian serbuk simplisia dalam maserator 0
1 : 1
ditambah 10 bagian pelarut. Rendam selama 6 jam G
A N
pertama sambal sesekali diaduk, diamkan selama DIUL LI
18 jam. Pisahkan maserat 2 KA
Ulangi penyarian sekurang-kurangnya 2 kali dengan
jenis dan setengah kali jumlah pelarut
KELARUTAN
(FARMAKOPE INDONESIA)
Jumlah bagian pelarut yang
Istilah kelarutan diperlukan untuk melarutkan
satu bagian zat
Sangat mudah larut Kurang dari 1
Mudah larut 1 - 10
Larut 10 - 30
Agak sukar larut 30 - 100
Sukar larut 100 - 1000
Sangat sukar larut 1000 - 10.000
Praktis tidak larut Lebih dari 10.000
BENTUK EKSTRAK
EKSTRAK KERING
EKSTRAK KENTAL
EKSTRAK ENCER
EKSTRAK ENCER
U RUANG
TIDAK BOLEH DISIMPAN SUH
DALAM WAKTU LAMA CAHAYA
ARTEFAK DEKOMPOSISI
PEMEKATAN EKSTRAK
SUHU PEMEKATAN DENGAN
ROTAVAPOR
P E L A RUT
H
APAKA A M P U NG
I T
YANG D AVAOR
OT
DARI R GUNAKAN?
P A T D I
DA
Classification of extraction
1. Based on Form
er at ion
Mac
percolatio
n
Reflux
Continuos extraction
(Soxhlet)
Maceration :
Soaking the crude drug with solvent in certain time
Percolation :
Wetting the crude drug with solvent and flowing the solvent
through the crude drug in certaine time
KELARUTAN
Gradually extraction
(separation funnel)
Gradually extraction
A
maceration
reflux
LLE
(separation funnel)
Continullay extraction
B
Continuous extraction
(Soxhlet)
A Cold extraction
B Hot extraction
1 Liquid-liquid extraction
2 Chromatography
LIQUID LIQUID EXTRACTION
1.Separation Funnel
2.Craig apparatus
EKSTRAKSI CAIR-CAIR
proses yang didasarkan pada distribusi solute dalam
dua macam pelarut yang satu sama lain tidak saling
larut.
Solut larut dalam kedua macam pelarut yang tidak
saling campur dan terbagi dalam kedua macam
pelarut tersebut sampai dicapai keadaan yang
setimbang.
Umumnya salah satu pelarut adalah air, shg Kd lebih
banyak dipengaruhi sifat fisikokimia pelarut ke-2
Terms in LLE
V raf
U=β=
V ekstr
jumlah solut tak terekstraksi
p=
Jumlah solut total
C raf . V raf
p=
C raf . V raf + C ekstr . V ekstr
Kp . U
p=
1 + Kp . U
jumlah solut terekstraksi
q=
Jumlah solut total
C ekstr . V ekstr
q=
C ekstr . V ekstr + C raf . V raf
1 q = 1 - p
q =
1 + Kp . U Prosen solute terekstrasi
% q = (1 - p)X 100%
Jika volume ekstraktan = volume rafinat
β=1 U=1
Maka :
Kp 1
p = q =
Kp + 1 1 + Kp
Jika ekstraksi dilakukan n kali
Maka :
Fraksi solut tak terekstraksi = pn
Fraksi solut terekstraksi = qn
qn = 1 - p n
KERJAKAN SOAL BERIKUT INI
1. Jika suatu solut diekstraksi dengan sistem air – heksan mempunyai nilai
koefisien partisi 0,55. Volume air 25 ml, sedang volume heksan 40 ml.
Berapakah % solut terekstraksi setelah 4 kali ekstraksi dengan masing-
masing tahapan menggunakan volume heksan 40 mL?
2. Jika koefisien partisi suatu solut dalam sistem air – n-heksan 0,47 dan solut
terlarut dalam air 25 mL diekstraksi dengan masing-masing 40 mL n-heksan
sebanyak 3 kali. Berapakah % solut terekstraksi setelah 3 kali ekstraksi.
Berapakah % solut terekstraksi jika diekstraksi dengan sekaligus 120 mL n-
heksan (1 kali)?
3. Jika koefisien partisi suatu solut 0,49 diekstraksi dengan sistem air – heksan dimana
solut terlarut dalam heksan 50 mL diekstraksi dengan air 60 mL. Berapakah % solut
terekstraksi setelah 4 kali ekstraksi dengan masing-masing tahapan menggunakan
volume air 60 mL?
Petunjuk mengerjakan soal
Jika mau menghitung harus ditentukan dulu mana yang
rafinat dan mana yang ekstraktan
Umumnya yang disebut didepan rafinat
Misal :
Kp = 0,48 pada sistem air – heksan, maka :
Air rafinat
Heksan ekstraktan
tetapi jika ada pernyataan Kp = 0,48 pada sistem air –
heksan, solut terlarut pada heksan 50 ml diekstraksi
dengan air 60 ml, artinya :
Heksan rafinat
Air ekstraktan
Kp A = 0,48 pada sistem air – heksan, maka :
Air rafinat
Heksan ekstraktan
Kp1
Kp yang lebih besar pembilang
Kp2
α>1
Makin besar α ekstraksi makin baik, namun saja tidak
bermanfaat
Contoh :
Campuran X : KpA = 2, Kp B = 0,5 α = 4,0
Campuran Y : Kp A = 20, Kp B = 5 α = 4,0
FAKTOR PEMISAH
Faktor perolehan kembali B
S B/A =
Faktor perolehan kembali A
S RA
B/A =
RB
W A yang terisolasi
R A=
(W A ) TOTAL
Ekstraksi Craig
Menggunakan peralatan Craig yang
diatur fase cair ringan (bj kecil)
ditransfer dari satu tabung ke yang
berikutnya.
untuk memisahkan dua zat atau lebih,
dengan perbedaan Kp < 0,1.
EKTRAKSI CAIR-CAIR BERKESINAMBUNGAN
ALAT CRAIG
Contoh soal
Senyawa A mempunyai Kp = 3,4 dipisahkan dengan alat Craig, Volume rafinat
sama dengan volume ekstraktan. Berapa % fraksi yang terekstraksi pada
tabung no 4, setalh 7 kali ekstraksi.
Campuran mengandung senyawa X (Kp = 0,32) dan Y (Kp = 0,29) dipisahkan
dengan alat Craig. Volume rafinat sama dengan volume ekstraktan. Bera % X
dan Y dalam tabung no 1, 2, 3, 4, 5 setelah 8 kali transfer. Buat kurva f n,r vs
no tabung untuk kedua senyawa dalam gambar 1
TUGAS PRESENTASI
KLT BIOAUTOGRAFI
KROMATOGRAFI CENTRIFUGAL (KROMATOTRON)